生物监测金标准在脉动真空灭菌效果中的应用

杨星琳　王畅

【摘 要】目的：通过使用生物监测对灭菌器进行监测来保证灭菌效果。方法：采用生物监测对不同种类的灭菌器进行灭菌效果监测。结果：灭菌物品合格率100%。

【关键词】生物监测；自含式生物指示剂；灭菌器；灭菌效果。

【中图分类号】R472.1 【文献标识码】B 【文章编号】1672-3783（2018）10-03--02

生物监测是通过标准化的菌株和合乎要求的抗力来考核整个负荷是否达到灭菌合格的要求。标准化的菌株：嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢，与枯草杆菌黑色变种芽孢，技术要求符合国际的标准。合乎要求的抗力：通过特殊的装置，把嗜热脂肪杆菌芽孢包裹起来，使蒸汽和热能更难穿透和传递。

1 方法

1.1 监测方法：（1）每周一次，采用嗜热脂肪杆菌芽胞对灭菌器的灭菌效果质量进行生物监测，生物监测包放在排气口的上方，并设阴性和阳性对照。（2）灭菌植入型器械、严重污染物时必须每锅进行生物监测。采用新的包装材料和方法进行灭菌时也应进行生物监测。（3）新安装的设备和大修后设备应该进行生物监测，监测方法应符合GB 18278‐2000 的有关要求。（4）生物监测不合格时，应立即连续重做两遍试验，如均合格，只需分析前次不合格的原因，如仍有不合格，则需追溯召回上次监测合格以来的所有灭菌物品，重新灭菌。

1.2 要求：每天都进行生物监测可及时发现设备故障或操作失误，从而降低生物指示剂阳性引起产品召回的风险。每个包含植入物的灭菌装载均要进行生物监测，而且原则上生物监测阴性后才可以放行。

1.3 重要性：为什么说生物监测是金标准？因为生物监测，综合了所有的灭菌参数，是反映灭菌效果最重要的监测方法。生物指示剂的分类。生物指示剂的发展历程：菌片式生物指示剂、自含式生物指示剂（普通型）、自含式生物指示剂（快速型）。

1.3.1 自含式生物指示剂：操作简单：不需配制培养基，只需设置阳性对照。培养周期：普通型 48小时快速型 3-4 小时。技术要求：不需无菌操作和接种培养基。结果判读：利用培养基变色，易于辨识。

1.3.2 自含式生物指示剂结构：浓集培养液和荧光、实现快速的核心技术点、确保无菌状态菌片吸附材料、专利培养液、高分子滤膜塑料帽。

1.3.3 如何使用自含式生物指示剂？

1.3.3.1 如何制作生物测试包，或使用一次性生物测试包：步骤1：折叠手术巾（共需16条）。步骤2：放置指示剂（放于第8、9层之间）。步骤3：整理并胶带封包。

1.3.3.2 如何进行生物监测的频率：按照国家消毒供应中心标准，压力蒸汽灭菌应每周进行一次；过氧化氫低温等离子体每天一次；环氧乙烷每灭菌批次应进行生物监测；植入物应随锅进行，且结果为阴性后放行；新安装、移机、大型维修、灭菌失败后，应连续三次进行生物监测；采用新的包装材料和方法灭菌时，应进行生物监测。生物监测不合格时，应尽快召回上次生物监测合格以来所有尚未使用的灭菌物品，重新处理。对于植入物紧急情况下提前放行，紧急情况灭菌植入性器械时，可在生物PCD中加用第5类化学指示物。第5类化学指示物合格，作为提前放行的标志，生物监测的结果应及时通报使用部门。

1.3.3.3 如何进行生物指示剂 / 测试包的摆放：压力蒸汽灭菌：在灭菌器排气口上方平放。灭菌以后，生物指示剂的阅读操作步骤。步骤1：待充分冷却后，取出生物指示剂，压紧帽盖。步骤2：使用夹子将安瓿夹碎。步骤3：取出，在桌面轻敲底部几次。步骤4：放入阅读器内，培养后，判读结果。为何需要一次性测试包，测试包的质量好坏决定了生物监测的有效性。

1.3.3.4 自含式生物指示剂结果判读：压力蒸汽：阳性对照管：紫黄；必须阳性。测试管：紫黄；灭菌失败。测试管：紫紫；灭菌通过。过氧化氢低温等离子：阳性对照管：紫黄；必须阳性。测试管：紫黄；灭菌失败。测试管：紫紫；灭菌通过。环氧乙烷：。阳性对照管：绿黄；必须阳性。测试管：绿黄；灭菌失败。测试管：绿绿；灭菌通过。仅做阳性对照，不需要阴性对照！为何自含式生物指示剂，不需要阴性对照？自含式生物指示剂，已经包含了培养基。故不需要进行阴性对照。而菌片式生物指示剂，需自行配置培养基，因此需要进行阴性对照的验证。自含式生物指示剂的阳性对照。

1.3.4 阳性对照的意义

1.3.4.1 确保正确的培养环境与条件（例如培养基的温度、液体浓度等）。

1.3.4.2 确保芽孢的存活，与芽孢的发育能力。生物监测的重要性：生物监测综合了所有参数，是反映灭菌效果最重要的监测方法。

2 结果

2017年1月- 2017年12月，高压蒸汽灭菌736 锅次，消毒无菌物品32350件，化学指示胶带变色合格 736锅，生物监测合格 736锅；过氧化氢低温等离子灭菌152锅次，化学指示胶带变色合格152锅，生物监测合格152锅。物品灭菌合格率达到100%。

3 体会

由于环境污染的加剧，各种罕见的感染性疾病和新的病种接踵而来，医院感染已经成为全球医学界的重要研究课题，供应室是控制医院感染的重点科室。通过生物监测金标准的应用，可以保证所有灭物品、器械的灭菌合格率达到100%，是放行无菌物品的重要标志，为从源头上杜绝医院感染奠定了坚实的基础。