参黄养阴胶囊质量标准研究

陈奇 姜英子 徐雅娟 解生旭 刘悦 宝艳儒

【摘 要】 目的：建立参黄养阴胶囊的质量控制方法。方法：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD） 法，色谱柱为岛津VP-ODS色谱柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流动相为乙腈-水（32∶68），流速为1 mL/min，柱温为30 ℃；ELSD检测器参数为漂移管温度105 ℃，气体流量2.8 L/min。结果：黄芪甲苷的线性范围为0.4024～12.8768 μg（r = 0.999），平均加样回收率为98.67%（RSD=0.87%），精密度实验RSD为2.20%，稳定性实验RSD为1.65%，重现性实验RSD为3.90%。结论：该测定方法简便、快速、重现性好，可用于参黄养阴胶囊中黄芪甲苷含量的测定。

【关键词】 参黄养阴胶囊；质量控制；黄芪甲苷；HPLC-ELSD 法；含量测定

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2018）13-0025-03

Abstract：Objective To establish the quality standard of Shenhuangyangyin capsule. Methods The HPLC - ELSD method was used for the detection of hplc-elsd， and the column of chromatographic column was the iso-jp-ods column （4.6 mm×150 mm，5 μm）， and the flow phase was acetonitrile-water （32∶68）. The flow rate was 1 mL/min， and the column temperature was 30. The ELSD detector parameter is the drift tube temperature 105， and the gas flow rate is 2.8 L/min.Result The linear range of astragaloside iv was 0.4024～12.8768 μ g （r= 0.999）. the average recovery of astragaloside iv was 98.67 % （RSD= 0.87 %）， RSD of precision experiment was 2.20 %， RSD of stability experiment was 1.65 %， RSD of reproducibility experiment was 3.90 %.Conclusion this method has the characteristics of simple and rapid reproducibility， and can be used to determine the content of astragaloside in shenhuang yangyin capsule and the method can effectively control the quality of shenhuang yangyin capsule.

Keywords：Shenhuangyangyin Capsule； Quality Control； Astragaloside iv； HPLC - ELSD Method； Content Determination

參黄养阴胶囊主要由人参、黄芪、黄精、麦冬、丹参、苦参、甘草等7味中药组成，具有益气养阴，活血化瘀的功效，用于气阴两虚兼血瘀证冠心病的辅助治疗[1-6]。其制法为人参、丹参粉碎成粗粉，其余黄芪等五味加水煎煮三次即得。黄芪为方中君药之一，具有补气升阳，行滞通痹之功效[7]，黄芪甲苷为其主要成分。研究采用HPLC - ELSD 法测定参黄养阴胶囊中黄芪甲苷的含量，为参黄养阴胶囊的质量控制提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器 岛津2010C高效液相色谱仪（Alltech ELSD 2000ES检测器）；METTLER AG245 十万分之一天平。

1.2 材料 对照品丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦参碱、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf人参皂苷Rg1、甘草酸单铵盐购自中国药品生物制品检定所；对照药材麦冬、黄精购自中国食品药品检定研究院；试验中所用乙腈、甲醇均为色谱纯，水为双蒸水自制，其它试剂均为分析纯；参黄养阴胶囊由吉林吉尔吉药业有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 采用岛津VP-ODS色谱柱（4.6×150 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（32∶68）；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；ELSD参数：漂移管温度105 ℃，气体流量2.8 L/min。

2.2 对照品溶液制备 取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含黄芪甲苷0.2 mg的对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备 取本品5 g，精密称定，加甲醇50 mL，加热回流2 h，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水50 mL，微热使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取5次，每次50 mL，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤3次，每次50 mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10 mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀即得。

2.4 线性及范围 精密吸取对照品溶液2、4、8、16、32、64 μL，按“2.1项”的方法进样分析，测定其峰面积。以黄芪甲苷进样量和峰面积的Log值为横、纵坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归计算。经计算，回归方程为y=1.880x+4.974，相关系数r=0.999，线性范围为0.4024～12.8768 μg。结果显示，在线性范围内，其对数值和峰面积对数值呈良好线性关系。

2.5 精密度考察 精密吸取上述同一对照品溶液，连续进样6次，记录黄芪甲苷峰面积，计算其RSD值为2.20%，说明仪器精密度良好。

2.6 稳定性考察 取根据“2.3项”下方法制得的同一供试品溶液，于0、2、4、6、8h下测定，记录黄芪甲苷峰面积，计算RSD值为1.65%，表明8 h内黄芪甲苷稳定性较好。

2.7 重复性考察 称取同一批供试品6份，精密称定，按“2.3项”下方法制成供试品溶液，按“2.1项”色谱条件进样分析，测定其峰面积，计算黄芪甲苷的含量，得RSD值为3.90%。表明该方法重复性良好。

2.8 准确度试验 取同一批供试品6份，精密称定，加入一定量对照品，按“2.3项”下方法制成供试品溶液，并进行分析，计算加样回收率，黄芪甲苷的平均回收率为98.67%，RSD为0.87%，证明以上方法准确度良好，符合要求。

2.9 样品含量测定 取三批样品，每批各2份，按“2.3项”下方法制成供试品溶液，按“2.1项”的方法进样分析，计算黄芪甲苷的含量，结果见表2。

3 讨论

对于参黄养阴胶囊处方中七味中药进行定性鉴别后，结果显示丹参、黄芪、苦参、人参薄层鉴别具有专属性，麦冬、黄精、甘草薄层鉴别不具有专属性，所以本研究建立了参黄养阴胶囊中所含的4味中药材的薄层色谱鉴别方法，为参黄养阴胶囊的质量控制提供参考。

由于中药复方的成分多样且复杂，待测的目标成分经常会受到一些其他杂质的干扰，使观察到的结果不清晰，因此，应选择合适的处理方法，既能保证结果清晰，又能去除背景干扰，如黄芪的供试品制备时，水饱合正丁醇萃取后，又用正丁醇饱和的0.3 mol/L氢氧化钠溶液提取3次，再以正丁醇饱和的水洗涤至中性，后又通过D101型大孔吸附树脂柱，得到供试品溶液。

在黄芪甲苷供试品溶液的制备中，先后考察了不同的提取方法（超声提取方法、加热回流提取方法和索氏提取方法）发现加热回流方法黄芪甲苷损失较少，方法操作简便。供试品去除杂质干扰的方法考察了萃取与大孔树脂洗脱的方法，发现萃取方法较为适合。

《中华人民共和国药典》中黄芪含量测定采用的流动相为乙腈-水（32∶68），按药典流动相色谱峰分离效果均好，无干扰，故选其作为含量测定流动相。

参考文献

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[7]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 北京：中国医药科技出版社， 2015：302-303.