超声弹性成像在乳腺癌中的诊断价值及其与肿瘤细胞增殖凋亡基因的相关性分析

李正楠，张健，倪小京

海门市人民医院1超声科，2病理科，江苏海门226100

有研究显示，近年来，乳腺癌的发病率逐年增高，且呈现明显的年轻化趋势[1]。手术切除是治疗乳腺癌的有效方法，但患者术后极易复发。因此，为了改善乳腺癌患者的预后并延长患者的生存期，早发现、早诊断对乳腺癌患者尤为重要。超声、数字乳腺X线摄影及核磁共振成像等均为乳腺癌的常规诊断方法，并具有检测效果明确、无创及不良反应少等优点[2]。但是，也有研究显示，常规超声对乳腺结节样病灶的辨别难度较大，建议选择超声弹性成像进行诊断与鉴别[3]。目前，超声弹性成像技术对于前列腺疾病、甲状腺疾病等疾病的诊断效果较好，其作为一种新型超声诊断技术，可通过比较病变组织加压前后弹性信息超声图像的改变情况，对病变是否存在进行推断，但是关于超声弹性成像技术用于乳腺癌术前诊断的报道较少[4]。因此，本研究探讨了超声弹性成像在乳腺癌中的诊断价值及其与肿瘤细胞增殖凋亡基因的相关性，旨在为临床乳腺癌的诊断提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月至2018年1月于海门市人民医院就诊的乳腺肿块患者的临床资料进行回顾性分析。纳入标准：患者均经组织病理学检查确诊为乳腺良恶性肿瘤；患者均行超声弹性成像检查和病灶组织基因检测。排除标准：乳腺脓肿、急性乳腺炎、乳腺囊肿等乳腺非实质性肿块患者。根据纳入和排除标准，本研究共纳入80例乳腺肿块患者，共102个病灶；患者的年龄为24～61岁，平均年龄为（48.54±12.13）岁。

1.2 超声弹性成像检查及评分

嘱所有患者取仰卧位，充分暴露双侧腋窝和前胸，首先对患者行常规乳腺检查，主要检查患者乳腺病灶的形状、大小、回声情况，并推断其与邻近组织的关系，以及是否存在钙化病灶等。然后通过彩色多普勒超声检查患者病灶的血流情况，待患者病情稳定后，对乳腺癌病灶进行超声弹性成像检查[5]。参考5分制改良评分法[6]对良恶性肿瘤进行评分：1分，病灶整体或大部分为绿色；2分，病灶中心为蓝色，周围为绿色；3分，病灶中心和周围蓝、绿色分布均匀；4分，病灶整体为蓝色，其内有少许绿色；5分，病灶及周围均为蓝色，其内伴或不伴有绿色。其中，≥3分为恶性，＜3分为良性。

1.3 病灶组织基因检测

取所有患者的病灶组织，Trizol试剂裂解；加入氯仿0.2 ml，离心10 min，离心速度为12 000 r/min。取上清并加入同体积的异丙醇混匀，沉淀总RNA；75%乙醇清洗RNA沉淀，去除乙醇溶液；紫外光吸收法测定RNA的浓度及纯度；反转录得到cDNA；采用荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）试剂盒检测信号转导及转录激活因子3（signal transduction and activator of transcription 3，STAT3）、存活蛋白（survivin）和B细胞淋巴瘤2（B cell lymphoma 2，Bcl-2）基因的表达水平；相应计算机软件根据内参计算各基因mRNA的相对表达量[7]。

1.4 观察指标

灵敏度=真阳性例数（/真阳性+假阴性）例数×100%；特异度=真阴性例数（/真阴性+假阳性）例数×100%；阳性预测值=真阳性例数（/真阳性+假阳性）例数×100%；阴性预测值=真阴性例数（/真阴性+假阴性）例数×100%。

1.5 统计学分析

采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。以组织病理学诊断结果作为金标准，将超声弹性成像结果与组织病理学诊断结果进行对照分析。采用Kappa一致性检验对超声弹性成像诊断结果与组织病理学诊断结果的差异和一致性进行检验（Kappa值＜0.40，表示二者的一致性较差；Kappa值为0.40～0.75，表示二者的一致性尚可；Kappa值＞0.75，表示二者的一致性良好）。采用Spearman法分析良恶性肿瘤的超声弹性成像评分与良恶性肿瘤细胞相关增殖基因mRNA相对表达量的相关性。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 乳腺组织病理学检查结果

经组织病理学诊断后发现，102个病灶中，良性病灶41个，恶性病灶61个。良性病灶中，乳腺纤维腺瘤26个，导管内乳头状瘤15个；恶性病灶中，浸润性导管癌52个，乳腺导管内癌4个，浸润性乳头状癌3个，髓样癌2个。

2.2 超声弹性成像诊断

超声弹性成像诊断良恶性病灶与病理组织诊断结果比较，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超声弹性成像诊断恶性病灶的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.97%（50/61）、63.41%（26/41）、76.92%（50/65）和70.27%（26/37）；诊断良性病灶的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为63.41%（26/41）、81.97%（50/61）、70.27%（26/37）和76.92%（50/65）。（表1）

表1 超声弹性成像与病理诊断结果对照

2.3 良恶性肿瘤细胞相关增殖基因mRNA相对表达量的比较

恶性肿瘤中STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的相对表达量分别为（180.11±25.54）、（130.41±13.50）、（150.46±20.14），均高于良性肿瘤中的（112.01±22.41）、（106.24±16.64）、（100.41±14.54），差异均有统计学意义（t=13.856、8.067、13.686，P＜0.05）。

2.4 相关性分析

102个病灶中，超声弹性成像评分1分病灶20个，2分病灶17个，3分病灶32个，4分病灶33个。将良恶性病灶的超声弹性成像评分与良恶性肿瘤细胞相关增殖基因mRNA相对表达量的相关性进行Spearman秩相关分析，结果显示，良恶性病灶的超声弹性成像评分与STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的表达均呈正相关（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。

3 讨论

乳腺癌可对绝大部分女性患者的身心健康产生严重的负面影响，但由于乳腺癌组织缺乏神经支配，患者于患病前期常无明显不适，多于体检时发现，从而耽误了最佳治疗时机[8]。目前，临床尚未发现与乳腺癌密切相关的肿瘤标志物，因此，主要通过影像学数据为临床医师对乳腺癌的诊断提供参考依据。

超声和乳腺钼靶X线检查是临床乳腺癌检查的主要方法，其中，乳腺钼靶X线检查在乳腺疾病的诊断中较为常用，且其操作简便，数据可靠，对患者造成的痛苦较少，并具有较高的分辨率[9]。此外，由于乳腺钼靶X线检查方法几乎不受体型和年龄的限制，因此，目前其已成为乳腺体检筛查和常规检查的主要方法。但亦有研究显示，尽管乳腺钼靶X线对于边缘浸润、形态不规则、星芒状的高密度肿块及存在恶性钙化或刺状边缘的乳腺肿块均有较高的阳性预测值，但其对病灶钙化相当敏感，具有一定的误诊率[10]。此外，乳腺钼靶X线摄影存在一定的重叠图像，并对乳腺的辐射较大，尤其是未婚和未生育的女性患者不宜进行乳腺钼靶X线重复性检查[11]。

随着超声弹性成像技术的不断发展与进步，其在宫颈癌和胃癌中的应用逐渐广泛，并具有较好的临床诊断效能。超声弹性成像能够使以病灶前后回声的位移变化信号形成实时彩色图像，当弹性系数较大时，位移受压变小后组织呈现蓝色；当弹性系数较小时，位移受压变大后组织呈现红色[12-13]。影像科医师可通过直观的色彩对不同组织的弹性属性进行观察而进行鉴别诊断。

本研究结果显示，经病理组织诊断，102个病灶中，良性病灶41个，恶性病灶61个。超声弹性成像诊断良恶性肿瘤与病理组织诊断结果比较，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超声弹性成像诊断恶性肿瘤的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.97%、63.41%、76.92%和70.27%。上述结果均提示超声弹性成像诊断乳腺良恶性肿瘤具有较高的灵敏度和特异度。由于恶性肿瘤组织的硬度较高，弹性较强，肿瘤细胞活动较慢，而良性肿瘤组织的弹性特点正好与恶性肿瘤组织相反，因此，超声弹性成像可为临床医师诊断恶性肿瘤提供准确的数据参考依据。乳腺组织出现病变后，肿瘤细胞发生过度增殖，肿瘤组织的异常促进乳腺病灶组织硬度升高[14]。目前，以病理学检查结果作为诊断良恶性肿瘤的“金标准”，但由于乳腺癌患者多为女性，其对无创检查具有更高的倾向性，因此，超声弹性成像在乳腺癌诊断中的应用价值更高。

基因的异常表达是导致组织发生恶变的根本原因，细胞增殖促进基因的表达对肿瘤的恶性程度具有直接的决定作用。有研究证实，STAT3、survivin、Bcl-2与胃癌和宫颈癌细胞的恶性增殖密切相关，激活STAT3信号通路可导致细胞的恶性转化和异常增殖；survivin是重要的凋亡抑制蛋白，在多种肿瘤中高表达；Bcl-2是重要的原癌基因，可抑制细胞的凋亡，在骨髓瘤及白血病患者中均表达异常[15-16]。本研究结果显示，恶性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的相对表达量均高于良性病灶（P＜0.05）；超声弹性成像评分与恶性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的表达均呈正相关（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。上述结果提示超声弹性成像评分与肿瘤细胞增殖凋亡基因的表达具有相关性，也证实乳腺肿瘤患者肿瘤组织中的STAT3、survivin和Bcl-2mRNA表达异常，提示增殖基因可作为判断乳腺肿瘤良恶性的重要指标。

综上所述，超声弹性成像在乳腺癌的诊断中具有一定的应用价值，同时超声弹性成像评分与肿瘤细胞增殖凋亡基因的表达具有一定的相关性。