香菇高粱菌种制作工艺的优化
2019-01-08贾峥嵘薛变丽
段 超 贾峥嵘 杨 杰 陈 丽 薛变丽
(1山西省农业科学院棉花研究所,山西运城044000;2山西省农业科学院食用菌研究所,山西太原030031)
香菇(Lentinus edodes)是最著名的食用兼药用真菌之一,也是我国重要的食用菌出口产品,在民间素有“山珍”之称[1]。菌种生产作为食用菌栽培的首道工序,关系着食用菌生产的成败[2]。目前,食用菌菌种生产中常用棉籽壳、木屑、谷粒及木条为原料制作栽培种[3]。谷粒菌种包括小麦菌种、高粱菌种、玉米菌种等。宋莹等对宾王菇麦粒菌种做了试验[4]。高粱菌种比传统的棉籽壳木屑菌种制种工艺简单、发菌快,能很大程度缩短香菇菌种生产时间。然而,关于香菇高粱菌种的研究较少且生产工艺不成熟。为此,笔者采用正交试验对香菇高粱菌种的生产工艺进行优化。
1 材料与方法
1.1 供试香菇菌株
供试菌株为香菇庆科212,由山西省农业科学院棉花研究所提供。
1.2 培养基制作
选择新鲜无霉变的高粱种子,根据配方(高粱88%,麸皮10%,碳酸氢钙1%,生石灰1%)计算需要用的各原料。将干高粱浸泡到溶有生石灰的自来水中,高粱浸泡1~2 d后将其从水中捞出沥干,按配方将麸皮、碳酸氢钙与高粱混合均匀,分装入17 cm×23 cm袋中,每袋装料0.45 kg左右。培养料装袋后快速高压灭菌2 h,灭菌完、冷却后在无菌环境下对其接种。
1.3 试验设计
单因素试验:试验1设置3种浸泡时间为24 h,48 h,72 h,浸泡温度设置为25℃,浸泡液为3%石灰水溶液。
试验2 为了避免开水煮高粱不好控制时间,同时为了降低能耗。设置3种浸泡温度为15℃,25℃,35℃,45℃,浸泡时间设置为48 h,浸泡液为3%石灰水溶液。
试验3 设置4种浸泡液生石灰浓度为1%,3%,5%,7%,浸泡时间设置为48 h,浸泡温度设置为25℃。
上述三个试验每个处理制作100袋。
试验4 正交试验设计
在单因素试验的基础上,对浸泡时间、浸泡温度和浸泡液生石灰浓度进行3因素3水平L9(33)正交试验。每个处理设置3个重复,每个重复制作100袋,试验因素及水平见表1。
表1 正交试验设计
1.4 观察内容及方法
观察并记录菌丝长势、菌丝颜色、满袋时间、污染袋数。按以下标准评价菌丝体菌丝长势:+++,表示菌丝浓密;++,表示菌丝一般;+,表示菌丝稀疏。菌丝颜色分为浓白、白和较白。
2 结果与分析
2.1 不同浸泡时间的高粱制作香菇菌种结果
由表2可知,浸泡时间为48 h的高粱培养基菌丝长势浓密,满袋时间最短,但有少量的污染袋。浸泡时间为24 h,满袋时间较浸泡时间48 h稍长。浸泡时间为72 h,菌丝长势弱,满袋时间长,污染袋数多。可见制作香菇高粱菌种,高粱适宜的浸泡时间为24~48 h。
图1 生长中的香菇高粱菌种
图2 长满的香菇高粱菌种
图3 转接高粱菌种(左)与棉籽壳菌种(右)栽培种长势比较
表2 不同浸泡时间浸泡高粱制香菇菌种结果
2.2 不同浸泡温度浸泡高粱制作香菇菌种结果
如表3所示,浸泡温度为15℃和25℃时,高粱菌种菌丝长势强,浓密,满袋时间短。浸泡温度为45℃时,菌丝长势弱,稀疏,满袋时间长,污染严重。有此可见,香菇高粱菌种高粱适宜的浸泡温度为15~25℃。
表3 不同浸泡温度浸泡高粱制香菇菌种结果
2.3 不同生石灰浓度浸泡液浸泡高粱制作香菇菌种结果
添加不同质量浓度的生石灰对培养基灭菌前后的pH值均有影响,不同的pH值直接影响菌丝的生长情况[5]。如表4所示,生石灰浓度为1%~3%时,高粱菌种菌丝长势强,浓密,满袋时间短,污染袋数少。生石灰浓度为7%时,菌丝长不满菌袋,污染严重。有此可见,制作香菇高粱菌种,高粱浸泡液适宜的生石灰浓度为1%~3%。
表4 不同生石灰浓度浸泡液浸泡高粱制香菇菌种的结果
表5 正交试验结果分析
2.4 正交试验结果
通过单因素试验中选出的最佳水平:浸泡时间为 24~48 h,浸泡温度为 15~25℃,生石灰浓度为1%~3%。在此基础上,对浸泡时间、浸泡温度和生石灰浓度进行三因素三水平的正交试验。每个处理重复3次。正交试验结果见表5。
这三个因素中,生石灰浓度为最主要的影响因素,浸泡时间次之,浸泡温度为影响最小的因子。
根据正交试验所得的香菇高粱菌种生产的最佳条件为A2B3C1。说明在制作香菇高粱菌种时,高粱较为适宜处理方式为:高粱的浸泡时间为36 h,浸泡温度为25℃,生石灰浓度为1%。浸泡时间过短会导致高粱心泡不透,且造成灭菌的时候灭菌不彻底,接种后香菇菌丝长势不强,且容易感染杂菌。浸泡温度在15~25℃差别不大,在实际生产过程中视情况选用室温即可。浸泡液生石灰浓度过高,会导致高粱碱性太强,抑制香菇菌丝的生长,并导致污染率上升。
3 小结
香菇菌种一般采用棉籽壳或木屑为主要原料,制作的菌种接种时不易散开,在生产中需要更多的原种。选用高粱制作原种,可以减少每袋接种量,且高粱比小麦、棉籽壳、玉米颗粒小,易散开,萌发点多,可缩短发菌时间。
培养料含水量是影响菌丝生长和出菇的重要因素,含水量适宜才能保证菌种质量[6]。然而,高粱菌种在制作过程中如果浸泡制不透或过度而破裂,导致培养基含水量不足或过多,含水量不足会导致灭菌不透污染上升,含水量过多导致培养基呈糊状,影响透气和菌丝生长[7]。
试验结果对于高粱产地利用高粱制作香菇菌种,具有一定的参考作用。