血浆水通路蛋白5和血管内皮生长因子在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的表达及意义

谢瑞玉　李维春　杨续

[摘要]目的 觀察血浆水通路蛋白5（AQP5）和血管内皮生长因子（VEGF）在新生儿急性呼吸窘迫综合征中（ARDS）的表达及变化。方法 选取2015年10月～2017年5月我院收治的37例新生儿ARDS患儿血浆标本，同时，收集同期20例非呼吸系统疾病患儿标本。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定AQP5与VEGF浓度并进行统计学分析。结果 ARDS组患儿的血清AQP5水平均显著高于非呼吸系统疾病组，差异均有统计学意义（P<0.05）；ARDS组患儿入院72 h的AQP5水平显著高于入院时、入院24 h，差异均有统计学意义（P<0.05）；非呼吸系统疾病组患儿3个时间段的血清AQP5水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。ARDS组患儿的VEGF水平均显著高于非呼吸系统疾病组，差异均有统计学意义（P<0.05）；ARDS组患儿入院24 h的VEGF水平显著高于患儿入院时、入院72 h，72 h后趋于回落，差异均有统计学意义（P<0.05）；非呼吸系统疾病组患儿入院时的血浆VEGF水平高于患儿入院24、72 h，且随着出生时间延长逐渐下降，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 AQP5和血管内皮生长因子在新生儿急性呼吸窘迫综合征时高表达，其可能参与了新生儿呼吸窘迫综合征的发生、发展。

[关键词]急性呼吸窘迫综合征；新生儿；水通路蛋白5；血管内皮生长因子

[中图分类号] R563.8 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2018）6（c）-0109-03

[Abstract]Objective To observe the expression and changes of plasma water pathway protein 5 （AQP5） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in neonatal acute respiratory distress syndrome （ARDS）.Methods From October 2015 to May 2017，37 plasma samples of newborns with ARDS admitted to our hospital were selected and 20 samples of non-respiratory diseases were collected at the same time.AQP 5 and VEGF concentrations were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and statistically analyzed.Results Serum AQP 5 levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group，and the differences were statistically significant（P<0.05）.The level of AQP 5 in ARDS group at 72 h after adission was significantly higher than that in admission and 24 h after admission， and the difference was statistically significant（P<0.05）.There was no significant difference in serum AQP 5 levels among children with non-respiratory diseases for three time periods （P>0.05）.VEGF levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group， and the differences were statistically significant（P<0.05）.The VEGF level in ARDS group at 24 h after adission was significantly higher than that in admission and 72 h after admission，and it tended to decline after 72 h， the difference was statistically significant（P<0.05）.Plasma VEGF level of children with non-respiratory diseases was higher than that of children in 24，72 h after admission， and decreased gradually with the extension of birth time， with statistical significance （P<0.05）.Conclusion AQP5 and vascular endothelial growth factor are highly expressed in neonatal acute respiratory distress syndrome.They may be involved in the occurrence and development of neonatal respiratory distress syndrome.

[Key words]Acute respiratory distress syndrome；Neonatal；Water pathway protein 5；Vascular endothelial growth factor

新生儿急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是由多种原因所引起的肺组织急性弥漫性炎症综合征，出生后数小时即出现进行性呼吸困难、青紫和呼吸衰竭，是新生儿时期的常见危重症，好发于早产儿、母亲糖尿病、宫内窘迫或窒息新生儿，也是新生儿尤其早产儿死亡的一个重要原因[1-3]。迄今为止，ARDS仍以临床诊断为主，尚缺乏敏感特异的实验室诊断指标，吴灵芝等[4]的研究发现，治疗前患儿体内外周血单个核细胞中CD24 mRNA 表达水平显著高于对照组，经过治疗后表达下降，提示单个核细胞CD24可能参与疾病的发生。ARDS发生还与基因突变有关，洪达[5]等的研究发现，肺表面活性蛋白C基因发生变异可导致ARDS的发生，应用表面活性物质替代治疗和正压辅助通气支持可明显改善症状，这一基因改变均否认有家簇遗传史，呈散在发病[6]。另外，还有研究表明SP-B外显子的多态性和TOLL样受体表达水平与NRDS发生也可能存在相关性，但需要进一步证实[7-8]。以上这些研究在临床上有一定的参考意义，但都不能起到快速和早期诊断的作用，而与肺泡上皮细胞损伤的相关标志物已经引起人们的关注。本研究通过观察不同时间段血浆水通路蛋白5（AQP5）和血管内皮生长因子VEGF在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的表达水平，旨在探讨其在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年10月～2017年5月我院收治的新生儿ARDS患儿37例，其中男22例，女15例；胎龄平均（36.52±6.26）周；平均体重（3.17±1.36）kg；ARDS的诊断标准参照实用新生儿学第四版[9]，入院时根据临床及X线胸片诊断即进行机械通气与肺表面活性物质治疗。同时，收集同期20例非呼吸系统疾病（包括脐带感染、黄疸、湿疹）患儿标本，其中男13例，女7例；胎龄平均（38.85±3.21）周；體重平均（3.42±1.56）kg，两组患者的一般资料差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，并与患儿家长签署知情同意书。

1.2 研究方法

分别采集ARDS组、非呼吸系统疾病患儿入院时，24、72 h的血液标本，3000 r/min离心15 min，血浆置-80°保存备用。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定ARDS组、非呼吸系统疾病组的AQP5与VEGF水平，试剂盒由上海语纯生物科技有限公司提供，严格按照使用说明书进行操作。

1.3 统计学方法

采用统计学软件SPSS 16.0分析数据，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 两组患儿血清AQP5水平的比较

ARDS组患儿的血清AQP5水平均显著高于非呼吸系统疾病组，差异均有统计学意义（P<0.05）；ARDS组患儿入院72 h的AQP5水平显著高于入院时、入院24 h，差异均有统计学意义（P<0.05）；非呼吸系统疾病组患儿3个时间段的血清AQP5水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.2 两组患儿血清VEGF水平的比较

ARDS组患儿的VEGF水平均显著高于非呼吸系统疾病组，差异均有统计学意义（P<0.05）；ARDS组患儿入院24 h的VEGF水平显著高于患儿入院时、入院72 h的水平，72 h后趋于回落，差异均有统计学意义（P<0.05）；非呼吸系统疾病组患儿的入院时血浆VEGF水平高于患儿入院24、72 h，且随着出生时间延长逐渐下降，差异有统计学意义（P<0.05）（表2）。

3讨论

新生儿呼吸窘迫综合征是由肺表面活性物质缺乏或破坏过多，肺泡表面张力增高，肺泡萎陷，进行性肺不张，肺换气不足，病情持续发展，可引起高碳酸血症和低氧血症，进而酸中毒，并引起炎症因子的释放，最终导致肺泡上皮细胞和毛细血管内皮损伤。肺泡上皮细胞由覆盖其表面90%～95%的Ⅰ型肺泡上皮细胞和Ⅱ型上皮细胞构成，AQP5定位于肺泡Ⅰ型上皮细胞，对生理和病理条件下的肺泡内液体的清除起着重要作用。多种肺损伤的动物模型研究表明[10-12]，内毒素、脂多糖的诱导及肿瘤坏死因子的刺激，均可导致AQP5表达下调，进而导致肺水肿，引起肺损伤，并将定位于肺泡Ⅰ型上皮细胞顶膜区的小分子AQP5释放出来，通过肺-血屏障释放到血液中，致血浆中的AQP5水平增高。胡金绘等[13]通过观察不同通气方式对新生儿血清AQP5水平的影响，结果发现AQP5水平与ARDS的肺损伤程度及机械通气时间有关。本研究显示，ARDS组患儿的AQP5水平在入院时，入院24、72 h时显著高于非呼吸系统疾病组，差异有统计学意义（P<0.05），提示AQP5参与新生儿ARDS的表达；ARDS组患儿RAGE水平在入院时，入院24、72 h时的血浆AQP5水平呈递增趋势，差异有统计学意义（P<0.05），入院72 h时水平最高，提示AQP5可能参与新生儿ARDS的发生、发展，观察AQP5的变化有助于ARDS的疗效观察和预后判断。

VEGF是特异作用于血管内皮的生长因子，又称血管通透因子，肺组织中许多细胞如肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺泡巨噬细胞等均可释放VEGF，在维持肺的正常生理功能及抗损伤修复中具有重要意义。正常生理条件下，组织细胞中的VEGF并不直接释放进入血液中，在ARDS早期由于各种因素刺激，激活巨噬细胞和中性粒细胞，引起肺内及全身的炎症反应，导致肺泡-毛细血管广泛损伤，肺泡气-血屏障破坏，血管通透性增加，释放大量VEGF，并由肺组织向血液释放增加，引起血浆中的VEGF水平增高[14]。本研究显示，ARDS组患儿的VEGF水平在入院时，入院24、72 h时显著高于非呼吸系统疾病组，差异均有统计学意义（P<0.05），提示VEGF参与新生儿ARDS表达；ARDS组患儿入院时，入院24、72 h VEGF水平的比较，差异有统计学意义（P<0.05），以24 h时最高，72 h开始回落，与文献报道一致[15]，可能与ARDS患儿经治疗后，炎症反应得到控制，修复的肺泡上皮细胞与内皮细胞释放的炎症介质减少有关[16]，提示血浆中VEGF水平可以反映ARDS的发生、发展，观察VEGF的变化有助于临床医生对ARDS的治疗效果和预后判断[17]。

综上所述，AQP5和VEGF在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的表达增加，其可能参与了新生儿呼吸窘迫综合征的发生、发展。监测血浆AQP5、VEGF水平在疾病的早期诊断、疗效评价及预后判断中具有一定的临床价值。

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（收稿日期：2017-12-25 本文编辑：白 婧）