Bm亚型鉴定及家系调查分析

梁海英,王雅丽，刘铁梅,张丽荣

(1.吉林大学中日联谊医院 输血科；2.吉林大学中日联谊医院 病理科,吉林 长春130033)

ABO血型鉴定是保证输血安全的基础，而对其亚型正确定型具有非常重要的临床意义[1]。凡红细胞上显示较弱的B特异性抗原的血型称为B亚型，B亚型在分类上与A亚型基本上平行。已经报道有B3、BX、Bm及Bel等亚型，跟Aend及Ay相当的B亚型还没见报道[2]。本科室应一位无偿献血者要求对其血样进行血型鉴定，发现该样本出现正反定型不符现象，用不同试剂检测出现不同的结果，并对其进行家系调查，现报告分析如下。

1 材料与方法

1.1样本受检者在加拿大献血时，正定为O型，反定为B型，因正反定型不符而被拒绝，回国来本科室进行血型鉴定。因其母亲为本院职工，母亲同时也采集样本。后来外婆在外院住院，外院检测正定A型反定AB型，也采标本来本科室检测，其余标本后来主动采集送检。

1.2试剂抗-A、抗-B长春博德公司；抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H上海市血液生物医药有限责任公司产品；人ABO血型反定型用红细胞,为长春博迅公司产品。

1.3仪器Baso 2002-2离心机，恒温水浴箱。

1.4正反定型测试方法正定型测试方法和反定型试验方法正好相反，其中正定型测试方法为用2滴抗血清加上1滴待检者的2%红细胞悬液，轻摇离心，观察有无凝集反应，用“O”表示无凝集，用“+”表示凝集，分别在表格内标记清楚；而反定型测试方法为用2滴待检者的血清加1滴标准红细胞悬液，轻摇离心(离心机1000 rpm)60 s，观察有无凝集反应，然后标记在相应表格内。

1.5吸收放散测试方法吸收用于验证真假凝集反应，方法有冷吸收和热吸收，我们采用冷吸收方法。用反复盐水洗涤的已知抗原的标准B型1 ml压积红细胞，加1 ml被检血清即抗-B血清，混匀后置4℃冰箱内吸收1 h，1 000 rpm离心,吸取上清液倍比稀释，加标准B型红细胞1滴，行吸收后血清效价分析，真凝集经吸收后凝集减弱或呈阴性；假凝集经吸收后凝集不变。

我们采用热放散试验方法，即将吸收后怀疑有抗体附着的红细胞用生理盐水洗洗5次，弃上清，加在压积红细胞中加等量的生理盐水，60℃水浴中振荡放散10 min，3 000 rpm高速离心2 min，取上清2排管，倍比稀释，再分别加入标准的B型红细胞悬液1滴和O型红细胞悬液1滴，进行效价分析，如抗体较弱可预先用酶处理红细胞后再做试验。注意控制温度，如果温度降低，抗原抗体会重新结合。

1.6测定唾液血型物质方法人的唾液中分泌有ABH抗原，如果6℃冰箱保存1周其抗原活性不变。取待测者唾液离心取上清，煮沸再离心取清液。将抗-A、抗-B、抗-H倍比稀释后与相应红细胞反应，唾液用标化血清(效价128)等体积混合，再用相应的标准红细胞检测相应的抗体,观察有无凝集反应进行分析判断。

2 结果

2.1血型鉴定结果见表1。

表1 血型鉴定结果

2.2吸收放散检测结果

吸收液与标准B型红细胞反应，待检标本吸收液与标准B细胞的凝集强度比标准血清与标准B细胞吸收液的凝集强度低3个梯度；待检标本放散液与标准B型、O型红细胞反应，待检标本放散液与标准B细胞凝集，与标准O细胞不凝集，说明待检标本含有B抗原。

2.3唾液血型物质检测结果

将处理过唾液和标化血清(效价为128)等体积混合,室温放置10 min后，与标准B型红细胞1 000 rpm离心60 s没有凝集，从而判断待检唾液中含有B、H血型物质。

2.4家系调查结果如下图

先证者在加拿大留学期间献血，被告知血型有问题没能献血，回国后想得到确切结果来本科室检测，因检测出其血型为B亚型中的Bm型，同时对其母亲检测得到同样的结果。后来外婆住院血型同样正反定型不符，正定A型，反定AB型，又采样到本科室检测得出为ABm型。因其三代均有这样的血型，遂进行了家系调查，因外祖父已经去世，没法检测，其余有亲缘关系的均进行血型鉴定，得出结果如图1。

3 讨论

根据该标本的相应血型血清学实验结果，得出其血型为Bm型，这是B亚型的一种[3-5]。鉴于现在有些医院，特别是二级医院输血科，虽然国家和省里的检查总是要求受血者要进行ABO的正反定型检测，仍然有部分医院只做正定型，或者有的医院即使做了正反定型，当正反定型不相符时只相信正定型，就按正定型来给患者输血，这是非常危险的[6]。

当出现正反定型不符时应分析原因，通过科学的实验鉴定出准确的血型。就如本例如果做为受血者，按正定型给予少量的O型红细胞可能不会有什么反应，因为供者血血浆中的抗-B抗体可能被受血者血浆中的血型物质中和；但是如果大量输O型血，供者血中的抗-B抗体可能与受血者红细胞发生溶血反应。

对于一个拥有如此特殊血型的个体来说，有必要进行家系调查，让直系家庭成员对自己的特殊血型有一定的了解，当发生需要输血的情况时，为血型鉴定提供参考意见。