根据IgM/IgG血清OD值推断圆环疫苗免疫效果

牛德料，周绪斌

（天康生物股份有限公司，北京 丰台 100161）

猪圆环病毒（PCV）是迄今发现最小的一种动物病毒，现已知PCV有2个血清型，即PCV1和PCV2，PCV1为非致病性的病毒；PCV2为致病性的病毒。PCV2可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、皮炎肾病综合征、增生性坏死性肺炎、仔猪先天性震颤等多种疾病，同时PCV2还可使猪群产生严重的免疫抑制，临床上以PMWS 最为常见，PMWS最早发现于加拿大（1991年）。由于PCV2在猪群中广泛存在及疫苗的大量使用，如果单纯检测PCV2 IgG血清抗体无法判断是疫苗抗体还是野毒感染，所以根据血清学变化规律同时检测PCV2 IgM/IgG抗体并结合免疫时间进行综合判断疫苗免疫效果。

1 猪场基本情况

本场基础母猪1200头，自繁自养，使用国内某企业生产的猪PCV-2全病毒灭活疫苗对猪群进行免疫；母猪执行3次/年普防（2，6，10月），2 mL/次；仔猪14日龄肌注2 mL/次。本次检测共采集46份血样，包括1周、2周、3周、4周、6周、8周猪只，分别检测PCV2 IgM/IgG血清抗体，根据检测结果推断疫苗免疫效果。

2 阴性/阳性判断标准

2.1 本次检测使用试剂盒

全部采用INGEZIM公司检测试剂盒（货号为1．1．PCV． K2），检测温度为37 ℃。

2.2 实验结果有效前提

IgG和IgM阳性对照OD值＞0．7；IgG和IgM阴性对照OD值＜0．5

2.3 本次检测阳性/阴性对照值

IgM阴性对照OD值=0．184，阳性对照OD值=2．9405；IgG阴性对照OD值=0．111，阳性对照OD值=2．821

2.4 IgM/IgG阴/阳性判断标准

2.4.1 IgM阴/阳性判断标准

IgM阳性：样品OD值＞阳性对照OD 值×0．4=1．1762

IgM阴性：样品OD值＜阳性对照OD 值×0．4=1．1762

2.4.2 IgG阴/阳性判断标准

IgG阳性：样品OD值＞阳性对照OD 值×0．3=0．8463

IgG阴性：样品OD值＜阳性对照OD 值×0．3=0．8463

3 感染时间判断标准

根据IgM/IgG OD值的变化来判断感染时间，判断标准为：

1）IgM OD值＞IgG OD值：感染初期——II

2）IgG OD值 ＞IgM OD 值， 且IgM滴度＞1：100(IgM为 + ）：近期感染（1-2个月内）——III

3）IgG OD值＞IgM OD值 且IgM滴度＜1：100（IgM为-）：感染超过 2个月——IV

4 检测结果分析

4.1 猪PCV2 IgM/IgG抗体OD值

从检测结果（图1）可以看出1～4周仔猪PCV2 IgG OD值均大于 IgM OD值（全部为阴性），并且在6 周和8 周时PCV2 IgG全部转为阴性、PCV2 IgM继续保持阴性。

图1 猪PCV2 IgM/IgG抗体OD值

4.2 猪PCV2 IgM OD值分析图

通过图2可以看出，虽然在1 周、2 周、3 周、4 周、6周、8周时阳性率全部为零，但是PCV2 IgM OD值的平均值在4周及4 周以前随着周龄的增大而变小，在6周和8周时PCV2 IgM OD值的平均值出现了1～4周相反的结果，平均值在不断增大，同时离散度也在增大。

4.3 猪PCV2 IgG OD值分析图

根据图3可以看出，PCV2 IgG阳性 率 在 1 周（71．43%）、2 周（85．71%）、3周（100%）时随着周龄的增加阳性率也在增加，4周时阳性率开始下降，并且到6周、8周时阳性率全部为零；平均值的趋势和阳性率的趋势基本吻合。

4.4 猪PCV2 IgM/IgG OD值平均值和阳性率对比图

通过对比图（图4）可以看出IgM平 均 值 1 周（0．2545）＞ 2 周（0．2047）＞ 3周（0．1486）＞ 4周（0．1303）＜ 6周（0．188）＜ 8周（0．2877）；IgG 平均值1周（1．1616）＜ 2 周（1．7961）＞ 3 周（1．7087）＞ 4 周（0．7897）＞ 6 周（0．2839）＞ 8周（0．2526）。从此组数据可以看出，虽然IgM的阳性率全部为零，但平均值在1～4周是缓慢下降，并且在6～ 9周在缓慢上升，而IgG平均值1～2周逐渐上升，在2周时达到最大值（1．7961），3周及以后开始缓慢下降，并且阳性率也在6周和8周时全部为0。

图2 PCV2 IgM OD值分析图

图3 PCV2 IgG OD值分析图

图4 PCV2 IgM/IgG OD值平均值和阳性率对比图

图5 PCV2感染时期百分比

4.5 猪PCV2感染时期百分比

根据PCV2 IgM/IgG OD值大小的比较来判断圆环病毒感染时间，依据感染时间判断标准推断1周时2个月前感染率为71．43%；2周时2个月前感染率为85．71%；3周时2个月前感染率为100%；4周时2个月前感染率为42．86%。但是根据猪只日龄和PCV2 IgM/IgG OD值的走势判断1～4周 IgM抗体和1～8周 IgG抗体显然是来自母源抗体，并非野毒感染产生，而PCV2 IgM OD值自6 周时开始上升：4 周（0．1303）＜6 周（0．188）＜ 8 周（0．2877），有可能是2周时疫苗免疫刺激机体所产生，以此推断本猪群在8周前并未遭受圆环野毒的攻击。

5 小结

1）张毅等（2012）的研究数据表明，试验母猪产前免疫圆环病毒疫苗，对新生仔猪的母源抗体进行检测，新生仔猪在哺乳前几乎检测不到PCV2母源抗体，吮初乳后则逐渐上升，10～20日龄时母源抗体水平最高并在20日龄左右达到高峰，30日龄以后迅速下降，40日龄左右降至临界值，因此在14～20日龄免疫圆环病毒疫苗最佳。本场采用母猪普免3次/年，仔猪14日龄免疫，2 mL/次，基本符合张毅等（2012）的研究结果。

2）虽然母猪未做PCV2 IgM和IgG OD值检测，根据母猪采取3次/年普防方案推断1周、2周 PCV2 IgM和IgG抗体均来自母源抗体。并且PCV2 IgG抗体呈上升趋势：1周（1．1616）＜2 周（1．7961）， 并 在 3 周逐渐下降，6周时阳性律为零，此变化规律符合张毅等（2012）的研究结果。

3）根据免疫学原理，感染（疫苗免疫或野毒感染）后第3～4 d IgM抗体开始产生，在第10 d时可以达到高峰。IgG抗体出现稍晚，感染（疫苗免疫或野毒感染）后10～14 d开始产生，21 d时具有保护效果。按此规律，本场仔猪14日龄免疫后，第3～4 d PCV2 IgM抗体产生，在3～4 周时PCV2 IgM抗体应达到高峰；PCV2 IgG抗体应在5～6周时达到高峰；本次检测实际数据3周、4周PCV2 IgM抗体值逐渐衰减，并且在6周和8周时有缓慢升高，但仍是阴性。PCV2 IgG抗体平均值在6 周时均小于2周、3周、4周，并且6 周（0．2839）＞ 8周（0．2526）。 因 此 推 断 在 2周时免疫PCV2疫苗没有达到预期效果（PCV2 IgM和PCV2 IgG OD值上升），同时结合2周时PCV2 IgG OD值（较高），所以2周时进行圆环疫苗免疫时间过早，不能有效突破母源抗体的干扰。

4)单纯根据检测结果：PCV2 IgM OD平均值1周（0．2545）＞ 2周（0．2047）＞ 3周（0．1486）＞ 4周（0．1303）＜ 6周（0．188）＜ 8周（0．2877）；PCV2 IgG OD平均值1周（1．1616）＜ 2周（1．7961）＞ 3周（1．7087）＞ 4周（0．7897）＞ 6周（0．2839）＞ 8周（0．2526）和感染时间判断标准推断1周、2周、3周、4周时在2个月前感染率分别为71．43%、85．71%、100%、42．86%，如果再结合猪只日龄来综合考虑此结论显然不正确，此阶段IgM/IgG抗体显然来自母源抗体，因此要想借助IgM/IgG OD值的变化来判断感染时间时要结合母猪免疫程序、被测猪只日龄、免疫时间等进行综合考虑方可得出对生产有指导意义的结论。