北柴胡显微特征中分泌组织类型的探究

蔺明煊，肖瑶，石晋丽，何帅，姜亦南

(北京中医药大学中药学院，北京 100029)

柴胡来源于伞形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡BupleurumscorzonerifoliumWilld.的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”和“南柴胡”。具有疏散退热，疏肝解郁，升举阳气的功效。常用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子宫脱垂，脱肛等[1]。关于柴胡的显微特征，各教材对北柴胡皮层及韧皮部中分泌组织的描述存在争议。为了考察北柴胡的分泌组织类型究竟是油室(分泌腔)还是油管(分泌道)，本研究制作并观察了北柴胡的横切石蜡切片、纵切石蜡切片和粉末临时装片，以期对上述问题进行探究，并准确描述北柴胡的显微特征，为柴胡的显微鉴别提供依据。

1 材料

1.1 药材

北柴胡饮片购自北京双桥燕京中药饮片厂，经北京中医药大学中药学院石晋丽教授鉴定为伞形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.的干燥根。

1.2 仪器

水循环真空泵(SHZ-III型，郑州狮鼎仪器厂)；生物制片快速处理仪(SQKC-III型，航空航天部兰州飞控仪器总厂)；WGP-300隔水式电热恒温培养箱(重庆四达试验仪器厂医疗仪器厂)；YL3回转式切片机(上海仪表厂)；恒温摊片烤片机(TK-218型，湖北泰维医疗有限公司)；珊顿E型冰冻切片机(Thermo公司)；OlympusBX51显微镜(Olympus公司)；FW200高速粉碎机(北京科伟永兴仪器有限公司)。

1.3 试剂

乙醇、二甲苯(均为分析纯，北京化工厂)；液体石蜡、石蜡(北京华威锐科化工有限公司)；番红:固绿(1∶1)混合染色液(谷歌生物)；加拿大树胶(源叶生物)；水合氯醛；稀甘油。

2 方法

2.1 横切面及纵切面显微观察

采用石蜡切片法制备药材的显微永久装片。选取较完整的北柴胡饮片20个，用水充分浸软后切成小段，放入试管中，加水浸没，真空泵抽气，抽至材料沉底为止。再用不同浓度乙醇溶液梯度脱水，乙醇-二甲苯梯度溶液透明，用石蜡缓慢替换二甲苯，在纯石蜡中浸蜡，包埋，切片，展片，烘片，再以乙醇-二甲苯梯度脱蜡，番红-固绿混合染色液染色，以乙醇-二甲苯梯度洗去浮色后用光学树胶封片[2]。共制作北柴胡横切石蜡切片20余张，纵切石蜡切片20余张。在显微镜下观察横切片及纵切片分泌组织特征并照相。

2.2 粉末的显微观察

采用粉末制片法制备药材的显微临时装片，制作并观察13片。将北柴胡药材打粉，过四号筛(65目)，取少许粉末置于载玻片上，滴加水合氯醛1～2滴，于酒精灯上加热透化，冷却后滴加少许稀甘油，盖上盖玻片[3]。

3 结果

3.1 北柴胡横切面显微特征

①木栓细胞7～8列，皮层狭窄。②皮层及韧皮部有油管(油室)散在或呈断续环状，部分内含油状物。③形成层成环。④木质部占大部分，大型导管切向排列，木纤维发达，排成1至数个断续环状(见图1)。

在横切面显微图中无法断定散在皮层及韧皮部中的分泌组织是油室还是油管。

图1 北柴胡横切面图1.木栓层;2.皮层;3.油管(室);4.韧皮部;5.形成层;6.木质部;7.木纤维

3.2 北柴胡纵切面显微特征

①木栓层3～5列。②皮层狭窄，有少数类圆形油室散在，部分油室内含油状物，油室直径20～70 μm不等、周围分泌细胞多数。见图2。③韧皮部含多数油管间隔排列，内含条形油状分泌物。④木质部导管间隔排列，木纤维发达。见图3。

图2 北柴胡纵切面油室显微特征图

图3 北柴胡纵切面图1.木栓层;2.皮层;3.油管;4.韧皮部;5.木质部;6.油室

3.3 北柴胡粉末显微特征

粉末灰棕色。①油管居多，呈碎片状，管道中含黄棕色条状分泌物。②油室及其碎片少见，内含油滴状分泌物。见图4。③木纤维成束或散在，无色或淡黄色，呈长梭形，纹孔稀疏，纹孔沟隐约可见。④导管多为网纹、双螺纹。⑤木栓细胞黄棕色，常数层重叠，表面观呈类多角形，壁稍厚。

图4 北柴胡粉末油室及油管显微特征图A.油管;B.油室

4 讨论

关于柴胡的显微特征，《中国药典》2015年版中柴胡鉴别项下未规定[1]，各教材对北柴胡皮层及韧皮部中分泌组织的描述存在争议。

《生药学》[4]中关于北柴胡的横切面及粉末显微特征只描述了油室，并未提及油管，且油室位于栓内层和韧皮部，记载如下：横切面“栓内层窄，有油室7～11个，类圆形，周围分泌细胞6～8个。韧皮部油室较小。”粉末“油室碎片含黄棕色条状分泌物，周围薄壁细胞大多皱缩”。中国中医药出版社2012年出版的第9版《中药鉴定学》[5]中北柴胡显微特征只描述了油管，未提及油室，且油管在皮层和韧皮部中都有，记载为：横切面“皮层散有油管及裂隙……韧皮部有油管”；粉末“油管多碎裂，管道中含黄棕色或黄绿色条状分泌物，周围薄壁细胞大多皱缩”。中国医药科技出版社2004年出版的《中药鉴定学》[6]描述与中国中医药出版社第9版《中药鉴定学》相同。中国医药科技出版社2015年出版的第3版《生药学》[7]中北柴胡的横切面显微特征与粉末特征描述不一致，横切面显微特征只描述了油室，与人民卫生出版社2016年版相同，而粉末特征却仅描述了油管。中国中医药出版社2017年出版的第10版《生药学》[8]中对北柴胡分泌组织的特征描述，油管和油室均有涉及，“横切面栓内层散有油室及裂隙，韧皮部有油管；粉末油管碎片有黄棕色不规则条状分泌物，周围细胞多皱缩，细胞界限不明显”。

北柴胡的显微特征，仅通过其横切面显微图很难看出分泌组织是油室还是油管，需通过纵切面显微图加以判断，粉末显微图加以验证。从本实验结果不难看出，北柴胡显微特征中的分泌组织，并非如某些教材中所述，横切面特征仅含有油室或者油管，而是既有油室(分泌腔)，又有油管(分泌道)。横切面特征的皮层中含有油室，韧皮部中含有油管；粉末特征显示两者均有，以油管居多。

综上所述，本文对现有《生药学》及《中药鉴定学》等教材中对北柴胡显微特征的描述进行了探究，明确了北柴胡显微特征中分泌组织的类型，准确描述了北柴胡的显微特征，为柴胡的显微鉴别提供了依据。