肺泡灌洗液SAT-TB联合结核菌Xpert检测对诊断涂阴肺结核的价值

王 芳，邵 斌，王亮平

(来凤人民医院感染科，湖北 来凤 445700)

结核病是影响人类健康的慢性疾病之一，也是世界重大公共卫生问题之一。我国结核病发病率居世界前列，活动性肺结核病人数居世界第二位[1]。该病早期无特异性临床表现，发现率较低，确诊肺结核主要结合临床表现、影像学、细菌涂片、免疫及培养等，临床多集中于涂阳肺结核的早期发现及治疗。涂阴肺结核是指有肺结核临床症状或影像学检查有异常表现，至少有3次痰涂片镜检抗酸杆菌阴性[2]，其临床症状多样、轻重不一，易与其他呼吸系统疾病相混淆，若采用传统方法进行确诊，阳性率降低、耗时较长[3]，因此，寻找快速、高效、准确的诊断方法具有重要临床意义。近年来，纤维支气管镜检查作为肺部疾病重要的辅助检查方法，通过肺泡灌洗进行SAT-TB、Xpert检测，对诊断涂阴肺结核具有重要价值[4]。因此，本研究将探讨肺泡灌洗液SAT-TB联合结核菌Xpert检测在涂阴肺结核的诊断中的应用价值，旨在提高涂阴肺结核的诊断正确率及确诊速度。

1 对象与方法

1.1 研究对象

纳入标准：1)符合《中国结核病防治规划实施工作指南(2008年版)》[5]中的涂阴肺结核诊断标准；2)患者未伴有严重心功能不全。排除标准：1)近期发生心肌梗死者；2)伴有大量咯血者。依据纳入、排除标准，选择2015年8月至2016年8月，来凤人民医院收治的68例涂阴肺结核患者作为研究对象，男46例，女22例，年龄21～73(54.24±14.87)岁。临床表现以夜间盗汗、发热、咳嗽、咳痰为主；X线、CT检查结果以斑片影云絮影多见。具体数据见表1。

表1 68例涂阴肺结核患者临床表现、X线及

68例肺结核患者中，2例为原发性肺结核、66例为继发性肺结核，13例合并肺外结核。本研究经本院道德伦理委员会批准，获得患者及家属同意，并签订知情同意书。

1.2 检测方法

1.2.1 肺泡灌洗

患者均采用奥林巴斯纤维支气管镜检查，依据患者胸部CT或X线检查结果，选择病变支气管作为灌洗部位，将10～20 mL生理盐水通过支气管镜灌入病变支气管中，负压吸引回收灌洗液，重复2～3次，收集约20 mL灌洗液至无菌瓶内，送检。

1.2.2 SAT-TB检测

根据灌洗液的清浊度，对于伴有黏液的灌洗液可加入4%NaOH溶液进行液化(加入量低于样本量体积)，SAT-TB试剂盒由上海仁度生物科技有限公司提供，操作步骤严格按照说明书执行。

1.2.3 结核菌Xpert检测

将肺泡灌洗液(约5 mL)与含有NaOH及异丙醇的处理液按照2:1均匀混合，室温下静置15 min，将混合液转移至多室塑料反应盒中，置于Gene Xpert仪(由美国Cepheid公司提供)中进行检测，120 min后记录结果。

1.3 观察指标

记录患者肺泡灌洗液SAT-TB及结核菌Xpert检测结果，并计算灵敏性、特异性、准确性、阳性预测值及阴性预测值。

灵敏性=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%；特异性=真阴性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%；准确性=(真阳性例数+真阴险例数)/总例数×100%；阳性预测值=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%；阴性预测值=真阴性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%。

1.4 统计学方法

采用SPSS15.5软件包进行处理，计数资料的比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺泡灌洗液SAT-TB、结核菌Xpert检测结果

肺泡灌洗液SAT-TB、结核菌Xpert检测结果见表2—3。

表2 肺泡灌洗液SAT-TB检测结果 n=68

表3 结核菌Xpert检测结果 n=68

2.2 2种检查方法诊断价值分析

联合检测对诊断涂阴肺结核的灵敏度、特异度及准确性较单独检测均有显著提高(P<0.05)，见表4。

表4 2种检查方法诊断涂阴肺结核的价值分析 %

*P<0.05，与SAT-TB检测、结核菌Xpert检测结果比较。

3 讨论

我国结核病患者人群中，涂阴肺结核患者约占85%，在结核病的防控中成为不可忽视的群体[6]。从临床症状来看，涂阴肺结核患者多伴有咳嗽症状；从单因素与多因素分析结果来看，咳嗽与肺结核无明显关系，这与涂阳患者明显不同；另外，涂阴肺结核患者可伴有盗汗、体质量下降、发热、乏力等症状[7-8]。本文资料显示，患者临床表现以夜间盗汗、发热、咳嗽、咳痰为主，缺乏典型表现，因而影响临床医师的判断涂阴肺结核患者胸片表现不典型，缺乏特异性，多数缺乏涂阳肺结核的渗出、增生、钙化灶同时存在的多形态特征表现[9]。本文资料显示，X线、CT检查结果以斑片影云絮影多见，同样缺乏特异性，因此，临床医师需综合患者病史、辅助检查等进行综合诊断，以提高诊断正确率。

目前，临床诊断肺结核主要通过病原学检查，但该方法易受到标本获取、患者间断性排菌、结核菌数量级别等因素的影响，致敏感度较低，且耗时较长，与临床结核病快速诊断的要求存在一定差距[10]。SAT技术是RNA恒温扩增新技术，其以结核分枝杆菌特异性16rRNA为检测靶标，在特定温度下，通过MMLV逆转录产生双链DNA，然后再产生多个RNA拷贝，拷贝完成后进入下一个扩增循环，在扩增的同时将带有荧光标记的探针与RNA拷贝结合，产生荧光，再通过荧光检测仪实时捕获，可直观反映是否存在结核杆菌[11-12]。本研究结果显示，SAT-TB检测诊断的灵敏度为88.46%，特异度为69.05%，准确性为76.47%，说明SAT-TB检测对于涂阴肺结核患者具有一定诊断价值，且检测速度快，有望成为诊断涂阴肺结核的一种新检测方法。

结核菌Xpert检测是2011年WHO制定的对适应人群进行痰液的检测，而近来研究[13-14]发现，纤维支气管镜获得的肺泡灌洗液中的抗酸杆菌涂片及培养阳性率高于痰液标本，可显著提高结核病诊断的敏感性。张海晴等[15]发现，通过Xpert MTB/RIF试剂盒对结核疑似患者进行诊断，将结果与痰涂片、培养及核扩增检测方法相比：涂阳标本中，Xpert MTB/RIF的检出率为98.2%；涂阴标本中，Xpert MTB/RIF的检出率为72.1%，若复检可提高检出率。本研究结果显示，结核菌Xpert检测诊断的灵敏度为80.77%，特异度为52.38%，准确性为63.23%，此结果稍低于张海晴等[15]的报道，可能与本研究样本容量较小有关。另，本研究结果提示，Xpert检测在涂阴肺结核中的灵敏度较高。

本研究还探讨联合检测对涂阴肺结核的诊断价值，结果显示诊断的灵敏度为92.30%，特异度为78.57%，准确性为83.82%。联合检测对诊断涂阴肺结核的灵敏度、特异度及准确性均有显著提高。此结果说明联合检测可准确、高效地协助临床医师进行诊断，缩短患者等待确诊时间，使患者能够得到及时治疗，改善预后。

综上所述，肺泡灌洗液SAT-TB联合结核菌Xpert检测对诊断涂阴肺结核具有重要价值，具有较高的灵敏度及特异度，为一种简便、快速、高效的检查方法。