自然放牧和TMR育肥对绒山羊成年母羊消化道酶活性的影响

■温 琦 格日乐玛 闫素梅

(内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古 呼和浩特 010018)

阿尔巴斯白绒山羊是世界著名的绒肉兼用型品种。但是近年来，随着羊绒价格不断下降和羊肉需求量不断提高，使得羊肉生产成为饲养绒山羊新的经济增长点。另一方面，在正常的绒山羊生产中，每年有30%左右的成年母羊被淘汰作为肉用，成为羊肉生产的重要来源。然而，传统的天然放牧育肥使得草场生态受到了严重破坏。因此，改变传统的饲养方式，对淘汰羊实施短期的舍饲育肥成为了目前主要的育肥方式，这也是保证绒山羊产业可持续发展的重要途径。消化道酶活性可间接反映动物对饲粮营养物质的消化程度，与其生长育肥性能和屠宰性能密切相关。课题组前期研究了放牧育肥与舍饲TMR育肥对绒山羊母羊营养物质消化率的影响，结果发现，与放牧育肥相比，舍饲育肥显著提高母羊营养物质表观消化率，这可能与两组羊的肠道消化酶活性不同有关。因此，本试验主要研究不同育肥方式[自然放牧育肥（NG）和TMR育肥（TMR）]下阿尔巴斯白绒山羊母羊消化道酶活性的变化规律，研究结果为深入研究绒山羊消化生理机制、制定绒山羊舍饲育肥方案提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验设计与日粮

试验在内蒙古白绒山羊种羊场进行，采用单因素完全随机试验设计，变量是育肥方式，即NG和TMR。从淘汰的成年母羊群中选择年龄、体重相近的5岁成年母羊60只随机分为两组，每组30只，一组圈养饲喂TMR，即TMR组，参照《肉羊饲养标准》（NY/T 816-2004）配制TMR，每天饲喂2次，上、下午各1次。预饲期15 d，正式育肥期60 d，分为育肥前期(1～30 d，8月份)和育肥后期(31～60 d，9月份)两个阶段，育肥前期和后期每天每只羊饲喂的风干料量分别为2.06 kg和2.19 kg，自由采食，自由饮水。TMR组成及营养水平见表1；另一组按照原场的饲喂方式在天然草场放牧，即NG组，每天上午7：00出牧，下午6：00归牧，采食的牧草营养水平见表2。

表1 TMR组母羊日粮组成及营养水平（风干基础）

表2 自然放牧组母羊采食牧草营养水平(风干基础)

1.2 样品的采集与处理

1.2.1 样品的采集

育肥试验结束时，分别从每组母羊中随机选取6只母羊禁食24 h、禁水2 h后进行屠宰。在颈静脉处放血处死、立即打开腹腔、取出内脏，在冰盘上小心剥除胰腺的脂肪组织和结缔组织后用锡箔纸包好，立即放入液氮中冷冻。同时参考《家畜解剖学及组织胚胎学》迅速在冰盘上剪取十二指肠、空肠、回肠各肠段约7 cm左右，并用预冷的生理盐水将各肠段上的食糜冲洗干净，用锡箔纸包好放入液氮中快速冷冻。所有样品转入-20℃低温冻存备用。

1.2.2 样品的处理

1.2.2.1 小肠黏膜的处理

将冷冻的组织样品置于4℃冰箱中，待样品完全解冻后放在保鲜膜上沿肠壁纵向剪开，用载玻片刮下黏膜。准确称取肠黏膜的重量，按质量体积比1∶9的比例加入匀浆介质在玻璃匀浆器中匀浆(整个操作过程都在冰浴条件下进行)。充分匀浆后将匀浆液倒入离心管中，3 000 r/min 4℃条件下离心10 min，收集上清并迅速将上清液分装成若干份贮存于-20℃中，以备进行酶活性分析。

1.2.2.2 胰腺的处理

将冷冻的胰脏置于4℃冰箱中解冻，待样品将要完全解冻时从头、体、尾三个部位剪取约0.5 g左右的胰腺，并用分析天平准确称重。按质量体积比1∶9的比例加入匀浆介质在玻璃匀浆器中匀浆(整个操作过程都在冰浴条件下进行)。充分匀浆后将匀浆液倒入离心管中3 000 r/min 4℃条件下离心10 min，收集上清并迅速将上清液分装成若干份贮存于-20℃中，以备进行酶活性分析。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 测定指标

十二指肠、空肠、回肠、胰腺的淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性；十二指肠的糜蛋白酶活性。

1.3.2 测定方法

测试方法参照南京建成生物工程研究所提供的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶测试盒说明书进行。

1.4 数据处理

试验数据采用SAS 9.0软件的统计程序进行T检验分析，统计结果P＜0.01表示组间差异极显著，P＜0.05表示组间差异显著，0.05≤P＜0.10表示组间差异趋于显著。

2 结果

2.1 淀粉酶活性（见表3）

表3 不同育肥方式对母羊小肠及胰腺淀粉酶活性的影响(U/mg prot.)

从表3可以看出，不同育肥方式对母羊小肠淀粉酶活性无显著性影响，但对于胰腺淀粉酶活性有显著的影响。TMR组母羊胰腺淀粉酶活性显著高于NG组母羊（P=0.02）；十二指肠、空肠及回肠淀粉酶活性略高于NG组，但是差异不显著（P=0.48、P=0.65、P=0.77）。

2.2 脂肪酶活性（见表4）

表4可以看出，TMR组母羊十二指肠和空肠脂肪酶活性显著高于NG组母羊（P=0.04，P=0.02）；回肠和胰腺脂肪酶活性略高于NG组母羊，但是差异不显著（P=0.73，P=0.52）。

表4 不同育肥方式对母羊小肠及胰腺脂肪酶活性的影响(U/mg prot.)

2.3 胰蛋白酶活性（见表5）

表5 不同育肥方式对母羊小肠及胰腺胰蛋白酶活性的影响(U/mg prot.)

表5显示了不同育肥条件下母羊小肠及胰腺的胰蛋白酶活性。表5结果可见，TMR组母羊十二指肠和胰腺胰蛋白酶活性显著高于NG组母羊（P=0.003、P=0.02）；回肠胰蛋白酶活性有高于NG组母羊的趋势（P=0.08）；空肠胰蛋白酶活性略高于NG组母羊，但差异不显著（P=0.46）。

2.4 糜蛋白酶活性（见表6）

表6 不同育肥方式对母羊十二指肠糜蛋白酶活性的影响(U/mg prot.)

从表6可以看出，TMR组母羊十二指肠糜蛋白酶活性显著高于NG组母羊（P=0.009）。

3 讨论

小肠是动物机体的主要消化吸收部位，小肠消化酶活性直接影响动物的营养物质消化率。因此，消化酶活性水平的高低直接反映机体对饲粮营养物质消化利用程度。影响小肠消化酶活性的因素有很多，其中主要有品种、年龄、饲粮组成、小肠部位及肠道内环境等。育肥方式是影响饲粮组成的主要因素，而饲粮组成又决定了动物饲粮的营养水平。本试验研究了NG与TMR两种育肥方式对阿尔巴斯绒山羊成年母羊小肠及胰腺主要消化酶活性的影响，结果表明，TMR育肥可显著提高母羊十二指肠胰蛋白酶、糜蛋白酶和脂肪酶活性，空肠脂肪酶活性，胰腺淀粉酶和胰蛋白酶活性(P＜0.05)；对母羊回肠胰蛋白酶活性有提高的趋势（P=0.08）。这说明育肥方式可影响成年母羊小肠及胰腺的酶活性，这可能与两种育肥方式下动物采食的饲粮营养水平不同有关。TMR组TMR的蛋白质和能量的营养水平均高于NG组（1～30 d两组蛋白水平接近）。王宝山与刘月琴等研究发现，小尾寒羊小肠内的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性随饲粮中粗蛋白质含量的增加而增加。仁瑞清等研究结果得出，与饲喂低能量水平的开食料相比，饲喂能量水平较高的开食料可增加犊牛小肠各段及胰腺内脂肪酶、胰蛋白酶和十二指肠糜蛋白酶的活性。这些研究结果与本试验结果相似，进一步说明了动物消化道酶活性受饲粮组成及营养水平的影响。

本试验中，与NG育肥相比，TMR育肥略微增加了母羊的小肠淀粉酶活性，这可能与它们的日粮组成及采食量有关。其中，十二指肠的淀粉酶活性值高于空肠、回肠和胰腺。小肠内容物中的淀粉酶主要由胰腺分泌的，然而，饲喂1 h内胰腺分泌的淀粉酶到最高值（徐明，2007；John等，1999）。本试验是在进食24 h、进水2 h后屠宰的，可能屠宰时胰腺中分泌的淀粉酶已充分流经十二指肠，但未大量流至回肠段，且回肠段之前留存的食糜已经基本排空，故造成了十二指肠段淀粉酶活性比空肠和回肠段高的现象。因此可以推断，屠宰前停止饲喂时间对淀粉酶活性有一定的影响，具体作用机理还需要进一步探讨。另一方面，TMR组母羊胰腺淀粉酶活性显著高于NG组母羊，这可能是因为TMR的淀粉水平高于牧草的原因。

日粮脂肪消化依赖于胃肠道脂肪酶及胰腺脂肪酶活性。研究发现，日粮中粗脂肪含量的增加可以提高体内小肠消化酶中脂肪酶的活力。本试验中，TMR组母羊日粮粗脂肪含量高于放牧母羊，这也是引起TMR组母羊的十二指肠和空肠胰腺脂肪酶活性显著高于NG组母羊，回肠脂肪酶活性趋于显著高于NG组的主要原因。此外，本试验结果也指出，各部位脂肪酶活性从大到小排序依次为胰腺、回肠、空肠、十二指肠，提示脂肪在小肠后段被消化，与刘月琴等（2004）结果一致。

小肠胰蛋白酶、糜蛋白酶是日粮蛋白质的主要分解酶。本试验TMR组母羊的日粮蛋白水平高于NG组母羊，这是导致本试验结果TMR组母羊十二指肠胰蛋白酶和糜蛋白酶活性显著高于NG组母羊，空肠和回肠胰蛋白酶活性值略高于放牧母羊的主要原因。本试验结果与Mourot等（1979）和Simoes-Nunes（1986）一致。此外，本试验结果显示，十二指肠胰蛋白酶活性最高，其次空肠，最后是回肠。这些结果提示日粮蛋白质主要在小肠前段消化。

4 结论

与NG育肥相比，TMR育肥可以提高绒山羊成年母羊小肠和胰腺的消化酶活性。