高效液相色谱法在中药复方制剂妇炎康有效成分含量测定中的应用

河南省平顶山市食品药品检验所（467000）李华丽 王小龙 李梅荣 叶晓亚

妇炎康是一种中药制剂，具有行气止痛、逐瘀散结、益气活血等功效，现已被临床广泛应用于慢性盆腔炎的治疗中，尤其适用于气虚血瘀证的患者，效果确切，具有一定的临床应用价值[1]。本文笔者为了验证高效液相色谱法在中药复方制剂妇炎康有效成分含量测定的应用效果，特选定指标成分：丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷进行查究，汇总如下。

1 资料与方法

1.1 材料 丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷，所有的产品均来自于中国食品药品检定研究院。妇炎康片（生产企业：云南白药集团有限公司生产），色谱纯选用的是甲醇、乙腈（生产企业：美国Fisher公司），分析纯选用的是磷酸，属于娃哈哈纯净水（生产企业：杭州娃哈哈集团有限公司）。

1.2 方法：①色谱条件：Kromasil C18，规格是 4.6×250 mm；5 um。流动相是A乙腈-B甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱。流速：每分钟1ml，柱温是25摄氏度。波长是285mm、230mm。进样量是10ul。②制备溶液：a.制备对照品溶液：精密称取丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷对照品，甲醇用于溶解，将甲醇制备成3mg/ml、0.045mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml的对照品混合液，对照品的混合液精密地量取1ml，甲醇加入后定为4ml，对照品的溶液制备成功[2]。b.制备样品溶液：本品精密地称取0.5g，放置在10ml的容器瓶中，加入甲醇，超声溶解30分钟，而后冷却至温度接近于室温，用甲醇补足，进行微孔滤膜过滤，滤液取续，样品溶液制备成功[3]。③制备阴性溶液：按照②的方法制备当归、赤芍、丹参的阴性样品。

2 结果

2.1 试验系统适用性 精密地吸取阴性溶液、样品溶液、对照品溶液，按照色谱条件进行进样，详细记录色谱图。结果显示：色谱图下丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷的条件平稳，理论塔板数在3000以上，具有较好的分离效果[4]。

2.2 试验线性关系 精密吸取对照品混合液制备芍药苷（0.2mg/ml、1mg/ml、0.05mg/ml、0.0025mg/ml、0.0013mg/ml）、丹酚酸（3mg/ml、0.15mg/ml、0.075mg/ml、0.038mg/ml、0.0019mg/ml）、原儿茶醛（0.045mg/ml、0.023mg/ml、0.0115mg/ml、0.0058mg/ml、0.0029mg/ml）、丹参素（0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.0125mg/ml、0.0625mg/ml、0.0313mg/ml）五种混合对照品溶液。按照色谱条件进行进样，对峰面积进行详细记录，以浓度以及峰面积进行线性回归。得到的丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷回归方程为：Y=3.96X-7.21（r=0.8265）、Y=3.18X-8.06（r=0.9204）、Y=5.26X-6.35（r=0.9991）、Y=4.21X-9.26（r=0.9033）；浓度在峰面积以及上述范围中线性关系良好。

2.3 试验精密度 对照品混合液精密地抽取6次，丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷的峰面积的RSD值分别是1.26%、1.15%、1.06%、1.31%，说明仪器具有良好的精密度。

2.4 试验稳定性 对供试品溶液进行精密的吸取，按照色谱条件进行进样，分别在0h、2h、4h、8h、12h、24h进样，对峰面积进行详细的记录，丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷的峰面积的RSD值分别是1.46%、1.39%、1.51%、1.49%，说明在24小时之内样品溶液的稳定性较好。

2.5 试验重复性 取妇炎康样品，根据样品溶液的制备方法制定样品6份，对峰面积进行记录，峰面积的RSD值分别是1.02%、1.09%、1.14%、1.12%，说明该方法的良好性较好。

2.6 试验加样回收率 每份含量是0.25g的妇炎康片，一共取6份，加入适量的对照品。根据溶液的制备方法制备，RSD值分别是1.05%、0.96%、0.98%、1.01%，试验加样回收率分别是100.25%、102.14%、100.25%、100.08%，说明该方法具有较好的试验加样回收率，见附表。

2.7 分析样品含量检测结果 随机取4批妇炎康样品含量，根据溶液制备的方法予以制备，峰面积详细记录，批号为16030205的，丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷含量分别是4.0626、0.0625、0.6682、0.2351。1603182的分别是4.1214、0.0612、0.6725、0.2206。1603253的分别是4.0125、0.0611、0.6926、0.2415。

附表 试验加样回收率

3 讨论

妇炎康是当前被临床广泛应用于治疗阴道炎、盆腔炎、慢性附件炎等疾病的中药制剂，具有软坚散结、活血化瘀、消炎止痛、清热解毒等功效，抗感染以及抗炎效果显著。它由丹参、黄柏、莪术、赤芍等多种成分组成，对病原微生物、纤维化以及胶原活性均具有一定的抑制效果，具有较好的治疗效果。高效液相色谱法具有高灵敏度、灵活性较强以及分离度较高等一系列优点[5][6][7]。本研究中，高效液相色谱法测量了丹酚酸、原儿茶醛、丹参素、芍药苷的含量，经过试验证明该方法在检测妇炎康有效成分中的准确性以及精密度均较高，并且所需要的样品容量较少，在中药制剂的质量控制中具有一定价值，在临床中具有较高的借鉴力度，值得推广。