广西产拳卷地钱中农药残留检测

王跃峰 牛思琪 笪舫芳 王剑 朱华

【摘 要】 目的：对广西产拳卷地钱中总六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、总滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT）和五氯硝基苯9种有机氯农残进行测定，为控制拳卷地钱安全限量提供实验数据，为开发利用拳卷地钱药材资源提供安全性保障。方法：利用气相色谱法对以上9种有机氯农残进行测定。结果：拳卷地钱中总六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）未检出；总滴滴涕（ op′-DDT、pp′-DDE、pp′-DD、Tpp′-DDD之和）未检出；五氯硝基苯未检出。参考《中国药典》收载的人参、西洋参药材及其饮片品种项下“农药残留量”部分检查限度，可见9种有机氯农残检出结果均合格。结论：由于农药品种繁多，性质各异，近几年其检测技术主要是色谱法，其中以气相色谱应用最为广泛，该法检测灵敏度高、简便快捷、分离效果好，可作为拳卷地钱农残安全限量监测及质量控制的有效手段。

【关键词】 拳卷地钱；农药残留；测定

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2018）02-0026-03

Abstract：Objective Determination of 9 organochlorine pesticide residues of total 666 （α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC）， total DDT （pp′-DDE， pp′-DDD， op′-DDT， and pp′-DDT）， pentachloronitrobenzene in Marchantia convoluta.To provide experimental data for the control of safety limits of Marchantia convoluta， for the development and utilization of medicinal of Marchantia convoluta resources to provide security protection. Methods The above nine kinds of organochlorine pesticide residues were determined by gas chromatography.Results The total 666 （δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC ） were undetected， the total DDT（op′-DDT、pp′-DDE、pp′-DD、Tpp′-DDD） were undetected，pentachloronitrobenzene was not detected.The “Chinese Pharmacopoeia” contained ginseng， American ginseng herbs and their Pieces under the “pesticide residues” check limit “，9 kinds of organochlorine pesticide residue detection results are qualified.Conclusion Due to the wide variety of pesticides，different nature，in recent years， its detection technology is mainly chromatography，the most widely used gas chromatography，the method of detection of high sensitivity， simple and quick， good separation effect.it can be used as an effective means for the monitoring and quality control of pesticide residues.

Keywords：Marchantia convoluta；Pesticide residues；Determination

中药材是人们用以防病、治病的特殊商品，因其具有疗效独特、资源丰富、不良反应少等优势[1]，在国内外掀起了绿色消费热潮。为满足日益增长的市场需求，中药材开始像水稻、蔬菜等农作物一样，进行农业化人工种植[2]。大面积种植中药材易造成病虫害相互传染，且栽培过程中药农严重依赖具有高效、速效、经济等特点的化学农药，而过量施用农药或施用农药不当致使中药材农药残留量超标，不仅影响药材疗效，甚至会直接危害人体健康。随着中药被检出重金属和农残等安全限量超标的报道频频出现，中药材及其制剂的质量安全受到质疑，严重制约了中药材及其产品走向国际舞台[3-5]。

为进一步加强中药材的质量控制，增加中药的安全性指标，在2015年版《中国药典》的基础上，经国家药典委员会组织有关单位和专家对黄曲霉毒素、重金属及有害元素、农药残留量等有害物质的控制方法、限度值以及重点品种进行了试验研究[6-8]。《中国药典》收载的人参、西洋参药材及其饮片品种项下增加“农药残留量”部分检查项目，限度为“含总六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）不得过0.2 mg /kg；总滴滴涕（op′-DDT、 pp′-DDE、pp′-DDT、pp′-DDD之和）不得过0.2 mg /kg；五氯硝基苯不得过0.1 mg /kg”。

廣西产拳卷地钱来源为地钱科地钱属植物拳卷地钱（Marchantia convoluta Gao et Chang），为广西民间常用中草药之一。其始载于《西藏苔藓植物志》，广泛分布在西藏、广西、贵州等高寒山区[9]，是苔藓植物中常见的中草药之一，常用其外治烫伤骨折、体癣、疮病不敛，内治黄疸性肝炎，获得了较好的疗效[10-11]。近年来，我国对中药中农残的研究报道屡见不鲜，农残检测主要采用气相（GC）、高效液相（HPLC）、气相-质谱联用（GC-MS）等检测方法[12-15]。笔者就拳卷地钱中总六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）、总滴滴涕（op′-DDT、 pp′-DDE、pp′-DDT、pp′-DDD之和）和五氯硝基苯9种有机氯农残进行测定，为控制拳卷地钱安全限量提供实验数据，以期为开发利用拳卷地钱药材资源提供安全性保障。

1 仪器与材料

1.1 药材来源 拳卷地钱采集于广西南宁市高峰林场，经生药学专家韦松基教授教授鉴定为地钱科地钱属植物拳卷地钱（Marchantia convoluta Gao et Chang）。

1.2 农药标准品 α-六六六标准品、β-六六六标准品、γ-六六六标准品、δ-六六六标准品、P-P-滴滴涕标准品、P-P-滴滴滴标准品、P-P-滴滴伊标准品、O-P-滴滴涕标准品、纯度≥99.99%；

1.3 试剂 石油醚、苯、丙酮、乙酸乙酯、无水硫酸钠、正己烷等试剂均为分析纯；40g/L氯化钠水溶液；弗罗里硅土：层析用，于620℃灼烧4 h后备用，用前140℃烘2 h，趁热加5%水灭活。

1.4 仪器 气相色谱仪（ECD检测器）；旋转蒸发仪；电动振荡器；高速离心机；200 g小型粉碎机；组织捣碎机；10μL微量注射器：髙速分散器；硅镁吸附剂预处理小柱。

2 方法与结果

2.1 有机氯农药多种残留量的测定

2.1.1 试样制备 取所采集的干燥拳卷地钱经粉碎机粉碎，过20目筛制成试样。

2.1.2 提取 称取10g试样（精确到0.00lg），加入100mL三角瓶，加入20mL石油醚，于振荡器上振摇0.5h。净化：①层析柱的制备：玻璃层析柱中先加入1 cm高无水硫酸钠，再加入5g 5%水脱活弗罗里硅土，最后加入1 cm高无水硫酸钠，轻轻敲实，用20 mL石油醚淋洗净化柱。②净化与浓缩：吸取试样2mL，用100mL石油醚-乙酸乙酯（95∶5）洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近干，石油醚少量多次溶解残渣，定容至1.0mL，供气相色谱分析。

2.1.3 测定

2.1.3.1 气相色谱参考条件 色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25 mm（内径）×15m；气体流速：氮气40mL/min，尾吹气60mL/min，分流比1∶[KG-*3/5]50；温度：180℃升至230℃，30 min；检测器、进样口温度250℃。

2.1.3.2 色谱分析 吸取1μL试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰高。再吸取1μL混合标准使用液进样，记录色谱峰的保留时间和峰高。根据组分在色谱上的出峰时间与标准组分比较定性；用外标法与标准组分比较定量。

2.2 五氯硝基苯残留量的测定

2.2.1 标准品制备 五氯硝基苯标准贮备液和中间液：准确称取五氯硝基苯0.0100g，用正己烷溶解，100mL容量瓶定容，浓度为100μg/mL；供试液，稀释100倍，标准中间液浓度：1μg/mL。五氯硝基苯标准使用液：取中间液配制成：0.005、0.010、0.050、0.100、0.150μg/mL系列标准使用液。载体：Chromsorb W AW 80～100目。固定液：OV-17 和 QF-1。

2.2.2 提取 称取经粉碎过40目筛的试样5.0g置于50mL离心管中，加20 mL正己烷，高速分散器 （10000 r/min）分散4min，离心（2000 r/min）5min，将提取液移入25mL容最瓶中，向离心管中加5mL正己炫，按上法再提取一遍，将提取液合并，定容至25.0mL。

2.2.3 净化预处理 柱的净化：1mL丙酮-正己烷（1+9）分两次淋洗，再用1mL正己烷淋洗。将提取液5mL过柱，K-D浓缩器集于液体收，丙酮-正己烷（1+9）3mL淋洗，淋洗液并入上述K-D浓缩器，吹氮气浓缩至1mL，备用。

2.2.4 气相色谱参考条件 进样口温度：23℃；检测器温度：230℃；柱箱温度：190℃；载气（N2）流速：50 mL/min；色谱柱：内径3 mm，柱长1.5 m，玻璃柱，内装涂以1.5%OV-17+2%QF-l固定液，载体为80～100目Chromsorb W AW。

2.2.5 测定 五氯硝基苯标准使用液、试样各1μL注入气相色谱仪，测定，计算五氯硝基苯的含量。检测结果见表1。

3 讨论

由于农药品种繁多，性质各异，近几年其检测技术主要是色谱法，其中以气相色谱应用最为广泛。该法检测灵敏度高、简便快捷、分离效果好，可作为拳卷地钱农残安全限量监测及质量控制的有效手段。笔者采用气相色谱法对9种有机氯进行测定，结果为总六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC之和）未检出；总滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT 之和）未检出；五氯硝基苯未检出。参考《中国药典》收载的人参、西洋参药材及其饮片品种项下“农药残留量”“检查限度”含总六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC之和）不得过0.2 mg /kg；总滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT 之和）不得过0.2 mg /kg；五氯硝基苯不得过0.1 mg /kg，可见9种有机氯农残检出结果均合格。

拳卷地钱采于广西南宁高峰林场，为南宁市近郊，但其为野生药材，与农作物交集较少，生长在较天然环境下，故农残含量结果未检出说明其生长环境农药污染不明显。

参考文献

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