还原型谷胱甘肽对部分氧化酶法项目检测的影响

潘本友，宋静芳，张海涛

（1.贵州省贵阳市第一人民医院检验科，贵州 贵阳 550002;2.贵州医科大学医学检验系，贵州 贵阳 550004）

在临床检验工作中，临床医生经常会质疑检验结果的准确性。作为检验人员，我们不仅要提高检验结果的准确性，还要考虑临床用药对我们检验结果的影响。还原型谷胱甘肽（GSH）对基于Trinder反应的氧化酶法检验项目的负面影响也是众所周知，但是具体的影响程度报告较少[1-2]，且各不相同。本实验就GSH对部分氧化酶法检测项目的影响进行研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器及试剂

1.1.1 仪器：HITACHI7600全自动生化分析仪。

1.1.2 试剂

（1）还原型谷胱甘肽钠：昆明积大制药股份有限公司生产，规格：1.2g/瓶，批号161205，生产日期：2016年12月5日，有效期至：2019年12月4日。

（2）TC（批号16-0913）、TG（批号16-1011）、UA（批号16-1215）、Cre（批号16-0919）、GLU（批号 16-1012）、HDL-C（批号16-0906）、LDL-C（批号16-0606）：由北京九强生物技术股份有限公司生产。

1.2 校准品：

1.2.1 TC、TG、UA、Cre、GLU：由英国朗道有限公司生产，批号1001UN。

1.2.2 HDL-C、LDL-C：由北京九强生物技术股份有限公司生产，批号16-0706。

1.3 质控品

1.3.1 UA、Cre、GLU：由英国朗道有限公司生产，批号764UE、1027UN。

1.3.2 TC、TG、HDL-C、LDL-C：由上海昆涞生物科技有限公司生产，批号592-2、592-3。

1.4 方法 将注射用还原型谷胱甘肽钠冻干粉用4 ml生理盐水溶解至外观澄清，配成浓度300 mg/ml GSH液体。收集本院当日体检血清混匀作为基础血清，并与300 mg/ml GSH溶液配成实验所需浓度，即0.00 mg/ml、0.15 mg/ml、0.30 mg/ml、0.45 mg/ml、0.60 mg/ml、1.20 mg/ml、1.50 mg/ml、3.00 mg/ml、4.50 mg/ml、6.00 mg/ml、7.50 mg/ml，混匀后进行TC、TG、UA、Cre、GLU、HDL-C、LDL-C等项目检测，所有项目均在实验室控制范围内，每个项目平行测定三次并计算均值（X），以上均尽量避光操作。

1.5 统计学方法 采用SPSS 24.0软件进行数据处理，每组计量用“±s”表示，采用单因素方差（one-way ANOVA）进行组内比较。

2 结果

2.1 不同GSH浓度时，各项目检测结果均值GSH浓度为0.30 mg/ml时，对GLU、UA的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05）；GSH浓度为0.45 mg/ml时，对TG的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05）；GSH浓度为0.60 mg/ml时，对TC的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05）；GSH浓度为1.20 mg/ml时，对Cre的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05）；GSH浓度为3.00 mg/ml时，对HDL-C的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05）；GSH浓度为6.00 mg/ml时，对LDL-C的检测结果影响有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 不同GSH浓度时各项目测定均值（±s）

表1 不同GSH浓度时各项目测定均值（±s）

注：与GSH浓度为零时进行比较，aP＜0.05，aaP＜0.01

GSH（mg/ml）0.00 0.15 0.30 0.45 0.60 1.20 1.50 3.00 4.50 6.00 7.50 TC（mmol/L）4.72 4.59 4.30 4.14 4.03a 3.41a 3.33a 1.99aa 1.30aa 0.95aa 0.67aa TG（mmol/L）1.12 1.05 0.96 0.89a 0.80a 0.58aa 0.51aa 0.20aa 0.10aa 0.08aa 0.06aa GLU(mmol/L)5.39 4.64 4.51a 4.47a 4.13a 3.63a 3.42a 2.32aa 1.70aa 1.34aa 1.09aa Cre（mmol/L）63.30 60.53 57.37 55.33 55.27 49.90a 45.00a 34.90a 26.93aa 20.90aa 16.80aa UA（mmol/L）260.80 233.40 200.10a 174.73a 153.50a 77.12aa 65.15aa 8.47aa-2.67aa-8.53aa-11.40aa HDL-C（mmol/L）1.48 1.48 1.48 1.47 1.45 1.42 1.37 1.19a 0.95a 0.79a 0.62aa LDL-C（mmol/L）3.19 3.13 3.12 3.11 3.10 3.09 3.05 2.92 2.76 2.53a 2.11a

2.2 不同GSH浓度时，各项目结果影响具有统计学意义走势，见图1。

图1 各项目结果影响具有统计学意义走势图

3 讨论

GSH是机体重要的生物活性物质，广泛分布于人体各组织器官内，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成。正常情况下以硫醇还原型存在，在许多生命活动中起直接或间接作用，参与体内三羧酸循环及糖代谢，为机体提供能量[3]。GSH具有广泛的生理和药理活性[4]，临床上主要用于药物性肝肾损伤、病毒性肝炎、胆汁淤积、化疗患者、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺疾病、以及中毒等疾病的治疗[5-8]。有研究报告[9]，健康者随着给药方式及剂量的不同，给药后GSH在血液中的浓度在2 h内达到峰值，但达峰时间是各不相同的，有较大的个体差异。

在临床生化检验方法中，氧化酶法测定的最终原理是过氧化氢与4-氨基安替比林及酚类在过氧化物酶的作用下生产红色的醌亚胺化合物。而许多还原性物质（如：还原型谷胱甘肽、维生素C、尿酸、抗坏血酸、胆红素等）与过氧化氢反应，使氧化酶法反应过程中所产生的过氧化氢浓度降低，从而干扰了氧化酶法的最终反应，使检测结果偏低[10]。从本实验结果，我们得知：GSH浓度对部分氧化酶法项目的影响程度各不相同，其中最大的是UA和GLU，最小的是LDL-C。结合本实验项目的自动化检测参数，尽管Cre、UA、HDL-C和LDL-C的分析方法及测光点一致，但GSH对各项目的影响均不一样。GLU、TC和TG的分析方法及测光点一致，GSH对各项目的影响也不一样。而相同的GSH浓度，对各项目的影响为什么不同呢？本研究认为：可能是各试剂添加的抗干扰成分及量的不同，或者在各个反应过程中过氧化氢产生的时间及速度的不同。具体原因有待进一步研究证实。而本次实验与其他研究[1-2]相比也存在差异，主要是GSH对各检测项目的影响不同。这可能是检测系统之间的差异，特别是检测试剂的抗干扰性不同引起。

随着GSH的广泛应用，对检测结果的影响已不容忽视，应引起大家的重视。尽管目前各试剂厂家都加强了试剂的抗干扰性，但是没有彻底解决药物对检测的干扰问题。因此，为减少或避免药物对检测结果的影响，临床医护人员要根据各药物代谢动力学规律，在合适的时间进行抽血检验，从而避免对患者病情作出错误判断。