HPLC法测定饮料中6种邻苯二甲酸酯类塑化剂

□ 李 雪 怀化市食品药品检验所

近年来食品安全已经成为了我国居民高度关注的问题，但是受到制作工艺的限制，以及不法分子在利欲熏心的欲望促使下，在饮料的生产、包装、存贮过程中造成邻苯二甲酸酯类塑化剂的污染[1]。邻苯二甲酸酯类也被称为钛酸酯，工业上主要利用其来提高塑料制品的韧性和可塑性，从而软化产品；目前多应用于清洁剂、食品包装材料、个人护理材料以及玩具等。目前大部分的饮料都使用塑料瓶进行存储，因此在装瓶、存贮过程中难免会造成邻苯二甲酸酯类的污染[2]。邻苯二甲酸酯类具有类似雌激素作用，不仅会造成机体内环境的紊乱，还会导致机体出现较为严重的致癌、致畸以及致突变[3]。本研究利用高效液相色谱法（HPLC）饮料中的邻苯二甲酸酯类进行检测，现将结果和分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

日本岛津LC-20AT液相色谱仪，及其配套的脱气机、四元泵、DAD检测器和柱温箱、自动进样器以及Milli-Q型纯水机；采用天津科贝尔Model9960B超声波清洗器；日本岛津ux2200HW/OAC型分析天平；Abel固相萃取装置以及固相萃取柱（HLB/ODS/Bond Elut，200 mg，3 mL）。

试剂以及标准品：美国Accu Standard公司生产的邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二己酯（DHXP）、邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯（DMEP）、邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（BMPP）、邻苯二甲酸二丙酯（DPRP）各100 mg。色谱纯的甲醇、乙腈溶液，以及电阻值为18.2 MΩ·cm的超纯水。

1.2 标准溶液

精确称取100 mg邻苯二甲酸酯溶于甲醇并定容至50 mL，浓度为2.0 mg/mL。再分别吸取上述6种标准邻苯二甲酸酯类标准液，并相应地配制成 0、10、20、40、80、100 mg/L标准使用液，同样用甲醇定容。

1.3 样品处理

视饮料样品类型而定，如含有果肉、纤维或较大颗粒的果汁类饮料则使用双层滤纸进行过滤，并取滤液进行浸提实验；如为蛋白质饮料则吸取10 mL并用10%乙酸锌进行蛋白沉淀后再过滤。

1.4 色谱条件

色 谱 柱：Phenomenex C18柱，5 μm，250 mm×4.60 mm。选择乙腈-水作为流动相并进行梯度洗脱，程序如下：0～3 min乙腈-水（V/V，25∶75），3～4 min将乙腈由30%升至35%，4～7 min升至40%，7～15 min升至70%并维持8 min，23～30 min再升至90%并维持10 min，40～50 min升 至100%，50～60 min乙腈浓度则由100%降至25%。检测器：二极管阵列检测器，波长230 nm，柱温40 ℃，流速为1.0 mL/min，进样量 10 μL。

2 结果

2.1 标准曲线、检出限及图谱

将标准溶液按照本研究的1.4条件进行测定，并以此获得标准曲线和相关系数，结果显示相关系数均＞0.990，检出限为0.094～0.241 μg/mL。见表1。饮料中6种邻苯二甲酸酯类塑化剂的检测图谱如图1所示。

2.2 样品检测结果

按照本研究方法，对市面随机抽样送检的6类不同类型的饮料制品，共挑选10个批次进行测定。结果显示仅奶制品饮料和果汁饮料中出现DEHP，其他邻苯二甲酸酯类物质均未被检出。具体见表2。

表1 饮料中6种邻苯二甲酸酯类塑化剂的标准曲线以及检出限

图1 饮料中6种邻苯二甲酸酯类塑化剂的检测图谱

表2 样品饮料中6种邻苯二甲酸酯类塑化剂检测结果（g/kg）

表3 HPLC法的回收率和精确度

2.3 加样回收率和精确度

精确称取不含有被检测的6种邻苯二甲酸酯类塑化剂样品各0.1 g，分布加入到高、中、低三种不同浓度标准混合溶液中，按照本研究所采用的方法进行测定，结果显示本研究的平均回收率为93.65%～104.89%，相对标准偏差为0.85%～5.22%。具体见表3。

3 讨论

本研究中对邻苯二甲酸酯类在190～400 nm进行扫描，结果显示230 nm处最为显著[4]；而在流动相的选择上无论是纯甲醇、纯水或纯乙腈等皆不能将邻苯二甲酸酯类进行有效分离，故本研究选择乙腈和水进行梯度洗脱，并且在洗脱过程水分逐渐减少因此有利于邻苯二甲酸酯类的分离。

综上所述，在检测饮料类物品中邻苯二甲酸酯类塑化剂时，高效液相色谱法具有高灵敏度和准确性，而且操作便捷且耗时短，因此值得广泛应用。