紫外分光光度法测定野生酸枣中维生素C的含量

李小梅， 章 斌， 叶群丽

(雅安职业技术学院，四川 雅安 625000)

引 言

酸枣又名山枣、野枣、五眼果、棘刺，为鼠李科枣属植物，是广泛分布于我国各省多个地区的野生药用植物。酸枣仁是酸枣中重要的药用部位，有宁心安神、养肝、敛汗之功效，常用来治疗焦虑失眠、心肝血虚之心悸等病症[1-3]。果实为核果，为圆形和椭圆形，气味酸甜。酸枣具有抗氧化、抗衰老、养颜益寿的作用，常饮用酸枣汁可以改善肤色，利于健康[4]。因此，野生酸枣是一种重要的资源，具有较大的开发利用空间。维生素C作为人体必需的维生素之一具有良好的抗氧化性，能够清除自由基延缓衰老[5]。维生素C是酸枣中重要的组成成分，故研究酸枣中维生素C的含量具有重要意义。本实验采用紫外分光光度法对酸枣中果肉、种仁以及红心猕猴桃和冬枣中的维生素C含量进行了测定比较，为综合开发野生酸枣资源奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂、材料和仪器

试剂：2%草酸溶液；维生素C标准品，Solarbio公司；100 μg/mL维生素C标准溶液(现配制)；蒸馏水；

材料：野生酸枣(采于雅安市雨城区金凤寺山上)、红心猕猴桃(产自雅安市名山县)、冬枣(采购于雅安市雨城区农贸市场)。

仪器：ME204E型电子天平，梅特勒-托利多有限公司； FS-200g中药粉碎机，成都汉正科技有限公司； KDC-1044离心机，安徽中科中佳科学仪器有限公司； 752型紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 VC标准储备液(100 μg/mL)的配制

准确称取0.050 4 g VC对照品置于小烧杯中，用2%的草酸溶液溶解，转移到500 mL容量瓶中，稀释定容得100 μg/mL的VC标准储备液。使用前用2%的草酸溶液稀释至10 μg/mL标准使用液。

1.2.2 标准曲线的绘制

在6个50 mL容量瓶中，准确移取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL 10 μg/mL VC标准使用液，用2%草酸溶液稀释定容，摇匀。在波长265 nm处，以2%草酸溶液作参比，测定吸光度。以VC标准溶液的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

1.2.3 样品溶液的配制

依次用自来水、蒸馏水将酸枣、红心猕猴桃和冬枣清洗干净，自然风干，精确称取果肉部分10 g。放入研钵中研磨出汁液，用纱布包裹挤压，得VC原液。转入50 mL容量瓶，用2%草酸溶液稀释定容至刻度。使用前根据VC含量高低分别进行不同倍数的稀释，待用。

将酸枣果肉去除，挑选出颗粒饱满的酸枣仁洗净，自然风干，用粉碎机粉碎后，过60目(250μm)筛子，精确称取酸枣仁粉末10 g，置于50 mL容量瓶中，用2%草酸稀释定容至刻度，在4 ℃温度下超声20 min，离心10 min，取上清液待用。

备注：酸枣果肉稀释1 000倍，红心猕猴桃和冬枣稀释500倍，酸枣仁稀释20倍。

1.3 样品溶液中VC含量的测定

将样品溶液分别装入比色皿，在265 nm波长下，平行3次测定每个样品溶液的吸光度，取算术平均值作为测定结果。根据线性方程计算出样品溶液中VC的质量浓度(μg/mL)，再按照公式(1)计算出样品中VC含量(mg/100 g)。

(1)

式中：由线性方程计算出样品溶液中所含VC的质量浓度(μg/mL)；V总为定容后样品溶液的体积，本实验为 50 mL；M总为样品的质量，本实验为10 g;n为稀释倍数。

2 结果与讨论

2.1 最大吸收波长的确定

以2%草酸溶液为参比，取一定量的VC标准液，在200 nm～350 nm范围内对其进行光谱扫描，结果如图1所示。由图1可知λmax=265 nm。

图1 维生素C溶液的吸收曲线

2.2 标准曲线绘制

根据表1所得数据，绘制标准曲线见图2。线性方程为：y=0.373 2x+0.005 6，R2=0.999 1。

结果显示，在质量浓度为0 μg/mL～2 μg/mL，VC标准溶液的吸光度与质量浓度之间具有良好的线性关系。

表1 标准溶液吸光度与VC浓度

2.3 样品溶液吸光度测定及VC含量计算

根据样品溶液的吸光度计算出样品溶液的质量浓度，再将所得质量浓度带入公式计算出样品中VC含量,结果见表2。

图2 VC溶液的标准曲线

表2 样品溶液吸光度与VC含量

3 结论

实验结果表明,酸枣果肉中VC含量远大于冬枣和红心猕猴桃，为人们日常合理营养获得VC提供了另一种选择。酸枣中VC成分主要在果肉部分，不在酸枣仁。目前,酸枣仁被广泛应用在临床上，而酸枣果肉作为加工酸枣仁的副产物，往往被扔掉，开发利用不够，造成了较大的资源浪费，应加强对酸枣果肉的分析研究。