单核细胞HLA-DR指数在烧伤患者中的表达及临床意义

邢娟娟

(南昌大学第一附属医院烧伤科，南昌 330006)

在烧伤患者中，感染是常见且严重并发症之一，是导致患者高死亡率的主要因素。有文献报道，近30年来烧伤感染是烧伤患者死亡的首要原因[1-3]。由于感染症状不具典型性和特异性，因此在早期诊断中很难发现。本研究通过流式细胞仪检测烧伤患者外周血单核细胞表面HLA-DR指数，对预警早期烧伤并发感染具有重要意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 70例均为我院烧伤科住院病例，将其设为观察组，纳入标准为烧伤后24h内入住我院成年患者，其中，男44例，女26例，年龄18岁-87岁，平均年龄36.8岁，烧伤原因为火焰烧伤20例，热液烧伤36例，电烧伤9例，其它5例，烧伤面积≥30%9例，烧伤面积 10%-29%16例，烧伤面积＜10%45例。同时选取同期来南昌大学第一附属医院健康体检的70例设为对照组，纳入标准为无发热、WBC计数、肝肾功能正常，其中，男性40例，女性30例，平均年龄35.6岁。观察组入院后给予及时的抗感染，抗休克，创面换药及手术治疗等对症治疗。

1.2 仪器与试剂 美国BD FACSCanto II流式细胞仪， 试剂 CD14-PE，HLA-DR-APC，CD45-PerCP，溶血素均购置美国BD公司。

1.3 检测方法 对入院治疗前患者及健康体检者均在严格无菌操作下抽取抗凝静脉血2ml，应用流式细胞术检测单核细胞HLA-RD指数，取流式专用管，依次加入HLA-DR-APC，CD14-PE，CD45-PerCP 抗体各 5μl，加入全血 50μl，混匀，室温下避光孵育20min.每管加入溶血剂1ml，混匀，室温下避光 20min，离心 1500 转/min，5min，弃上清，加入PBS 1ml，1500转/min离心5min，弃上清，再加入300μl PBS重悬，上机检测。

1.4 HLA-DR指数计算公式 HLA-DR指数=单核细胞HLA-DR平均荧光强度/粒细胞HLA-DR平均荧光强度；通过CD45/SSC设定淋巴细胞，中性粒细胞和单核细胞亚群。

1.5 统计学方法 统计学软件SPSS 22.0对数据进行分析和处理，计量资料用（±s）表示，组间差异比较采用两独立样本t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组、对照组HLA-DR指数、白细胞（WBC）计数比较 观察组HLA-DR指数明显低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，观察组WBC计数较对照组显著增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 观察组、对照组HLA-DR指数、WBC比较

2.2 不同烧伤面积患者HLA-DR指数、WBC计数比较 烧伤面积≥30%患者HLA-DR指数明显低于烧伤面积10%-29%、烧伤面积＜10%患者和对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），WBC均高于其它烧伤面积组及对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；烧伤面积10%-29%患者HLA-DR指数低于烧伤面积?10%患者及对照组，差异均有统计学意义 （P＜0.05），但烧伤面积10%-19%和烧伤面积＜10%患者间WBC计数无统计学意义 （P＞0.05）.烧伤面积＜10%的患者HLA-DR指数表达低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表 2。

表2 不同烧伤面积患者HLA-DR指数、WBC计数比较

3 讨论

烧伤外科中感染是最常见的并发症，具有高发病率、高死亡率特点，是造成烧伤患者死亡的主要原因之一[4]。传统的血培养是烧伤感染诊断的临床常用方法，但血培养周期长，阳性率低，部分细菌培养困难，且特异性不高；WBC与感染的临床分级相关，但出现较晚，受患者本身基础WBC水平和感染后应激反应强度影响.这些都严重影响患者的及时诊断。在烧伤患者中感染的发生率和死亡率居高不下，因此感染的早期诊断和治疗显得十分重要[5，6]。本研究表明，单核细胞表面HLA-DR指数的表达与烧伤感染具有一定的相关性，可预警烧伤早期感染及严重程度。

HLA-DR属MHC II类分子，是抗原提呈细胞向T细胞提呈抗原时所必须的一个蛋白，正常情况下外周血单核细胞HLA-DR高表达，严重创伤、烧伤或大手术后单核细胞HLA-DR表达显著下降，从而抑制抗原递呈功能，抑制免疫应答，导致免疫功能低下，甚至出现免疫麻痹[7]。

本研究结果显示，观察组HLA-DR指数显著低于对照组，观测组WBC计数高于对照组；烧伤面积组间比较：烧伤面积越大，皮肤损伤相对严重，HLA-DR指数随之降低，提示HLA-DR指数与烧伤面积有一定相关性，其水平与烧伤面积呈负相关关系。烧伤面积≥30%患者WBC均高于其它烧伤面积组及对照组，有相对诊断价值，但烧伤面积10%-29%和烧伤面积＜10%患者间WBC计数无统计学意义，说明该两组患者对烧伤感染的预警及严重程度不及HLA-DR指数敏感，因此，HLADR指数的检测对于烧伤患者早期感染的诊断有着重要意义。

综上所述，HLA-DR指数是细胞感染特异性和灵敏度的指标，烧伤面积越大HLA-DR指数相对降低，预示着感染的发生及严重程度，因此可作为早期诊断烧伤感染敏感指标，对烧伤患者早期诊断感染有着重要作用。HLA-DR指数作为早期监测感染的指标，明显优于传统血培养、WBC计数，为临床烧伤感染的预警及严重程度的提供可靠价值，具有良好的临床应用前景。种种原因本研究没能跟踪观察，有待深入。