HPV E6/E7 mRNA检测在年轻女性宫颈癌筛查及宫颈疾病诊治中的应用价值

李满元 刘文 王宝 赵劲松 王佳美

(锦州市妇婴医院， 辽宁锦州 121000)

临床研究[1]发现，人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌的重要致病因素之一，宫颈癌患者中绝大多数人合并HPV感染，多数宫颈癌患者早期确诊后经过治疗可以治愈，治愈率高达85%以上。年轻女性中HPV感染率较高，大部分为一过性无症状感染，致癌率低，但持续HPV感染的女性患者，其宫颈癌发病率较高，通过对年轻女性实施HPV E6/E7 mRNA检测可以作为区分患者HPV感染是否存在持续性的重要手段，临床应用日益广泛[2]。本实验评估了HPV E6/E7 mRNA检测用于年轻女性宫颈癌筛查及宫颈疾病诊治中的应用价值，现将实验结果分析如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取我院2017年6月至2018年5月收治的实施TCT检查阳性的260例女性患者。应用数字表法将患者分为观察组与对照组，各130例。对照组患者实施HPV DNA检测，观察组患者实施HPV E6/E7 mRNA检测。观察组患者年龄20～30岁，平均(24.16±3.48)岁。对照组患者年龄20～30岁，平均(25.19±3.59)岁。纳入标准：入组患者年龄介于20～30岁，入组实验前接受TCT筛查，结果呈阳性。排除标准：排除年龄>30岁，过往宫颈手术史者，妊娠期或哺乳期女性，入组前3～7 d有性生活者，阴道接受药物治疗或理疗者，其他可能影响实验结果的病例。所有患者入组前知晓实验内容，签署知情同意书，实验方法符合院伦理委员会相关标准。两组患者年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2检测方法

1.2.1TCT检测 所有患者入组前，3～7 d禁止性生活，禁止使用药物冲洗阴道或服用影响TCT检测的药物。由专职医护应用TCT采集毛刷，收集患者脱落细胞放入专用采样瓶中备检。对患者检测结果应用阴道细胞学的分类及报告细则(TBS)分级：细胞呈炎症反应性改变(NILM)、非典型鳞状上皮细胞(ASC)、上皮内高度病变(ASC-H)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)。

1.2.2HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA检测[3]所有患者入院治疗后，同期行HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA检测。患者选择膀胱截石位，完全显露宫颈后，用无菌棉签清洁宫颈表面分泌物后，使用无菌宫颈采集刷头沿着宫颈表面，顺时针旋转2～4周采集样本，将专用采集刷头浸入仪器对应的测试细胞保存液中后完全漂洗，确保采集刷头上样本全部进入细胞保存液，密封后，贴标签送病理科检测，对样本处理、探针杂交、信号放大、读板测定等试验后，以检测值≥1诊断为阳性。

1.2.3病理检测[3]对HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA检测阳性患者行阴道镜活检+病理检测。病理分级：宫颈炎症、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级、CINⅡ级、CINⅢ级、宫颈癌。

1.3观察指标 统计两组患者的TBS分级结果、HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA检测结果阳性率及上述两种检测结果与病理检测结果的相关性。

1.4统计学方法 采用SPSS19.0软件对所有数据实施预处理。计数资料应用χ2检验，以P<0.05为差异统计学意义。

2 结 果

2.1两组患者TBS分级情况比较 两组患者应用TCT检测后TBS分级情况接近，组间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组患者TBS分级情况比较[(n)%，n=130]

2.2两组患者检测结果比较 观察组患者检测阳性病例42例，占比为32.31%；对照组患者检测阳性病例53例，占比为40.77%；两组患者的阳性检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3两组患者中检测阳性患者的病理检测结果比较 观察组患者CINⅡ级以下检出率低于对照组患者(P<0.05)；两组患者病理分级为CINⅡ以上检出率差异不大，无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两组患者中检测阳性患者的病理检测结果比较[(n)%，n=130]

3 讨 论

HPV病毒持续感染是女性宫颈癌发病的高危风险因素之一，随着女性患者对宫颈癌的认识及早期筛查意愿的不断增强，定期检测HPV的感染情况对于防控宫颈癌的发展具有较高临床应用价值[4]。宫颈癌发病近年来出现低龄化的走势，对于30岁以下有过性生活的中青年女性，其宫颈癌发病率呈逐年增高趋势，故对于此类人群的宫颈癌早期检测成为目前学术界研究的重点[5]。

临床研究[6]发现，TCT检查联合HPV DNA检测技术对于宫颈癌早期筛查具一定预测价值，少数年轻女性发生HPV感染后，经过一段时间感染被自我修复，此类患者应用HPV DNA检测时会被定义为阳性，导致该检测技术对于年轻女性的宫颈癌筛查假阳性率增高。HPV E6/E7 mRNA检测可以轻松避免年轻女性过往HPV感染出现的筛查假阳性现象，提高病理诊断符合率[7]。临床研究发现，HPV病毒中E6/E7 基因是宫颈癌的主要致病基因[8]，E6通过抑制宿主p53基因表达阻断细胞凋亡过程，影响相关细胞的抗癌作用；E7可抑制pRB基因表达影响细胞周期，促进炎症细胞大量增殖恶变，进而发展为癌症[9]。HPV E6/E7 mRNA的水平可以预测HPV病毒活性及癌变风险，通过评估患者体内HPV E6/E7 mRNA水平的高低，对于宫颈癌的早期筛查具有较高临床价值[10]。

我院通过对TCT检查阳性患者实施HPV E6/E7 mRNA检测，两组患者应用TCT检测后TBS分级情况接近，实验分组患者临床资料无差别，符合实验要求；观察组患者阳性检出率为32.31%低于对照组患者的阳性检出率40.77%；两组患者CINⅡ级以下检出率存在显著差异，病理分级为CINⅡ以上检出率差异不大，上述结果表明对照组患者采用的HPV DNA检测技术对于既往出现过HPV感染，而现在自愈的患者存在假阳性诊断，而HPV E6/E7 mRNA检测可有效排除上述既往出现过HPV感染目前无症状的患者，大幅提高诊断准确度，降低假阳性率，提高病理诊断符合率。

综上所述，临床对TCT检查阳性的年轻女性实施HPV E6/E7 mRNA检测，可提高宫颈癌的筛查准确度，有助于区分不同类型的宫颈疾病的临床诊治，值得广泛推广与应用。由于本次实验病例样本数量较少，所得结论存在一定局限性，日后会加入更大量病例样本做持续性研究。