新生儿遗传代谢病筛查室间质量评价5年回顾

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(昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心，云南 昆明 650032)

新生儿疾病筛查(neonatal screening)是指对新生儿群体通过简易快速准确的实验室检测手段，在患儿临床症状未出现之前发现某些危害严重的先天性遗传代谢性疾病，避免出现智力、体格发育障碍甚至死亡[1-2]。为保证新生儿遗传代谢病筛查结果的质量，应对筛查的全过程进行严格的质量控制并建立完善的质量保证体系。昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心2013年开始参加卫生部临床检验中心(简称临检中心)组织的新生儿遗传代谢病筛查实验室室间质量评价(简称室间质评)活动，现对5年来的质评结果进行总结分析。

1资料与方法

1.1研究材料

每年接收卫生部临检中心分发的苯丙氨酸(phenylalanine，Phe)、促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone，TSH)3批次未知浓度的滤纸干血斑室间质评样本，每批次5份，共计75份；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD)在2013年、2014年只有2批次，后面每年3批次，每批次5份，共计65份。全部质评样本塑料袋密封保存于-20℃冰箱待检。

1.2仪器试剂

试剂为芬兰Wallac公司原装进口的Neo-TSH、Neo-Phe和Neo-G6PD测定试剂盒，Wallac 1420 VICTOR荧光分析仪、时间分辨荧光免疫分析(DELFIA)自动振动器、DELFIA Plate Wash 1296-026 型洗板机(以上均购自芬兰Wallac公司)，3mm干血斑手动打孔器、DNP-9052型电热恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)。

1.3方法

1.3.1样本检测

卫生部临检中心每年发放3个批次的Phe和TSH质评样本，G6PD样本在2013年、2014年只有2批次，后面每年是3批次，按照要求分别于每年的5月、8月、10月对质评样本进行检测，Phe和G6PD用荧光法，TSH用DELFIA，所有质评样本和待检样本无区别对待，同时同批次检测，测定后按规定上报定量检测和临床判断结果，质评结果及得分情况在1个月内反馈到新筛中心。

1.3.2室间质评判断标准

按照卫生部临检中心的判断标准，①定量判断：所有项目质评样本值允许范围是靶值±30%，超过此范围为失控[3]；②定性判断：根据实验定量结果，参照实验室TSH、Phe和G6PD的阳性切值对每份室间质评样本进行临床评估[3]。本筛查中心各项目的定性判断标准见表1。通过与卫生部临检中心反馈的定性结果进行比对，不符合者判断为失控。

表1本筛查中心Phe、TSH、G6PD的定性判断标准

Table 1 Qualitative criteria for Phe, TSH and G6PD in the screening center

1.3.3质评结果评分

按照卫生部临检中心的判断标准，每次活动每一筛查项目未能达到至少80%得分则称为该项目本次活动不满意成绩。总测试活动未达到至少80%得分称为不满意的成绩。未参加测试活动定为不满意的成绩，该次得分为0[4]。对每一次室间质评，针对某一项目的得分计算公式为：该项目的可接受结果数/该项目总的测定样本数×100%。对调查的全部项目，其得分计算公式为：全部项目的可接受结果数/全部项目总的测定样本数×100%[4]。

2结果

2.1室间质评样本偏倚情况

5年内共接受Phe和TSH 15批次共计75份质评样本，G6PD 13批次共计65份质评样本。Phe偏移范围：-30.00%～45.00%，TSH偏移范围：-21.41%～34.92%，G6PD偏移范围：-23.33%～45.83%，各项目测定结果偏倚分布见图1、图2、图3。

Phe相对偏倚平均值14.00%，TSH相对偏倚平均值11.56%，G6PD相对偏倚平均值9.53%，各项目每年相对偏倚的平均值见表2、表3。

图1 Phe质评样本浓度偏倚分布

图2 TSH质评样本浓度偏倚分布

2.2定量结果

75份Phe和TSH质评样本中，分别有70份Phe和73份TSH样本测定结果通过，符合率分别为93.33%(70/75)和97.33%(73/75)；65份G6PD质评样本中，60份样本测定结果通过，符合率为92.31%(60/65)，失控样本、失控结果及原因分析见表4。

表2 2013—2017年度Phe、TSH相对偏倚情况

Table 2 Relative bias of Phe and TSH during 2013-2017

年份批次样本量(份)Phe相对偏倚平均值(%)TSH相对偏倚平均值(%)2013年31510.949.562014年31514.0011.122015年31513.8119.812016年31515.928.652017年31515.368.64合计157514.0011.56

表3 2013—2017年度G6PD相对偏倚情况

Table 3 Relative bias of G6PD during 2013-2017

年份批次样本量(份)G6PD相对偏倚平均值(%)2013年2108.232014年2108.132015年3154.152016年31513.362017年31513.82合计13659.53

表4 12份定量结果失控质评样本及原因分析

2.3定性结果

75份Phe和TSH质评样本、65份G6PD质评样本中，各有1份Phe、TSH和G6PD样本定性判断未通过，符合率分别是Phe 98.67%(74/75)、TSH 98.67%(74/75)、G6PD 98.46%(64/65)。

2.4质评结果评分

所有项目的质评样本定量和定性判断总评分结果均≥80%，见表5。

表5各项目定量和定性结果总评分[%(n/N)]

Table 5 Total score of quantitative and qualitative results for each item[%(n/N)]

3讨论

3.1室间质评结果分析

卫生部临床检验中心的Phe和TSH新生儿遗传代谢病筛查实验室质量评价工作始于1998年[4]，G6PD检测的室间质评工作从2008年开始。昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心成立于2012年，2013—2017年连续5年参加全国新生儿疾病筛查实验室质量评价，共接收Phe和TSH 15批次共75份质评样本，首次在全国范围内对参加G6PD室间质评结果进行分析和总结，5年接收G6PD 13批次共65份样本，Phe相对偏倚平均值14.00%，TSH相对偏倚平均值11.56%，G6PD相对偏倚平均值9.53%，基于同样的测定方法，我中心的Phe和TSH的相对偏移平均值比其他实验室小[5-6]，说明实验室的检测操作相对稳定，结果均一性较好。Phe、TSH和G6PD定量和定性单项评分和总评分均≥80%，达到卫生部临检中心的质评要求，说明本筛查中心实验室检测结果是可信的。

3.2质评样本失控原因分析及对策

所有质评样本中有5份Phe标本、2份TSH标本、5份G6PD标本定量结果偏移均≥靶值±30%，判断为失控。分析原因：2份Phe样本是随机误差和系统误差，3份Phe样本是新搬迁实验室温度过高导致失控；2份TSH样本是由于没有定期清洗消毒洗板机导致失控；2份G6PD样本是试剂混合不均匀，3份G6PD样本是因为实验人员更换，没有做好交接人为用错实验板导致失控。3个项目各有1份样本定性判断未通过，Phe和TSH未通过均是因为人为上报错误导致，G6PD未通过是因为测定值刚好为本室的可疑阳性切值2.2IU/gHb，故上报可疑阳性，而质评判断标准是阴性，所以未通过。患儿确诊或漏诊都是定性判断决定的，理论上其质量的好坏更为重要[7]，特别是针对G6PD定性判断失控的情况，要考虑后续对我中心的G6PD检测数据进行全面分析，制定符合我中心实验室的G6PD阳性切值。此外还要加强实验室人员操作规范培训，减少因人为操作失误而导致的失控。

3.3展望

新生儿疾病筛查工作的最重要特点是疾病的早期诊断和治疗，而诊断的唯一依据是实验室的检测结果[8]，假阴性和假阳性结果都会对患儿、患儿家庭及社会造成不可逆的巨大精神负担和经济损失[9]，所以加强对筛查实验室的检测质量管理和控制必不可少。我筛查中心成立较晚(2012年)，但是实验室每年的筛查量在15万左右，如此大的检测量更加应该重视实验室的质量控制，其检测质量是否合格就需要进行客观验证和评价。室间质评是临床实验室全面质量管理的重要组成部分，也是实验室认可的重要依据[6]，新筛实验室通过参加全国新生儿疾病筛查实验室室间质量评价活动及严格的实验室室内质控制度，能起到自查、自检、自省的作用，为遗传代谢病的诊断治疗提供准确可靠的检测信息[10]。我院新筛实验室2017年开展了先天性肾上腺皮质增生症的检测，并成功申请参加卫生部临检中心2018年的17α-羟化酶室间质评检测活动，希望能及时接受专业测评，为检测质量保驾护航。