3个平菇品种摇瓶培养对比

孙玉禄

摘要：利用摇瓶培养的方式，根据菌丝生物量、溶液pH和培养液中还原糖质量分数筛选3个平菇品种进行液体培养的可行性。结果显示：平8633菌丝生物量最大，菌球均匀，适应性较强，更适合用液体方式制作菌种。

关键词：平菇；摇瓶培养；菌丝生物量；还原糖

中图分类号：S646.1 文献标志码：A 文章编号：1001-1463（2018）05-0031-02

doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2018.05.010

Study on Physiological Index Related with Pea Powdery Mildew

Resistance Induced by Erysiphe pisi

LU Jianying

（Gansu Academy of Agricultural Sciences，Gansu Lanzhou 730070）

Abstract：Taking eight different resistance to powdery mildew of pea varieties as the research object， we studied the relevant defence system changes of enzyme activity（SOD， POD， CAT）， chlorophyll content change rule between different varieties and different time after induced by Erysiphe pisi. The results showed that SOD activity were reduced after the first rise after infected as time change， SOD activity of resistant varieties were higher than susceptible cultivars； as time changePOD activity showed a trend of rising， POD activity of resistant varieties were higher than susceptible cultivars after infected； as time change CAT activity of most varieties were reduced after the first increase after infected； All varieties of chlorophyll content decreased after infected， which of resistantvarieties decline less than susceptible cultivars.SOD， POD activity change between varieties were significant difference. The ability of resistance to Powdery mildew of a pea variety is positively correlated with the activity of POD and the content of Chlorophyll.

Key words：Pea；Powdery mildew；Disease resistance；Defense enzyme；SOD；POD；CAT；Chlorophyll

平菇（Pleurtus ostrestus），别称侧耳，属担子菌亚门、伞菌目、口蘑科、侧耳属，是我国栽培最广泛的食用菌之一，营养丰富，肉质细嫩，味道鲜美，具有较高的营养价值，是我国食用菌的主导品种。我国对平菇的栽培始于20世纪的70年代[1 ]，随着食用菌生产机械化程度的提高，食用菌行业也逐渐步入了产业化、专业化、工厂化大规模生产的模式。液体菌种具有培养时间短、接种方便等优点，是食用菌制种产业的发展趋势。目前关于开展平菇菌种液体培养的技术报道有很 多[2 ]，但尚未出现可完全替代固体菌种进行平菇栽培的成熟技术。鉴此，我们利用摇瓶培养的方式，根据菌丝生物量、溶液pH和培养液中还原糖质量分数筛选3个平菇品种（平菇615、平2002-4、平8633）液体培养的可行性，以期为平菇液体菌种工厂化生产过程控制提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌种 平菇615、平2002-4、平8633，由辽宁省微生物科学研究院提供。

1.1.2 培养基 斜面培养基为PDA培养基；摇瓶培养基配方为：马铃薯20%、葡萄糖2%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B110 mg、水1 000 mL。

1.2 斜面菌種的活化

将菌种接于PDA斜面培养基上，于25 ℃恒温培养，长满斜面时作为摇瓶培养的一级菌种。

1.3 摇瓶菌种的制作与培养

用250 mL三角瓶，培养基装量50 mL，于121 ℃、0.12 kPa压力下灭菌30 min、冷却后每瓶接入 1 cm2大小的斜面菌种，置黑暗处培养24 h。菌块萌发后上摇床培养8 d，转速178 r/min，培养温度25 ℃，每天取1瓶检测各项指标[3 ]。

1.4 指标测定

1.4.1 菌丝生物量 将三角瓶置于白色背景下观察菌球大小、数量、均匀度，然后将溶液置离心机上离心10 min，转速3 000 r/min。置恒重过的定性滤纸上过滤，再置60 ℃烘箱烘干至恒重，计算干重。

1.4.2 pH 用pH计测量。

1.4.3 还原糖 采用3，5-二硝基水杨酸法[4 ]测定。

2 结果与分析

试验过程中观察发现，平615菌球生长较快，在第2天即可多点萌生。但菌丝生物量最低；平2002-4菌球大小不一，且培养至第5天时，培养液稍显浑浊；平8633菌球较均匀，生物量最高。从图1可以看出，培养前2 d，菌丝生长缓慢，第3～6 天快速增长，随着培养液中营养的消耗，菌丝生长速度开始下降。

整个过程中，溶液的pH一直呈增大趋势，可能是由于菌丝分解培养液产生部分碱性物质和后期菌球自溶产生碱性物质有关，使培养液的pH略微升高（图2）。还原糖质量分数于试验前3 d快速增加，第5、6天又几乎回落到初始水平（图3）。说明第6天以后，培养液中的营养利用已接近尾声，继续培养，会增加菌丝的自溶。

3 小结与讨论

试验表明，就供试的3个平菇品种来说，同等条件下，平8633适应性较强，更适合液体方式制作菌种。若计划大规模液体菌种栽培，还需要做后期的栽培出菇对比试验，进一步验证菌种的适应性。

平菇液体发酵培养，可以通过条件的摸索，找到不同品种的最适液体培养条件。平菇固体制种从母种到原种，再到栽培种，至少需要60 d左右。而液态深层发酵培养平菇菌种，则可快速生产菌丝体，缩短生产时间和成本。液态发酵食用菌菌种，不仅可以快速生产优质食用菌，还可以进一步利用液态发酵的食用菌蛋白质，改善食用菌生产对木屑等原料的粗犷利用和对大自然的破坏。从投资收入与产出的角度来看，建议使用液体深层发酵的方法生产平菇，这样既可节省成本和时间，又可以获得较高的投资收益。

参考文献：

[1] 张金霞，陈 强，黄晨阳，等. 食用菌产业发展历史、现状与趋势[J]. 菌物学报，2015，34（4）：525-540.

[2] 王 芳，张玉萍，孟丽君. 平菇液体菌种培养条件的研究[J]. 食用菌，2008（6）：21-22.

[3] 贺晓龙，任桂梅，王雪峰，等. 平菇液體培养检测指标变化的研究[J]. 江苏农业科学，2013，41（3）：208-209.

[4] 王兰青，高玉千，戚元成，等. 平菇液体菌种摇瓶和发酵罐生长动力学模型的比较[J]. 食品与生物技术学报，2010，29（6）：927-930.

（本文责编： 刘 赟）