冷应激对雏鹌鹑胸腺组织抗氧化功能的影响

刘春朋，付 晶*

（1.仲恺农业工程学院动物科技学院，广州 510225；2.广东省水禽健康养殖重点实验室，广州 510225）

温度应激是制约畜牧生产的一个主要因素，尤其是在北方地区，冷应激是一个影响畜禽健康的普遍应激源。冷应激可以引起畜禽尤其是幼畜或仔畜的能量代谢紊乱、免疫机能下降、抗氧化功能受损、生产性能下降甚至死亡[1]。鹌鹑代谢旺盛，繁殖周期短，是一种高产高效的特禽，但其生物学特性比较特殊，鹌鹑在饲养过程中对环境温度的要求是相对严格的，尤其是育雏期的温度要比鸡高，因此更容易受到冷应激的影响[2]。

胸腺是禽类免疫系统中重要的淋巴器官，参与细胞免疫的过程，是T细胞分化、发育、产生的场所，在整个免疫系统中起着中枢作用。胸腺如果受到损失，则会引起机体免疫机能发生障碍[3]。已有研究表明，热应激可以引起雏鸡胸腺组织形态损伤，发生细胞凋亡[4]。此外也有研究表明，冷应激可以引起畜禽机体发生氧化应激损伤[5]。而目前关于冷应激对雏鹌鹑胸腺组织抗氧化功能的影响未见报道。因此，文章研究以1日龄雏鹌鹑为研究对象，通过对雏鹌鹑胸腺组织抗氧化能力的检测，探讨冷应激导致禽类免疫功能下降的作用机制，以期为更好地研究鹌鹑内环境打下基础，也为探索促进禽类冷适应的方法，提高禽类的抗寒能力提供理论依据。

1 试验材料

1.1 试验动物

1日龄健康沙维玛特肉用公鹌鹑360只，购自哈尔滨万家特禽养殖合作社。

1.2 主要试剂

考马斯亮蓝、MDA含量检测试剂盒、SOD活性检测试剂盒、GSH-Px活性检测试剂盒，均购自南京建成生物工程研究所。

1.3 主要仪器

日立研究型双光束紫外可见分光光度计（型号为U-3900&3900H），购自仪德科学仪器有限公司。

2 方法

2.1 冷应激模型的建立

2.1.1 急性冷应激试验

急性冷应激试验将180只1日龄沙威玛特肉用鹌鹑饲养至15日龄，随机分为6组，每组30只。对照组冷应激0 h（即放在鹌鹑正常育雏期所需温度34±1℃的舍内饲养），其余5组分别进行冷应激处理，即把鹌鹑置于（12±1）℃的舍内饲养，饲养时间分别为0.5、1、3、6、12 h。在各时间随机选取10只进行剖杀，并采集法氏囊组织用于后续实验。

2.1.2 慢性冷应激试验

慢性冷应激试验将180只1日龄沙威玛特肉用鹌鹑饲养至15日龄，随机分为6组，每组30只。前3组为对照组，即正常温度下分别饲养5、10、20 d后剖杀；其余3组为应激组，分别于（12±1）℃冷应激环境下饲养5、10、20 d后剖杀取样。

整个试验过程中，各组雏鹌鹑均自由饮水和采食，并按常规免疫程序进行免疫。

2.2 胸腺组织抗氧化功能的检测

按照各试剂盒说明书进行操作，并在相应的波长处用紫外分光光度计进行读数。用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量；用黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性；用DTNB显色法检测GSH-Px活性；用硫代巴比妥酸法检测MDA含量。

2.3 统计分析

试验数据采用SPSS 20.0软件One Way ANOVA进行统计分析，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

3 结果与分析

3.1 急性冷应激时胸腺组织抗氧化能力的变化

急性冷应激时胸腺组织抗氧化能力的变化见图1A～1C。

图1 急性冷应激对胸腺组织抗氧化能力的影响

由图1A可知，急性冷应激时胸腺组织中GSHPx活性呈波动性变化，与对照组相比，冷应激0.5、1、3 h时，胸腺组织中GSH-Px活性显著增加（P＜0.05），6和12 h时GSH-Px的活性显著下降（P＜0.05）。由图1B可知，急性冷应激时胸腺组织SOD的活性随着冷应激时间的延长呈下降趋势，与对照组相比，各时间点均显著下降（P＜0.05）。由图1C可知，急性冷应激导致胸腺组织中MDA含量呈上升趋势，与对照组相比，除0.5 h以外，其他各时间MDA含量均显著升高（P＜0.05）。

3.2 慢性冷应激时胸腺组织抗氧化能力的变化

慢性冷应激时胸腺组织抗氧化能力的变化见图2A～2C。

图2 慢性冷应激对胸腺组织抗氧化能力的影响

由图2A和2B可知，慢性冷应激导致胸腺组织中GSH-Px和SOD活性呈下降趋势，且具有时间效应。在5、10、20 d时GSH-Px和SOD活性均显著低于对应的对照组（P＜0.05）；由图2C可以看出，MDA含量随着冷应激时间的延长而呈上升趋势，在5、10、20 d时MDA含量均显著高于对应的对照组（P＜0.05）。