不同产区板蓝根药材质量考察

孙丹丹,王刚,和焕香,郭庆梅

(山东中医药大学药学院，山东 济南 250355)

板蓝根为十字花科植物菘蓝(IsatisindigoticaFort.)的干燥根，性寒味苦，归心、胃经,具有清热解毒，凉血利咽的作用,临床用于瘟疫时毒、发热咽痛、温毒发斑、痄腮、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒及痈肿等症[1]。现代研究表明，板蓝根的主要化学成分有(R，S)告依春、靛苷、香草酸、大黄素、香草醛、棕榈酸、香草乙酮等[2-8]。板蓝根的临床应用比较广泛，具有抗癌、抗病毒、治疗呼吸道疾病等药理作用[9-12]。板蓝根主要分布在河北、安徽、江苏、河南等省，其他各省也有少量分布，河北为道地产区[13]。药材市场各地板蓝根药材流通频繁，加之临床应用广泛，尤其需要对不同产地板蓝根的质量进行检测。因此，本实验对内蒙古、陕西、甘肃、河北、河南、山东、黑龙江7个产地的板蓝根进行质量比较。

1 样品、仪器与试剂

1.1 样品

从内蒙古、陕西、甘肃、河北、河南、山东、黑龙江7个不同地区收集板蓝根药材各1 000 g，原药材经山东中医药大学郭庆梅教授鉴定，确认为十字花科菘蓝(IsatisindigoticaFort.)。见表1。

表1 板蓝根的药材来源Table 1 The source of Isatidis Radix

1.2 仪器

日立L-2000型高效液相色谱仪(日本日立)；色谱柱Agilent C18柱(250 mm×46 mm，5 μm)； FA2004N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；SX2-4-10箱式电阻炉(山东省龙口市电炉总厂)；HH-S4双孔四列电热恒温水浴锅(北京科伟永鑫仪器厂)；101-(1)A数显式电热恒温干燥箱(上海阳光实验仪器有限公司)；8001型恒温振荡器(国华仪器)；KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.3 试剂

蒸馏水；40%乙醇；甲醇(色谱纯，天津科密欧公司)；纯净水(杭州娃哈哈集团)；(R, S)-告依春对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111753-201706)；1%硝酸银试液，三氯化铁，无水乙醇，甲醇，稀盐酸(均为分析纯)。

1.4 样品制备

分别取板蓝根药材50 g，粉碎，过四号筛，备用。

2 方法与结果

2.1 水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物测定方法

水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物按照2015年版《中国药典》四部[14]0832第二法烘干法、2302总灰分及酸不溶性灰分测定法、2201醇溶性浸出物测定法中热浸法进行测定。

2.2 (R, S)-告依春的含量测定

2.2.1 色谱条件

2.2.2 对照品溶液的制备

精密称取(R, S)-告依春的对照品10.1 mg，置于250 mL的容量瓶里，配置标准溶液，(R, S)-告依春的浓度为40.4 μg/mL。配制好的对照品溶液放置于4 ℃下保存，备用[1]。

2.2.3 供试品溶液的制备

称取板蓝根粉末约2.0 g，精密称定，置200 mL圆底烧瓶中，精密加入蒸馏水100 mL，称定重量，加热回流2 h，放冷，再称定重量，用蒸馏水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，经微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得。配制好的供试品溶液放置于4 ℃下保存，备用[1]。

2.2.4 线性关系考察

图1 (R, S)-告依春标准曲线Fig. 1 (R, S)-goitrin standard curve

分别精密吸取质量浓度为40.4 μg/mL的对照品溶液1.0、2.0、3.0、5.0、10 mL分别置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得到质量浓度分别为4.04、8.08、12.12、20.2、40.4 μg/mL的对照品溶液，按2.2.1项下的色谱条件测定峰面积，平行测定3次。以峰面积为纵坐标(y)，浓度为横坐标(x)，进行回归分析，回归方程为y= 109 207.499 6x+ 725 92，r=0.999，(R, S)-告依春在4.04～40.4 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,见图1。

2.2.5 精密度试验

精密吸取质量浓度为40.4 μg/mL的对照品溶液，按2.2.1项下的色谱条件连续进样6次，结果(R, S)-告依春峰面积相对标准偏差为2.39%(n=6)，表明仪器的精密度良好。

2.2.6 稳定性试验

精密吸取同一份供试品溶液，按2.2.1项的色谱条件分别于0、2、4、8、12、24 h测定，结果(R, S)-告依春的峰面积相对标准偏差为2.35%，表明供试品溶液在24 h内稳定性较好。

2.2.7 重复性试验

取同一批样品6份，按2.2.2项下制备，按2.2.1项下的色谱条件测定，测定(R, S)-告依春的峰面积相对标准偏差为1.74%，表明重复性良好。

2.2.8 加样回收率试验

精密称取已测知含量的样品6份，按2.2.2项下制备供试品，分别加入一定量的(R, S)-告依春对照品，测定峰面积，平均回收率为100.83%，相对标准偏差为2.46%。

2.2.9 供试品含量测定

精密吸取各供试品溶液，按2.2.1项下的色谱条件，注入液相色谱仪，平行测定3次，计算各样品中(R, S)-告依春的含量。结果见图2。

图2 (R, S)-告依春的HPLC图Fig. 2 HPLC chart of (R, S)-goitrin

2.3 结果与分析

不同产地的板蓝根水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物及(R, S)-告依春含量均符合2015年版《中国药典》的规定。陕西产地的板蓝根水分含量最低，河北产地次之，其他产地相对较高；山东产地的板蓝根灰分含量最低，内蒙古产地的次之，除陕西产地的板蓝根以外，其他产地的灰分质量分数均在5%以下；山东产地的板蓝根酸不溶性灰分含量最低，河南产地的次之，其他产地相对较高；陕西产地板蓝根的浸出物含量最高，甘肃产地次之，其他产地相对较低；7个产地的板蓝根药材的(R, S)-告依春含量在0.444 ～1.042 mg/g之间，河南产地中的含量最高，甘肃产地的次之，河北产地的最低。结果见表2。

表2 不同产地板蓝根药材含量测定结果(n≥3)Table 2 Content determination results of Isatidis Radix from different producing areas (n≥3)

3 结论

内蒙古、陕西、甘肃等7个产地板蓝根的水分、灰分、浸出物和(R, S)-告依春含量都符合2015年版《中国药典》的标准，但由于各地区气候、土壤等条件的差异，使得药材的含水量、灰分、浸出物等质量指标各有差异，该结果给农业生产中药材种植、加工、保存提供了可靠的指导意见，同时对临床用药起到了指导和规范的作用。