探讨LncRNA遗传多态性及其与结直肠癌风险和预后的相关性

周春燕 黄可可 任妹 刘剑荣 夏洪娇

【摘要】 目的：探究并分析LncRNA遺传多态性与结直肠癌风险和预后的相关性。方法：选取2012年1月-2016年1月本院收治的结直肠癌患者123例，对其进行LncRNA遗传多态性检测，并探究其与结直肠癌发病及预后的相关性。此外，根据患者基因检测结果从中选取50例Loc285194基因高表达患者作为观察组，50例Loc285194低表达为对照组。观察并记录所有患者一般资料，分析结直肠癌预后影响因素与预后的相关性，比较两组术后并发症发生情况、患者生存情况。结果：对123例结直肠癌预后影响因素进行单因素分析，可见年龄、手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05）。根据多因素分析结果，可见手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05），其中手术时间、Loc285194与患者预后有较高相关性（P<0.05），而rs6983267（GG）与结直肠癌预后相关性稍低（P<0.05）。观察组患者吻合口漏/感染、性功能障碍、复发或者转移、粘连性肠梗阻、排尿功能障碍发生率均明显低于对照组（P<0.05）。对照组术后6个月、1年、3年的生存率分别为84.0%、64.0%、42.0%，观察组患者术后6个月、1年、3年分别为90.0%、82.0%、70.0%，观察组患者术后1、3年生存率均显著高于对照组（P<0.05）。结论：手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关，其中Loc285194基因高表达的结直肠癌患者预后及术后并发症发生情况显著优于Loc285194基因低表达的患者，值得临床关注。

【关键词】 基因型 结直肠癌 预后

[Abstract] Objective： To explore and analyze the relationship between Lncrna genetic polymorphism and colorectal cancer risk and prognosis. Method： From January 2012 to January 2016， 123 patients with colorectal cancer were selected to detect the genetic polymorphism of Lncrna， and its correlation with the incidence and prognosis of colorectal cancer was explored. In addition， 50 patients with high expression of Loc285194 gene were selected as the observation group and 50 patients with low expression of Loc285194 gene were selected as the control group according to the results of gene detection. The general data of all patients were observed and recorded. The correlation between prognosis factors and prognosis of colorectal cancer of all patients were analyzed. The occurrence of postoperative complications and the survival of two groups were compared. Result： Single factor analysis showed that age， operation time， rs6983267 （GG）， Loc285194 were related to the prognosis of colorectal cancer （P<0.05）. According to the results of multi factor analysis， operation time， rs6983267 （GG）， Loc285194 were related to the prognosis of colorectal cancer （P<0.05）. Among them， the operative time and Loc285194 had a higher correlation with prognosis （P<0.05）， while rs6983267 （GG） had a lower correlation with prognosis of colorectal cancer （P<0.05）.The patients in the observation group had significantly lower incidence of anastomotic leakage / infection， sexual dysfunction， recurrence or metastasis， adhesive intestinal obstruction and urination dysfunction than those in the control group （P<0.05）. After operation 6 months， 1 year and 3 years， the survival rate of the control group was respectively 84.0%， 64.0% and 42.0%， in the observation group， 90.0%， 82.0% and 70.0% respectively. The 1 year and three-year survival rate in the observation group were significantly higher than those of the control group （P<0.05）. Conclusion： The operation time， rs6983267 （GG） and Loc285194 are related to the prognosis of colorectal cancer. The prognosis and postoperative complications of colorectal cancer patients with high expression of Loc285194 gene are significantly better than those with low expression of Loc285194 gene， which deserves clinical attention.

[Key words] Gene typeColorectal Cancer Prognosis

First-authors address： Pingxiang Peoples Hospital， Pingxiang 337000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.32.042

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是我国肿瘤发病率和死亡率分别位列第三位和第五位的常见恶性肿瘤[1]。研究表明CRC是环境因素与相关基因共同交互作用的结果[2]。长链非编码RNA（long noncoding RNA， LncRNA）是一类转录本长度超过200个核苷酸、缺乏蛋白编码功能、结构保守的RNA分子。近年来，LncRNA已经成为肿瘤研究中的“热点”，特别是在结直肠癌、肝癌和食管癌中大量报道[3-4]。在结直肠癌中，已经鉴定出大量的与之相关的LncRNA基因，如CCAT1、CCAT2、CRNDE、 、LncRNA-PCAT、HOTAIR和MALAT1等。上述LncRNA分子，在结直肠癌组织中呈现时空特异差异表达，发挥着癌基因或抑癌基因作用[5-6]。为此，笔者将100例患者纳入研究中，并探究基因多态性与结直肠癌预后的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年1月-2016年1月本院收治的结直肠癌患者123例。（1）纳入标准：①符合第八版内科学中结直肠癌的诊断标准[7];②本身有严重呼吸或者循环系统疾病;③所有患者均未合并上呼吸道感染;④无消化系统畸形或者手术史。（2）排除标准：①物质滥用或依赖者;②中途退出本研究者;③对本研究所用药物过敏者;④各种原因引起的凝血功能障碍者。

1.2 方法 对123例结直肠癌患者进行LncRNA遗传多态性检测，并探究其与结直肠癌发病及预后的相关性。此外，根据患者基因检测结果从中选取50例Loc285194基因高表达患者作为观察组，50例Loc285194低表达为对照组。观察并记录所有患者一般资料（年龄、性别、婚姻状况、收入情况、文化程度、BMI指数、手术时间、rs6983267、Loc285194表达情况），分析两组患者结直肠癌预后影响因素与预后的相关性，术后并发症发生情况、患者生存情况。实验室检查：采用PCR-RFLP和DNA测序等方法对以上患者进行基因分型。患者于本院进行手术，术后笔者对其进行连续3年的电话随访工作，以获得患者生存预后资料（术后并发症发生情况以及术后6个月、1年、3年的生存率），通过连续三年电话随访获得部分患者生存预后资料。利用q-RT-PCR检测LncRNA和相关基因的表达情况。本研究涉及的基因检测，全部外包检测，试剂均购自北京蓝派生物技术有限公司。

1.3 预后评价标准 预后良好：术后出现并发症数量≤2个，或者患者3年后未死亡，将其归为预后良好组。预后不良：术后出现并发症数量>2个，或者患者三年内死亡，将其归为预后不良组。

1.4 统计学处理 使用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计数资料以率（%）表示，患者文化程度比较采用方差分析，预后影响高危因素分析采用单因素分析、多因素采用Logistic回归分析，术后并发症发生情况、生存情况比较采用字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较 对照组男27例，女23例;年齡45～65岁，平均（55.5±7.1）岁;体重40～75 kg，平均（60.5±9.3）kg。观察组男29例，女21例;年龄44～64岁，平均（55.3±7.2）岁;体重41～74 kg，平均（55.1±7.2）kg。两组基线资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 患者预后影响因素单因素分析 对100例结直肠癌患者预后影响因素进行单因素分析，根据单因素分析结果，可见年龄、手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05），见表1。

2.3 患者术后预后影响因素Logistic多因素回归分析 根据多因素分析结果，可见手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05），其中手术时间、Loc285194与患者预后有较高相关性（P<0.05），而rs6983267（GG）与结直肠癌预后相关性稍低（P<0.05）。见表2。

2.4 两组患者术后并发症发生情况比较 观察组患者吻合口漏/感染、性功能障碍、复发或者转移、粘连性肠梗阻、排尿功能障碍发生率均明显低于对照组，两组比较差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.5 两组患者生存情况比较 观察组患者术后

1、3年生存率显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

3 讨论

结直肠癌组织中差异表达的LncRNA基因的遗传变异位点可通过增强或抑制转录因子、miRNA靶点的结合能力或改变其空间构象等方式，影响肿瘤组织中LncRNA的表达含量和功能[8-12]。然而，与肿瘤相关的LncRNA遗传变异相关性研究还仅仅出于起步阶段，LncRNA基因的遗传变异和结直肠癌的关联报道甚少[13-15]。

Loc285194是一个p53转录靶点，Loc285194的异常表达抑制体外和体内肿瘤细胞的生长。同时，这个Loc285194介导的生长抑制在某种程度上归因于miR-211的特异性抑制。研究发现Loc285194和miR-211间的一个相互抑制;与Loc285194相反，miR-211促进细胞生长[16-17]。而定量PCR实验和组织微阵列原位杂交检测再一次证实了Loc285194在结肠癌样品中的存在下调现象。

本研究中，对100例结直肠癌预后影响因素进行单因素分析，根据单因素分析结果，可见年龄、手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05），根据多因素分析结果，可见手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关（P<0.05），其中手术时间、Loc285194与患者预后有较高相关性（P<0.05），而rs6983267（GG）与结直肠癌预后相关性稍低（P<0.05）。此结果表明，Loc285194的表达与患者预后呈负相关，Loc285194低表达能有效提示结直肠癌患者预后不良。Bahadir等[18]也在研究中得出相似结论，可能与Loc285194基因的高表达有效抑制了miR-211的表达有关，而miR-211的高表达能促进癌症因子的表达。观察组患者吻合口漏/感染、性功能障碍、复发或者转移、粘连性肠梗阻、排尿功能障碍发生率均明显低于对照组（P<0.05）。此结果表明，Loc285194高表达患者术后并发症发生率显著低于Loc285194低表达患者，提示Loc285194基因的表达与患者预后密切相关，Moossavi等[19]也在研究中得出相似结论。对照组术后6个月、1年、3年生存率分别为84.0%、64.0%、42.0%，观察组患者术后6个月、1年、3年分别为90.0%、82.0%、70.0%，观察组患者术后1、3年生存率均显著高于对照组（P<0.05）。此结果表明，Loc285194高表达患者术后生存率显著高于Loc285194低表达患者，这在术后1年以后差距更加明显，Irsan等[20]也在研究中发现，Loc285194高表达患者比Loc285194低表达患者生存时间更长，这可能与Loc285194低表达状态下，癌症细胞接触抑制作用解除有关，而这有利于癌症细胞的扩散，不利于患者预后。

综上所述，手术时间、rs6983267（GG）、Loc285194与结直肠癌的预后有关，其中Loc285194基因高表达的结直肠癌患者预后及术后并发症发生情况显著优于Loc285194基因低表达的患者，值得临床关注。

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（收稿日期：2019-08-21） （本文编辑：周亚杰）