真菌性鼻窦炎患者血清半乳甘露聚糖抗原水平及其临床意义

张宏

摘要 目的：探讨真菌性鼻窦炎患者血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及其临床意义。方法：收治真菌性鼻窦炎患者54例作为研究组，另选取非真菌性鼻窦炎患者43例作为对照组。检测两组患者手术前后GM抗原的水平。结果：两组患者术前血清GM抗原水平对比差异有统计学意义（P<0.05）。研究组患者术后的血清GM抗原水平明显低于术前（P<0.05）。GM试验检测结果与真菌性鼻窦炎的一致性较好。结论：通过GM试验可以有效反应真菌性鼻窦炎的感染程度，可以成为其早期、快速、准确的诊断指标之一。

关键词 真菌性鼻窦炎；血清半乳甘露聚糖抗原；临床意义

真菌性鼻窦炎又名霉菌性鼻窦炎，是耳鼻咽喉头颈外科常见的一种特异性感染性疾病。流行病学资料表明，随着抗生素和皮质激素的广泛使用，鼻窦真菌性感染的发病率呈逐年上升趋势，其中真菌性鼻窦炎约占所有鼻窦手术的10%左右。近年来，随着检验医学对真菌性鼻窦炎认知及研究的深入，CT、MRI等影像学的进展和鼻内镜在临床得到广泛应用，使鼻窦真菌病的诊断率得到了明显提升。但真菌性鼻窦炎的早期症状不明显，且缺乏特异性的影像学资料，常被误诊而耽误患者治疗甚至加重病情，故确诊需要术后病理及真菌培养。因此，临床寻找一种快速有效的检测方法来确诊真菌性鼻窦炎是目前临床工作者亟待解决的问题。本次研究选取了本院收治的真菌性鼻窦炎患者作为研究对象，旨在探讨血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及在真菌性鼻竇炎诊断中的临床价值，现报告如下。

资料与方法

2015年2月-2017年2月收治鼻窦炎患者54例作为观察对象，将其作为研究组，同时依据术后病理检查证实为非真菌性鼻窦炎的患者43例作为对照组。研究组男26例，女28例；年龄21～78岁，平均（62.43±10.74）岁；按照疾病类型可分为真菌球型42例，变应性真菌型8例，慢性侵袭性真菌性鼻窦炎4例。对照组，男23例，女20例；年龄19～77岁，平均（62.51±10.22）岁；根据疾病类型分为鼻中隔偏曲19例，鼻息肉14例，慢性鼻窦炎10例。两组患者性别、年龄等基本资料比较差异无统计学意义（P>0.05），有明显可比性。

纳入标准：①所选患者入院后均依据病史、鼻内镜检查、影像学检查及术后病理检查证实诊断；②患者及家属了解研究内容和目的，明确治疗风险，愿意签署知情同意书，并经本院医院伦理委员会审核通过。

排除标准：①合并精神或神经类疾病；②合并心肝肾等全身重要器官疾病；③近24～48 h内有接受血液制品和真菌类制品等药物进行治疗；④并发真菌性肺炎、真菌性阴道炎等其他系统的真菌感染者；⑤妊娠期或哺乳期妇女。

方法：①标本采集：所选患者均于禁食禁水12 h后在本院检验科抽取静脉血5 mL，置于抗凝管中，在4℃条件中静置60min后，以3000 r/min的离心速度离心10 min，取上清液分装于Eppendorf管中并标记，置-80℃冰箱冷冻保存，待测。②血清GM值检测：GM试验采用Platelia曲霉诊断试剂盒，具体方法如下：将试剂盒所配备的标准血清A管、阳性对照血清B管、阴性对照血清C管及待检患者血清D1-5管各300μL血清加100μL处理液（R7）混匀，100℃水浴3 min，13 000 r/min离心10min，取上清液备用。在已包被EB-A2的微孔板内加入50μL结合液（R6），取50μL处理后的上清液于微孔板中，以R3、R4、R5作对照，封口膜封口。以37℃水浴或孵育90min，后去封口膜，用Tris-NaCl冲洗液反复清洗微孔板6次。快速避光，每孔加入显色液200μL（显色液R9：R8=1：50）显色，避光室温作用（30±5）min，每孔加入100μL反应终止液（R10），在450/620 nm波长的酶标仪上读取吸光度（A值，30min内）。患者血清GM值计算公式=患者血清A值/标准血清A值，GM值<0.5为阴性，两次不同时点连续采集样本A值>0.5或单次A值>0.8判断为阳性。

统计学方法：数据分析采用统计学分析软件SPSS 21.0，计量资料采用（x±s）进行表示，结果比较采用t进行检验；计数资料采用（%）进行表示，结果比较采用X²进行检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

结果

两组患者治疗前后血清GM抗原水平的比较：两组患者术前血清GM抗原水平对比差异有统计学意义（P<0.05）。研究组患者术后的血清GM抗原水平明显低于术前，差异有统计学意义（P<0.05）。对照组患者的血清GM抗原水平较术前无明显变化（P>0.05）。研究组患者术后与对照组患者血清GM抗原水平比较差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

GM试验诊断结果及诊断能力分析：以GM试验试剂盒所标注的0.5为临界值时，研究组患者有40例患者GM值>0.5，对照组患者有7例患者GM值>0.5，其敏感性为74%，特异性为84%，诊断符合度为78%，说明GM试验检测结果与真菌性鼻窦炎的一致性较好，见表2和表3。

讨论

真菌性鼻窦炎是一种由多种真菌感染引起的慢性炎症，其致病菌主要是曲霉菌，约占所有致病菌的>80%。真菌性鼻窦炎多发生于机体免疫力严重低下的患者。近年来随着免疫缺陷患者数目的增多，抗生素、免疫抑制剂、糖皮质激素等药物的广泛使用及环境恶化等，该病的发生率呈明显上升趋势。目前临床上诊断真菌性鼻窦炎主要给予患者的症状体征、病程、专科检查及影像学、病理学和真菌学方面的检查结果，但对于缺乏典型症状、体征、影像学检查的病例，常规检查方法还存在着明显盲区，最终确诊仍需要术后病理及真菌学方面的检查。有一项最新研究报道显示，26.6%的慢性鼻窦炎、鼻息肉患者经真菌培养和组织病理学检查后确诊为真菌性鼻窦炎。说明真菌性鼻窦炎被误诊率较高，而真菌性鼻窦炎的主要治疗方式是手术治疗，误诊时间过长并不有利于患者疾病的快速康复，因此，寻找一种早期且快速有效的方法诊断真菌性鼻窦炎是目前临床工作者应当重点关注的问题。

GM试验是运用酶联免疫吸附法检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖，其在内科真菌感染的诊断上应用较为广泛，是侵袭性曲霉菌病的早期诊断的重要指标之一，尤其在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。GM试验有别于传统诊断方法，被认为是早期、无创、可靠的诊断方法，目前已成为深部真菌感染的常规检查项目，但在真菌性鼻窦炎的应用报道仍较少。半乳甘露聚糖是曲霉菌最早释放的抗原，因曲霉菌的细胞壁存在β（1-5）呋喃半乳糖残基，可在菌丝生长时从菌丝顶端释放出来，且GM释放量与菌量成正比，因此通过检测GM值可以有效反映感染程度。有研究报告表示，GM试验敏感性可达50%～95%，特异性可达80%～90%，可有效诊断真菌性鼻窦炎。这项检测已被美国FDA和欧洲许多国家批准用于血液、肿瘤等免疫受损者中真菌性感染的诊断。本次研究中，经手术治疗后，研究组患者的血清GM抗原水平明显低于术前，而对照组患者的血清GM抗原水平较术前无明显变化。说明经手术治疗后，对于真菌性鼻窦炎患者，血清GM抗原水平随着疾病的转归而明显降低，但对于非真菌性鼻窦炎患者，治疗前后血清GM抗原水平并无明显变化，从结果可以看出，通过检测GM值可以有效反映真菌性鼻窦炎患者的感染程度。同时本次研究中，以GM试验试剂盒所标注的0.5为临界值时，GM试验的敏感性74%，特异性为84%，诊断符合度78%，与上述研究报告结果相似，说明GM试验检测结果与真菌性鼻窦炎的一致性较好。