石墨炉原子吸收分光光度法测定麝香接骨胶囊中砷含量

王 健，孔 燕

(扬州市食品药品检验检测中心，江苏 扬州 25000)

麝香接骨胶囊收载于《卫生部药品标准中药成方制剂》第五册[1]，为骨伤科常用药，主要用于跌打损伤、筋伤骨折、瘀血凝结、闪腰岔气[2]。但其处方中有自然铜(煅)、朱砂、硼砂等多味矿物药，会导致该中成药中重金属元素处于一种较高的水平。铅、镉、砷、汞、铜等有害重金属元素易在人体内蓄积,其半衰期长,达到一定数量,即可呈现毒性作用[3]。目前尚无研究麝香接骨胶囊中重金属元素检测方法的报道。本研究将针对麝香接骨胶囊处方中所含矿物药的性质，建立适合麝香接骨胶囊中砷元素含量的测定方法，加强该中成药的安全性控制，给临床使用提供相应数据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 PE AA800原子吸收分光光度计：美国铂金埃尔默公司；MV3000微波消解仪：奥地利安东帕有限公司；BHW-09A恒温消解仪：上海博通有限公司；Milli-Q去离子水机：美国密理博有限公司；AB204-N万分之一电子分析天平：美国梅特勒-托利多集团；1 mL、5 mL移液枪：德国艾本德有限公司。

1.2 试剂 砷元素标准溶液(1 000 μg/mL)：国家有色金属及电子材料分析测试中心；硝酸(BV-Ⅲ级)：北京化学试剂研究所；双氧水(优级纯)、氢氟酸(优级纯)：国药集团化学试剂有限公司；去离子水：自制；硝酸钯溶液(优级纯)：铂金埃尔默。

1.3 样品 麝香接骨胶囊(批号 130104、130602)：吉林金宝药业股份有限公司；麝香接骨胶囊(批号 130402)：吉林一正药业集团有限公司。

2 方法与结果

2.1 仪器的工作条件

2.1.1 微波消解仪消解程序 见表1。

表1 微波消解程序

注：升压速率：0.3 bar/s，温度上限：200 ℃，压力上限：35 bar

2.1.2 原子吸收光谱仪工作参数 采用美国铂金埃尔默AA800原子吸收分光光度计测定样品中的砷。分析条件：波长193.7 nm，狭缝0.7 nm，进样量20 μL，高纯氩气作为载气，塞曼扣背景模式，选用砷元素无极放电灯，灯电流380 mA。参考文献[4-5]，通过优化选择，设定石墨炉升温程序，见表2。基体改进剂选择硝酸钯溶液(取铂金埃尔默公司硝酸钯溶液稀释10倍)。

表2 石墨炉升温程序

2.2 溶液的制备

2.2.1 标准曲线溶液的配制 取砷标准溶液逐步稀释，配制含砷分别为0、20、40、60、80、100 ng/mL的标准曲线溶液。

2.2.2 供试品溶液的配制 参照文献[6]方法配制供试品溶液。取样品粗粉0.5 g，置聚四氟乙烯消解罐中，置于电热板上。加硝酸5 mL，氢氟酸0.5 mL，100 ℃预消化至没有棕红色气体产生，放冷至室温。将预处理好的样品装入陶瓷套管中，放置于微波消解仪中进行消解。将微波消解完的样品置于恒温消解仪上，在125 ℃下赶酸至约1 mL，转移至塑料离心管中，用去离子水定容至25 mL，摇匀。取1 mL至10 mL离心管中，定容至刻度，即得。

2.3 线性与范围 按照“2.1”项下的仪器参数测定标准曲线溶液，测定各浓度溶液的吸光度，以吸光度y对浓度x(ng/mL)进行线性回归，得回归方程y=0.002 23x+0.004 79，r=0.996，线性范围为0～100 ng/mL。

2.4 仪器检出限与定量限 按照“2.2.2”项方法处理7份空白样品，再按照“2.1”项下的仪器参数进行测定，计算7份测定结果的SD值，以3倍的SD值作为检出限，10倍的SD值作为定量限。仪器检出限为0.740 ng/mL，定量限为2.47 ng/mL。

2.5 精密度实验 取麝香接骨胶囊样品(批号 130104)粉末1份，按照“2.2.2”项制备供试品溶液，按照“2.1”项下的仪器参数进行测定，连续进样5次，测定吸光度，计算RSD为2.85%。显示实验仪器的精密度良好。

2.6 重复性实验 取麝香接骨胶囊样品(批号 130104)粉末5份,按照“2.2.2”项制备供试品溶液,按照“2.1”项下的仪器参数进行测定,样品中含砷平均值为28.4 μg/g，RSD为2.6%。

2.7 回收率实验 取已知含量的麝香接骨胶囊样品(批号 130104)粉末9份，每份约0.25 g，精密称定，分别精密加入5 μg/mL砷标准溶液1、2、3 mL。按照“2.2.2”项制备样品溶液,按照“2.1”项下的仪器参数进行测定,根据测定结果，计算加样回收率。计算结果见表3。

表3 回收率实验结果(n=9)

样品的加样回收率为94.9%～102.5%,平均回收率为96.9%，可见，此方法可以准确地测定样品中砷元素含量。

2.8 样品的测定 取不同来源的样品各3份，按照“2.2.2”项下制备样品溶液,按照“2.1”项下的仪器参数进行测定，测定结果见表4。

3 讨论

麝香接骨胶囊中有自然铜(煅)、朱砂、硼砂等多味矿物药，导致该样品中重金属元素处于较高的水平，因此非常有必要加强含矿物药中重金属元素的研究，以控制药物使用安全性。

麝香接骨胶囊中含有朱砂，导致样品中汞元素高出砷元素很多。在测定时，分别采用电感耦合等离子质谱法、石墨炉原子吸收分光光度法、原子荧光分光光度法测定样品中砷元素。用电感耦合等离子质谱测定时，样品中大量汞会污染仪器的进样系统，导致微量的汞无法准确测定。用原子荧光分光光度法测样品中砷时，样品中大量的汞直接导致样品中砷无法测定。而石墨炉原子吸收分光光度法测定时，则不存在污染、无法测定等问题。所以最后定量方法选择石墨炉原子吸收分光光度法。

表4 样品测定结果(n=3)

在进行砷测定时，应选用无极放电灯进行数据的测定。因为空心阴极灯砷产生的能量低，不能满足该元素的含量测定要求。

在石墨炉原子吸收分析中，为了提高样品中易挥发元素的稳定性，可以加入某种化学试剂，提高灰化温度以降低基体的干扰，而不减少待测元素的含量[7]。本研究采用磷酸二氢铵溶液、硝酸镁溶液、硝酸钯溶液进行实验。因为硝酸钯溶液作为基体改进剂的时候砷元素吸收信号最大且稳定[8]，所以选择硝酸钯溶液为本研究的基体改进剂。

分别在灰化温度1 000 ℃、1 100 ℃、1 200 ℃、1 300 ℃、1 400 ℃对40 ng/mL的砷标准溶液进行测定，结果在灰化温度1 200 ℃时，杂质干扰少，吸收值最大。分别在原子化温度1 900 ℃、1 950 ℃、2 000 ℃、2 050 ℃、2 100 ℃对40 ng/mL的砷标准溶液进行测定，结果在2 050 ℃时吸收值最大，出峰形态较好。所以最终选择灰化温度1 200 ℃，原子化温度2 050 ℃。