胃溃疡-失血性休克实验技术创新在实验教学中的探讨

李天舒，刘 龙，刘亚男，秦 源

(1.吉林大学基础医学院机能科学实验中心，吉林 长春130021；2.吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033；3.吉林大学护理学院2016级，吉林 长春130021)

随着人民生活水平的发展，人们逐渐增加自我健康保护，既往因饮食不规律，寒冷所导致的胃溃疡逐渐减少；而人们因为外伤，重病，其他刺激情况所导致的失血性休克-应激性胃溃疡比重逐渐增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的溃疡程度[1]，导致在临床上治疗效果不佳。基础医学教学内容也应随着疾病的发展而创新，为了让同学们对疾病有新的了解，我们创新了传统的病理生理学实验“大鼠应激性胃溃疡”实验技术方法，以往实验内容包括应激性胃溃疡的两种模型的复制：倒置法和冷储法。实验前将大白鼠24 h禁食，自由饮水，然后通过倒置法和冷储法复制大鼠应激性胃溃疡模型[2]。现通过实验技术方法的创新，将基础实验教学和临床医学问题紧密联系，联合药物对应激性胃溃疡模型的治疗及缺血再灌注损伤机制探讨，帮助同学更好的了解应激性胃溃疡的发生机制和药物抗应激性胃溃疡的原理。通过实验技术方法的创新，引导学生自主学习，从而培养学生的创新能力[3]。

1 失血性休克大鼠应激性胃溃疡动物模型的建立

1.1将大白鼠分为三组，空白对照组，给药组，模型组。空白对照组：正常饮食饮水；给药组和模型组：术前24 h禁食，自由饮水，倒置和冷储2 h。

1.2大鼠麻醉固定，颈部手术，分离一侧颈总动脉和一侧颈外浅静脉，颈动脉插管(用静脉留置针插管方便记录血压及放血比较简洁方便)，记录血压，插颈外浅静脉备再灌注用。通过颈总动脉静脉留置针放血至平均动脉压40 mmHg，给药组给药。10 min后经静脉插管回输血液(放出的动脉血里含少量肝素生理盐水)，所有动物90 min后处死，找到大鼠的胃，分别结扎幽门和贲门，在结扎线的外侧剪断胃与食管、十二指肠连接处。取出胃，向胃腔内注射10%甲醛溶液10 ml,再将胃放入甲醛溶液浸泡15 min。

1.3将胃平展在玻璃平皿上，观察空白对照组，模型组，给药组胃黏膜溃疡的大小及数目，进行胃黏膜组织损伤溃疡指数判定(分7度)[4]。

1.4取胃粘膜组织进行超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，黄嘌呤氧化酶(XOD)测定。

1.5在实验教师的指导下，同学们进行实验数据的统计处理，分析疾病发生机制和相关药物治疗机制。

2 结果

2.1通过“失血性休克-应激性胃溃疡实验的改进”使同学们掌握了复制失血性休克-应激性胃溃疡动物病理模型的方法。以往大鼠应激性胃溃疡实验内容比较单一，只是通过简单的冷藏，倒立复制胃溃疡模型，同学对实验不感兴趣。通过实验技术方法的创新，新实验的动物手术操作比较复杂，实验内容紧密联系临床实际以及最新抗溃疡药物的治疗进展，增强了同学们对医学机能实验学的兴趣，也提高了同学们手术操作能力，为今后临床外科工作奠定了基础。

其中本实验创新的方法用静脉留置针代替了传统的动静脉插管，由于大鼠动静脉管径小，一般插管极易凝血，静脉留置针管壁由于特殊原料抗凝血效果好，使动脉放血过程更加便利，减少了凝血因素带来的困扰。

2.2测定动物血清MDA，SOD。MDA是组织脂质过氧化产物，胃组织MDA显著增高，与胃溃疡指数呈正比[5]，SOD为超氧化物歧化酶，其作用是催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，防止氧化损伤的发生[6]，通过实验让同学了解失血性休克再灌注后，氧自由基参与胃溃疡的发生，SOD值在再灌注后显著下降是由于强烈的应激作用会导致大鼠体内组织超氧化物歧化酶含量降低。通过这些指标的变化，可以帮助同学们熟悉应激性胃溃疡的发生机制。

3 结语

人类疾病动物模型已成为现代医学认识生命科学客观规律的主要工具，通过研究动物模型，可更加准确地观察实验结果，从而有助于人们更深刻地认识人类疾病的发生、发展规律和采取更有效的防治措施[7]。

复制应激性胃溃疡动物模型有很多种，如饥饿，冷藏，电击，休克[8]。近年来临床由于外伤，重病及其他刺激情况下，出现胃、十二指肠黏膜急性病变增多，当胃黏膜溃疡恶化侵蚀大血管时，可引起大出血，导致的失血性休克-应激性胃溃疡比重逐渐增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的溃疡程度。医学机能实验教学是培养临床医学生通过对功能异常的动物病例模型的复制和药物的应用有机结合，更贴近于临床实际，更好地为医学生奠定医学知识.实验动物模型的复制对于研究疾病大发生机制，起着十分重要的作用。因此我们在“大鼠应激性胃溃疡”传统验证实验的基础上进行了实验技术方法的创新，增加药物对应激性胃溃疡模型的治疗及缺血再灌注损伤机制探讨。可使同学们更加全面了解疾病的发生机制，帮助同学们未来学习临床医学知识奠定坚实的基础医学知识。