复方克林霉素磷酸酯凝胶的制备及质量控制

戴薇薇

摘 要：本实验研究复方克林霉素磷酸酯凝胶的制备方法并建立反相高效液相色谱法测定复方克林霉素磷酸酯凝胶中维A酸的含量。方法：采用Inertsil ODS-3液相色谱柱，甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5），检测波长为346nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。维A酸在5～25ug·mL-1范围内呈良好的线性关系。维A酸平均回收率为99.3%。结论：本制剂稳定、可靠，测定方法简便、准确。

关键词：乳膏；制备；测定

维A酸是体内维生素A的代谢中间产物，主要影响骨的生长和促进上皮细胞增生、分化、角质溶解等代谢作用。维A酸用于治疗寻常痤疮、银屑病、毛发红糠疹、毛囊角化病、鳞状细胞癌及黑色素瘤等疾病。复方克林霉素磷酸酯凝胶主要用于痤疮。本实验研究复方克林霉素磷酸酯凝胶的制备方法并建立反相高效液相色谱法测定复方克林霉素磷酸酯凝胶中维A酸的含量。

1 仪器与试药

1.1 仪器：百灵LA114型电子天平（常熟市百灵天平仪器有限公司）；长城狮鼎SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；美国泽拉布Super超越系列全触屏超纯水系统（上海和泰仪器有限公司）；青岛盛瀚色谱柱温箱（青岛盛瀚色谱技术有限公司）；CH3030CH3030超级恒温油槽（上海平轩科学仪器有限公司）；600220液相保护柱（天津琛航科苑科技发展有限公司）；兰博OV3000大容量柱温箱（天津市兰博实验仪器设备有限公司）；紫外分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）。

1.2 色谱柱：Inertsil ODS-3液相色谱柱（上海卓好实验室设备有限公司）。

1.3 对照品：维A酸 购自中国药品生物制品检定所。

1.4 试剂及辅料：磷酸氢二钠（上海玻尔化学试剂有限公司）、甲醇（上海玻尔化学试剂有限公司）、冰醋酸（上海玻爾化学试剂有限公司）、乙腈（上海玻尔化学试剂有限公司）、三乙胺（上海玻尔化学试剂有限公司）、磷酸（上海玻尔化学试剂有限公司）。三乙醇胺（陕西圣瑞医药科技有限公司）、甘油（陕西圣瑞医药科技有限公司）、维A酸（陕西圣瑞医药科技有限公司）、维生素E（江苏科鼐生物制品有限公司）。

2 制备方法

2.1 处方

克林霉素磷酸酯、三乙醇胺、甘油、维A酸、维生素E等。

2.2 制备

复方克林霉素磷酸酯凝胶的制备：取克林霉素磷酸酯和维A酸溶解后，加三乙醇胺、甘油、维生素E等混合均匀，分装，即得。

3 质量控制

3.1 性状

本品为微黄色透明半固体凝胶。符合《中国药典》2015年版对凝胶的要求。

3.2 含量测定

3.2.1 流动相的选择

分别考察甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；0.01mol/L磷酸氢二钠-磷酸缓冲液（pH=2.2）-水（80：20）；甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；乙腈-水（体积比为65∶35）；甲醇-水（80：20，含0.1%三乙胺）；乙腈-0.2%（质量分数）磷酸（体积比25：75）；0.01mol/L磷酸氢二钠-磷酸缓冲液（pH=2.2）-水（50：50）不同比例的流动相，结果以甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）为流动相。

依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-7]。流动相：甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5），检测波长：346nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按维A酸峰计算应不得低于2000。

3.2.2 对照品溶液的制备

精密称取维A酸对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含10ug的溶液，即得。

3.2.3 供试品溶液的制备

取适量供试品精密称定，置具小烧杯中，精密加入异丙醇10mL，用甲醇转移至50ml容量瓶中并稀释定容，超声处理5分钟，放冷，滤过。取续滤液，即得。

3.2.4 专属性试验

依照处方取克林霉素磷酸酯、三乙醇胺、甘油、维生素E等，按样品制备工艺制成阴性对照样品，依上述方法测定，结果在维A酸出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

3.2.5 精密度试验

精密称取维A酸对照品适量，加甲醇使溶解，制成浓度为10ug·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.91%，表明本方法精密度良好。

3.2.6 对照品的线性考察

精密称取维A酸对照品5mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1、2、3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.2.2项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，维A酸在5～25μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

3.3 微生物限度检查

按照《中国药典》2015年版附录所载方法测定，结果符合规定。

4 讨论

近来凝胶剂引起了药学人员的极大关注，其使药物缓慢释放，具有长效、减低不良反应等优点。凝胶制剂，前景十分广阔。本制剂稳定、可靠，符合中国药典相关规定。测定复方克林霉素磷酸酯凝胶三批样品中维A酸的含量，分别为标示量的百分之九十八点九、百分之九十九点八、百分之一百点一。

参考文献

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