微柱凝胶卡法在配血不符受血者抗体筛检及鉴定中的应用

潘晓红

交叉配血试验是确保输血安全的重要环节之一。盐水法、抗人球蛋白法作为以往临床常用交叉配血方法，存在一定缺陷，具有操作复杂、检测时间常长、敏感性低、干扰因素较多等缺点，对输血者生命安全造成严重危害［1］。因此实施一种敏感性较高、耗时短且安全可靠的交叉配血方法至关重要。相关研究发现，MGT作为免疫血清学技术与微柱凝胶技术结合产物，可有效弥补上述交叉配血方法的不足，保障输血安全［2］。本研究选取2890例输血患者作为研究对象，旨在研究MGT在在配血不符受血者抗体筛检及鉴定中的临床应用效果。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年9月～2018年8月本院收治的2890例输血患者作为研究对象。其中, 男1980例, 女910例；年龄19～76岁, 平均年龄(48.32±9.24)岁。本研究经本院伦理委员会审核批准, 且患者及其家属均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂与仪器 由深圳市康乃格生物技术有限公司提供的微柱凝胶卡器械(孵育箱、离心机), 由上海血液生物医药有限责任公司提供的改良凝聚胺试剂。

1.2.2 标本要求 均采用EDTA抗凝管(由上海新睿生物科技有限公司提供), 并以3000 r/min进行离心分离。

1.2.3 MPT法 取2支小试管(干净、无污染), 1支标明主侧为血清(受血者)+红细胞(献血者), 另1支标明次侧为血清(献血者)+红细胞(受血者), 依照标记主侧管滴50 μl受血者血清+1滴献血者红细胞悬液+3滴低离子介质, 混匀,静态放置0.5 min；次侧管滴1滴血清(献血者)+50 μl红细胞悬液(受血者)+3滴低离子介质, 混匀, 静态放置0.5 min。主次侧管均加入1滴凝聚胺, 混匀, 离心时间15 s, 3500 r/min,扣摇；待出现明显凝聚状(肉眼可见), 于管底加入1滴假凝集清除液, 轻轻摇晃, 持续60 s, 接着将反应物置于载玻片上,利用显微镜对其进行观察, 其中阴性为无凝集者；阳性为60 s内凝集无法被清除者。

1.2.4 MGT法 将按规定保存的配血卡取出, 放进专业离心机进行离心分离, 时间为15 min, 然后取2支小试管(干净、无污染), 1支标明主侧为血清(受血者)+红细胞(献血者), 另1支标明次侧为血清(献血者)+红细胞(受血者),依照标记主侧管加受血者血清(50 μl)+献血者红细胞悬液(0.5%～0.8%), 次侧管加献血者血清(50 μl)+受血者红细胞悬液(0.5%～0.8%), 放入孵育箱(37℃)孵育0.25 h后离心(900 r/min,离心时间2 min；1500 r/min, 离心时间3 min)。肉眼可见条件下,阴性：红细胞均匀沉于孔底；阳性：红细胞悬浮于微柱凝胶表面。

1.3 观察指标 ①两种检测方法不规则抗体筛检结果。②两种检测方法检出交叉配血不合情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS25.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法不规则抗体筛检结果比较 MGT法筛检出不规则抗体11例, 不规则抗体筛检率为0.38%；MPT法筛检出不规则抗体8例, 不规则抗体筛检率为0.28%, 两种方法不规则抗体筛检率比较差异无统计学意义(χ2=0.475,P=0.491＞0.05)。见表 1。

2.2 两种检测方法检出交叉配血不合情况比较 MGT法检出交叉配血不合率为0.97%(28/2890), 明显高于MPT法的0.52%(15/2890), 差异有统计学意义 (χ2=3.960,P=0.047＜0.05)。

3 讨论

不规则抗体检查作为引发交叉配血不相合主要原因，是指与ABO血型法则不相符的血型抗体，多为免疫球蛋白G(IgG)抗体，其产生与输血、妊娠等免疫刺激有关，若无法有效检出不规则抗体，易诱发溶血性输血反应，威胁患者生命安全。因此实施准确性较高检测方法对保证患者生命安全具有重要意义［3］。

MPT通过红细胞血型抗原及抗体大分子聚合物，可有效削弱静电斥力(红细胞)，促进分子加快运动，辅助红细胞血型抗原联合相应抗体，同时借助机械离心作用，呈现出凝集状(肉眼可见)，由于特异性免疫凝集因子对附加假凝集消除液敏感度较低，因此凝集状维持时间较长，可检出免疫球蛋白M(IgM)或IgG等相应抗体或抗原。但由于MPT法为纯手工操作，过程较为复杂，后期无法进行复读，同时其影响因素较多 ，易忽视较弱凝集 ，影响判定结果［4］。

MGT法可有效克服MPT法缺点，其主要通过于微孔内(注有凝胶)加入血清与红细胞悬液，根据分子排阻原理于特定离心下对血液中红细胞免疫复合物是否形成、是否含有特异性抗体等进行检测，从而获得判定结果。相较于MPT法，其敏感性更好，具有操作简单、误差少、可重复性高、自动化检测、保存时间长等显著优点，同时研究发现，其选取红细胞悬液含量较少，可有效用于新生儿与大面积烧伤等抗体筛检及交叉配血，另外其离心前将标本放入孵育箱，可有效减少或消除冷抗体影响，提高筛检准确性［5-8］。

本研究结果发现，MGT法筛检出不规则抗体11例，不规则抗体筛检率为0.38%；MPT法筛检出不规则抗体8例，不规则抗体筛检率为0.28%，两种方法不规则抗体筛检率比较差异无统计学意义 (χ2=0.475，P=0.491＞0.05)。MGT 法检出交叉配血不合率为0.97%(28/2890)，明显高于MPT法的0.52%(15/2890)，差异有统计学意义(χ2=3.960，P=0.047＜0.05)。上述结果提示MGT法应用于配血不符受血者，不规则抗体筛检率及安全性较高。

综上所述，MGT法应用于配血不符受血者，安全性较高，具有抗体筛检率较高、操作简单、保存时间长等显著优点，可有效用于配血不符受血者的筛检与鉴定。