唐山地区2011-2014年儿童社区获得性肺炎临床常见细菌及IL-12与降钙素原的相关性研究

倪金凤，庞保东,田庆玲，张 双

(唐山市妇幼保健院 感染性疾病科，河北 唐山063000)

由于儿童呼吸免疫系统发育不完善、局部的免疫功能弱，儿童肺炎如未得到有效治疗，可导致严重并发症，而且儿童肺炎病情变化快，并发症多，更危险，因此社区获得性肺炎(CAP)是我国三岁以下儿童死亡的首要原因。致病微生物随年龄、地区、时代和其他原因区分是极具有挑战性的。随着抗菌药物在临床上广泛应用，细菌的耐药性不断上升，所以研究细菌性肺炎的发病机制，寻找新的检测手段及治疗靶点尤为重要。IL-12在宿主抗感染中作用明显，对机体多种免疫细胞的增殖、分化和感染性疾病的发病均有重要影响[1]。 本文就以我院465例CAP住院的患儿以及同期健康查体儿童80例为调查对象。对采集标本进行细菌学培养，对细菌的种类、分布等结果进行统计，并且分析IL-12表达的差异与PCT的相关性。

1 材料与方法

1.1一般资料

病例组均选自2011年6月-2014年6月在我院小儿呼吸科住院的CAP患儿，按年龄分为4组：婴儿组为1月-1岁；幼儿期组为1岁-3岁；学龄前期组为3岁-6岁；学龄期组为6岁-14岁；均符合《诸福堂实用儿科学》第8版制定的CAP诊断标准[2]，同期在我院儿保科健康查体儿童为对照组。根据细菌培养结果选取革兰阳性菌(G+菌)59例患儿组，革兰阴性菌(G-菌)33例患儿组，另外选择健康查体儿童80例作为对照组。

1.1.1入选病例标准，符合全部以下几项：①住院48小时内或医院外发病 ；②1月 -14岁患儿；③出现咳喘、咳痰等呼吸道症状有或无发热；④双肺实变体征或可闻及哮鸣音、中小水泡音；⑤血常规示白细胞明显升高，中性为主，CRP阳性；⑥X线或肺CT检查显示斑片状、片状浸润影或间质性肺炎改变，有或无胸腔积液；

1.1.2排除标准，有以下一项即可：①发病2星期内有住院治疗史；②过敏性、吸入性及噬酸细胞性肺炎；③先天性心脏病、先天性支气管肺发育不良和(或)畸形；④麻疹、肺结核及百日咳合并肺炎；⑤血液病、自身免疫性疾病及肾病综合征合并肺炎患儿；⑥支气管哮喘患儿；⑦使用免疫抑制剂患儿。

1.2标本的采集及处理

1.2.1痰液 于入院当日由专人用低压吸引器接一次性吸痰管，经鼻深插气管负压吸取痰标本，置消毒试管内，2小时内送检。

1.2.2静脉血 输液前使用采血针进行抽血，可直接将注血端针头接血培养瓶，约4 ml，轻轻颠倒混匀，立即送检，切勿冷藏。入选患儿采空腹外周静脉血2 ml 2管，采用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清IL-12的浓度进行检测，用免疫层析法测定患者血液中降钙素原( PCT )的水平， 严格按照试剂盒说明进行操作。

1.2.3胸水 伴有胸腔积液者通过B超定位后抽取胸水5-10 ml，立即送检进行细菌培养。

1.3统计分析计数资料差异比较、计量资料两组均数对比、多组均数进行比较分别采用卡方检验、t检验、方差分析。3组血清的白细胞介素-12、降钙素原水平的比较,方差不齐则用Dunnett’s T3及Tamhane’s T2进行检验，方差齐采用方差分析及 LSD进行检验； 而相关性研究，方差不齐进行Spearman相关性分析，方差齐进行Pearson相关性分析。P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1CAP的细菌病原谱检出情况

共检出革兰阳性菌(G+菌)59例(12.6%)，革兰阴性菌(G-菌)33例(7.1%)，详见表1。

表1 CAP细菌病原的分布情况

2.23组IL-12和PCT水平的比较

G+组及G-组外周血中 IL-12、PCT的水平均高于对照组(P<0.05),但G+组及G-组比较差异无统计学意义(P>0.05)， 见表 2。

表2 3 组 IL-12、PCT水平比较

*P<0.05 与对照组比较，△P>0.05与G+组比较。

2.3IL-12和PCT的相关性分析

G+组及G-组患者 IL- 12、PCT的水平表达均呈正相关(r=0.655,r= 0.681,P均<0.05 )。

2.4不同年龄组细菌感染状况

各年龄组G+、G-细菌检出情况见表3。

表3 不同年龄儿童痰、血液或胸水标本细菌培养阳性例数中G+菌、G-菌分布(%)

2.5细菌分布与季节关系

春季(3-5月)、夏季(6-8月)、秋季(9-11月)、冬季(12-2月)四季病原体G+、G-菌阳性例数分布情况见表4。

表4 不同季节CAP患儿细菌的检出情况分析 (例)

3 讨论

据国内报道，细菌感染的阳性率40%-50%，本文细菌检出率19.7%，较黄李平[3]及胡蓉[4]文献报道低。本组数据显示，G+菌检出率占12.6%，较G-菌检出率高，SP占8.6%，KP3.9%，而与王云花文献报道[5]不同，其文献显示细菌性肺炎以G-菌检出率高，为83.45%，KP占26.44%。

CAP的病原是多种多样的，已知会导致CAP病原体主要包括细菌、病毒、肺炎支原体、衣原体、结核杆菌、真菌等，其中细菌主要包括肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希氏菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、卡他布兰汉菌等[6]。肺炎链球菌是儿童社区获得性肺炎最常见的细菌，随着肺炎球菌结合疫苗在儿童中广泛应用，肺炎链球菌在各年龄组的发病率和死亡率显著下降。抗生素耐药性是一个很严重问题，对接受经验抗生素治疗的患者具有潜在的负面影响[7]。随着抗菌药的广泛应用，呼吸道病原菌对抗菌药的耐药性越来越严重。

细菌侵犯肺部后使机体免疫器官产生一系列免疫反应，可释放多种细胞因子，IL -12是其中重要的炎症因子之一[8]。IL-12主要的效应是激活T 淋巴细胞增殖和产生 IFN-γ[9]。病原菌刺激活化的树突状细胞(DC)产生 IL-12,又间接刺激自然杀伤细胞产生IFN-γ而发挥抗菌作用[10]。IL-12还可诱导巨噬细胞产生多种促炎性因子、抗炎因子，参与细菌感染性肺炎机体的免疫调节机制，并与多种肺部疾患的形成及免疫应答有关,如肺炎链球菌肺炎、克雷伯杆菌性肺炎、金黄色葡萄球菌肺炎、百日咳、肺结核等。国外有人用IL-12与肺炎球菌表面蛋白A一同鼻腔接种小鼠[11]，研究发现IL-12能增强动物肺部IL-10mRNA的表达，并杀灭肺炎球菌，对机体产生保护作用。本研究结果提示，在细菌性肺炎患儿外周血中IL-12 较健康查体儿童水平显著升高，而且革兰阳性菌和革兰阴性菌组均能引起患儿IL-12血清水平的升高， 但两者引起患儿IL-12表达水平无明显差异，即 IL-12表达水平与致病菌种类没有相关性。

在正常生理情况下，机体血清中降钙素原处于较低水平，但当患儿存在细菌感染时，机体在炎症因子、感染等作用下，单核-巨噬细胞可大量合成并且释放降钙素原，因此导致血清中降钙素原快速增高[12]。当某些非感染性炎症反应和病毒感染(即使是严重病毒感染)时，PCT正常或轻度升高[13]。本研究发现， 革兰阳性菌和革兰阴性菌组外周血中 IL-12表达水平均和PCT 水平呈正相关(r= 0.681,r=0.655，P均<0.05)，能反映机体细菌感染严重程度。提示PCT参与了细菌感染的发生、发展过程。

综上所述，不同地区、年龄、季节儿童CAP细菌感染病原菌种类多样性、复杂性，早期除了经验性用药，应尽早明确病原菌，合理选用抗生素。检测细菌性肺炎患儿血清IL-12、PCT水平对了解细菌性肺炎的进展及预后有一定的指导意义。