高纯度依帕司他的制备方法

刘向红，杨亚军，李兆林，刘 旭

（宁夏康亚药业股份有限公司，宁夏银川 750002）

依帕司他（epalrestat 1），化学名 5-［（1Z，2E）-2-甲基-3-苯基-2-丙烯亚基］-4-氧代-2-硫代-3-噻唑烷乙酸，是一种醛糖还原酶抑制剂，由小野公司在1992年在日本上市，临床上用于治疗糖尿病及其并发症，如神经病变、末梢神经障碍症、震动感觉异常、心搏异常、角膜上皮病变、视网膜病变和微血管病变等[1，2]，其结构式（见图1）。

图1 依帕司他结构式Fig.1 Structural formula of epalrestat

依帕司他的合成方法已有不少文献报道，总结文献方法主要有如下几种合成方法：方法一[3]，以3-羧甲基罗丹宁和α-甲基肉桂醛作为起始原料，进行缩合反应一步制得依帕司他。方法二[4]，以甘氨酸为起始原料，先与二硫化碳、浓氨水发生缩合反应，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸铵，再和氯乙酸经烃化、环合制得中间体3-羧甲基罗丹宁，最后以冰醋酸为反应溶剂，在无水醋酸钠催化下与α-甲基肉桂醛进行缩合反应，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基罗丹宁的收率为80%，得到依帕司他的收率为60%，总收率为48%。方法三[5]，该方法采用“一锅煮”的方法，以甘氨酸为起始原料，先和二硫化碳、浓氨水发生缩合反应，所得N-羧甲基二硫代氨基甲酸铵，不经过分离，反应液先蒸除低沸点物质，然后直接加入氯乙酸经烃化、环合反应制得中间体3-羧甲基罗丹宁，最后以冰醋酸为反应溶剂，在无水醋酸钠催化下与α-甲基肉桂醛进行缩合反应，制得依帕司他。此方法得到3-羧甲基罗丹宁的收率为85.3%，得到依帕司他的收率为64%，总收率为54.6%。方法四[6]，是以甘氨酸为起始原料，先与二硫化碳、浓氨水发生缩合反应，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸铵，再和氯乙酸钠经烃化、环合制得重要中间体3-羧甲基罗丹宁，最后以无水乙醇为反应溶剂，在浓氨水催化下与α-甲基肉桂醛进行缩合反应，制得依帕司他。此方法制得3-羧甲基罗丹宁的收率为86.0%，得到依帕司他的收率为85.2%，总收率为73.3%。

图2 依帕司他的合成路线Fig.2 Synthetic route of epalrestat

在深入研究和细致比较文献报道的工艺路线的基础上，沿用以甘氨酸为起始原料，先与二硫化碳、浓氨水发生缩合反应，制得N-羧甲基二硫代氨基甲酸铵，再和氯乙酸钠经烃化、环合制得重要中间体3-羧甲基罗丹宁，最后以无水乙醇为反应溶剂，在浓氨水催化下与α-甲基肉桂醛进行缩合反应，制得依帕司他粗品，合成路线（见图2）。

在粗品精制中用甲酸、乙酸及四氢呋喃等溶剂精制得到的产品2Z-异构体含量都在0.5%以上，与日本原研药不高于0.2%的要求差距较大，不符合化学原料药达到或者接近国际标准要求[7]。依帕司他对光不稳定，暴露在光甚至它的溶液在室温下也会发生双键的异构化，很难保证产品质量，为了保证患者的用药安全，在对依帕司他合成的同时，开发了一种高质量依帕司他的精制方法。通过对精制条件的摸索，最终发现在避光条件下用1，4-二氧六环溶解，过滤，滤液温度降至50℃～60℃时，加入80%甲醇水溶液，35℃～45℃保温析晶3.5 h，所得成品的异构体杂质可以控制在0.2%以下，提高了产品质量。此工艺已完成100 L反应釜中试放大，且重现性较好。

1 实验

1.1 色谱条件

照高效液相色谱法（《中国药典》2015版四部通则0512）实验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.4%醋酸（62:38）为流动相；检测波长为396 nm，流速为1 mL/min；柱温为30℃。

1.2 测定方法

严格避光操作，取本品约20 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇15 mL超声溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照溶液；立即取对照溶液20 μL，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度使主成分峰高约为满量程的20%，再取上述两种溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2～3倍，在相对保留时间为1.0的物质为依帕司他主峰，在相对保留时间为0.65～0.87的杂质峰为依帕司他立体异构体，供试品溶液如显立体异构体峰，其峰面积不得大于对照品溶液主峰面积的1.5倍（1.5%）。

1.3 依帕司他精品的制备方法1

避光下于1 000 mL单口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，800 mL 98%甲酸溶解，加热回流30 min后，趁热过滤，降温析晶，降温至55℃保温析晶4 h抽滤，少量甲酸洗涤，产品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他21.6 g，液相检测纯度92.18%（见图3），收率43.2%。

1.4 依帕司他精品的制备方法2

避光下于1 000 mL单口瓶中依次加入依帕司他粗品50.0 g，500 mL四氢呋喃溶解，加热至回流，趁热过滤，降温至45℃～50℃保温析晶4 h抽滤，滤饼少量四氢呋喃洗涤，产品避光50℃真空干燥8 h，得依帕司他36.0 g，液相检测纯度92.18%（见图4），收率72.0%。

图3 甲酸精制色谱图Fig.3 The HPLC spectrum of formic acid refined epalrestat

1.5 依帕司他精品的制备方法3

避光下于1 000 mL单口瓶中依次加入依帕司他粗品98.7 g，1，4-二氧六环200 mL，加热至完全溶解，过滤，滤液温度降至50℃～60℃，加入780 mL 80%的甲醇水溶液，搅拌均匀，35℃～45℃保温析晶3.5 h，抽滤，滤饼用少量无水甲醇（10 mL×3）洗涤，避光50℃真空干燥8 h，得橙黄色细针状结晶性粉末79.5 g，纯度99.73%（见图5），收率为80.5%。熔点225℃～227℃。

图4 四氢呋喃精制色谱图Fig.4 The HPLC spectrum of tetrahydrofuran refined epalrestat

图5 依帕司他精品液相图Fig.5 The HPLC spectrum of refined epalrestat

2 结果和讨论

在参考文献基础上合成了依帕司他粗品，避光下用1，4-二氧六环先将粗品溶解，过滤，滤液温度降至50℃～60℃，加入80%的甲醇水溶液，35℃～45℃保温析晶3.5 h，抽滤，所得依帕司他精品纯度可达99.7%，异构体杂质可以控制在0.2%以下。本方法操作简单，周期短，可重现性强，所得产品收率高，对依帕司他的质量控制具有重要参考价值。