XE-5000血细胞分析仪检测血小板假性增多2例分析

朴桂花 李强

血小板计数是临床常规的检查项目，血小板数量与疾病发生、发展和预后有着密切的关系，结果准确与否，直接关系到临床医生对疾病的诊断和治疗。随着全自动血细胞分析仪的广泛运用，也出现了许多新的问题[1]。检验人员不能一味的完全相信仪器测定出的检验结果，一定要熟悉仪器的性能，尤其是血小板直方图的变化。本文通过对我院2例血小板假性增多病例分析，探讨全自动血细胞分析仪检测血小板计数的影响因素，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 检测对象

收集我院2017年6月—2018年3月门诊和住院患者，发现XE-5000检测首次血小板计数＞1 000×109/L的患者2例，1例男1岁，儿科支气管肺炎住院患者；另1例女51岁，门诊呼吸内科患者。

1.2 仪器和试剂

XE-5000全自动血细胞分析仪及原装配套试剂；质控品（System公司生产）；OLYMPUS CX41显微镜；瑞氏-姬姆萨染液（珠海贝索生物技术有限公司）；1%草酸铵稀释液。仪器严格按要求进行维护和保养，室间质评、室内质控在控，确保仪器及试剂稳定可靠。

1.3 检测方法

按要求采集EDTA-K2 抗凝血2 ml混匀，按照XE-5000血细胞分析仪的操作规程检测血常规[包含血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）、平均红细胞体积（MCV）等26项]，将2份血样再分别用电阻抗法（PLT-I）和激光流式法（PLT-O）两种方法检测血小板，均测定两次，结果取平均值；每一份样本在仪器检测后参照《全国临床检验操作规程》[2]，由2位经验丰富的主管检验师进行血涂片瑞氏-姬姆萨染色镜检，观察破碎红细胞、血小板大小形态及分布情况，并进行手工镜检计数求平均值。查证低色素小红细胞碎片对血小板计数的影响。

2 结果

2例样本血小板四种方法计数结果（PLT-I法、PLT-O法、手工镜检法和血涂片法）及HGB、MCV结果，见表1。

2.1 确定假性增多

对2例血涂片进行染色镜检，发现例1（男1岁）患者成熟红细胞有中等程度以上大小不均，以小红细胞为主，多见红细胞碎片；例2（女51岁）患者成熟红细胞明显大小不一，小异形红细胞多见，细胞碎片极多见；两例血涂片PLT分布均匀，形态大致正常，血涂片验证红细胞碎片增多，干扰仪器所致血小板假性增多。

2.2 准确计数PLT

血细胞分析仪两种方法（PLT-I和PLT-O）检测和手工镜检比较发现，2例均为血小板假性增多，PLT-O法与手工镜检结果更相符，其中HGB越低、MCV越小（＜70 fL），小异形红细胞及细胞碎片数量越多（见表1数据），干扰仪器，不能被仪器正确识别，而被误认为是PLT所致。这与张福新[3]的报道结果相似。且仪器多会提示，在PLT直方图的右方呈一高峰，呈拖尾状或锯齿状波峰。见图1和图2。

图1 例1血小板直方图

图2 例2血小板直方图

3 讨论

表1 2例患者HGB、MCV及4种方法血小板计数（X109/L）结果

血小板计数是血常规中重要的项目之一，血小板的主要功能是凝血和止血作用，修补破损的血管，对血栓与出血性疾病的诊断和治疗有重要的参考价值[4]。因此准确计数PLT具有极其重要的意义。使用血细胞分析仪检测血小板的数量具有速度快、操作简便、工作效率高等特点[5]。但由于仪器自身检验原理的限制，其检出结果会受到多种因素的影响，导致血小板计数结果偏高[6]。本文2例血小板假性增多样本是由sysmex XE-5000检测，XE-5000血细胞分析仪在血小板检测通道采用鞘流电阻抗（PLT-I）、在网织红细胞检测通道采用荧光染色结合激光流式法（PLT-O）两种方法计数血小板。鞘流电阻抗法能有效避免细胞重叠、侧向或反流，通过检测部产生的脉冲误差，使检测结果更准确，而由于电阻抗法不能分辨颗粒内部结构和形态，故仪器不能真正区分小红细胞和血小板。它只能检出正常体积2～20 fL范围内的血小板，而将25～250 fL范围的颗粒判定为红细胞，由于此法RBC与PLT检测在同一通道，所以小红细胞及细胞碎片对PLT计数影响很大，红细胞体积偏小时，仪器会将小红细胞误认为血小板，使血小板假性增多，而且MCV越小，对血小板计数影响越大，血小板假性增多就越多；而在网织红细胞检测通道的激光流式法因采用了DNA/RNA核酸荧光染色，因此对一些临床特殊样本如出现较多的细胞碎片、小红细胞、巨大血小板样本及脂类与蛋白的聚合体、免疫复合物等有较强的抗干扰能力，能够提供更为准确的血小板计数结果[7-9]。2005年国际血液学组织提出了显微镜复检的41条建议性标准，得到了中国血液检验学界的密切关注。复检规则要求，对于首次检测血小板计数＞1 000×109/L 应涂片复检[10]，本文按规则在工作中收集2例PLT＞1 000×109/L，同时HGB减低伴随MCV明显减低＜70 fL以下，PLT直方图都提示有大血小板或破碎红细胞出现，PLT-O法与显微镜手工镜检计数血小板结果较为一致；当PLT明显增多时，PLT-O法更能准确计数血小板。但在目前的临床工作中，PLT-I是检测血小板的常规方法，对于血液病患者和一些HGB偏低、MCV偏低＜70 fL、混有细胞碎片、大血小板、小球形红细胞的特殊样本，建议用XE-5000的PLT-O法进行检测，必要时配合显微镜镜检[11]，从而使血小板计数结果更准确更可靠。

另外注意血液样本的放置时间，以免放置时间过长而导致RBC破坏，影响PLT计数呈假性增多现象。此外，检测室的温度、空气的尘埃颗粒及电磁波干扰均易对血小板计数产生影响，所以检测时应注意尽量排除此类因素的干扰[12]。

综上所述，在保证血细胞分析仪正常运行的同时，检测中发现血红蛋白（HGB）偏低、红细胞平均体积（MCV）偏低（＜70 fL）、PLT异常增多的结果，在仪器提示有异常直方图时，应及时分析可能的影响因素，建议应用XE-5000的PLT-O法进行复检，必要时配合显微镜手工镜检，以得出准确的检验结果，避免血小板假性增多造成临床误诊误治。