雷贝拉唑钠对Beagle犬脏器毒性的研究

赵蕾，韩雪莲，许德义，卜晓东，沈传陆

(东南大学医学院 药理学系，江苏 南京 210009)

1 材料和方法

1.1 动物

1.2 药品和试剂

注射用雷贝拉唑钠，白色粉末(南京海光应用化学研究所与扬州奥赛康药业有限公司)；0.9%氯化钠注射液(南京小营制药有限公司)。用0.9%氯化钠注射液将雷贝拉唑钠配制成2.5%、0.5%和0.1%雷贝拉唑钠氯化钠注射液，消毒灭菌处理，不含防腐剂等其他成分，注射液每周配制1次。

1.3 实验分组

本实验设静脉注射雷贝拉唑钠高(25 mg·kg-1·d-1)、中(5 mg·kg-1·d-1)、低(1 mg·kg-1·d-1)3个剂量组和等体积生理盐水对照组，每组Beagle犬雌雄各3只。前肢头静脉注射给药4周，给药体积1 ml·kg-1。观察各组Beagle犬的生命体征、体质量变化和饮食饮水情况，检测血细胞及血生化改变，行尿常规检测，给药结束后动物麻醉、放血、解剖取脏器，测定内脏质量以及标本送组织病理学检查。

1.4 统计学处理

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量数据描述用均数±标准差，两组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 毒性症状

雷贝拉唑钠25 mg·kg-1·d-1高剂量组注射药物过程中雌雄犬均出现挣扎，注射结束后犬立即出现恶心呕吐症状；回笼后2 h内侧卧，四肢肌张力下降，活动减少，反应迟钝；给药次日起可见雌雄犬出现流涎症状，给药2周后进食量减少，粪便松散、不成形，可见眼结膜广泛充血，瞳孔未见明显缩小，无结膜溃疡，且上述症状持续到给药结束。静脉注射雷贝拉唑钠5 mg·kg-1·d-1中剂量组，雌雄犬也出现短暂的肌张力下降，活动减少，但很快恢复，未见恶心呕吐症状；大便成形，无进食量减少现象，各犬出现结膜充血，但不及高剂量组明显。雷贝拉唑钠1 mg·kg-1·d-1低剂量组在注射过程中和注射后犬均未出现任何毒性症状。对照组与给药组犬在给药4周内未出现死亡，高剂量组雌雄犬在给药2周后进食量减少，但结合给药前与给药后每周称质量数据，雄犬体质量减低，但雌犬未见与给药有关的体质量改变。停药10 d后高剂量组雌雄犬结膜充血消失。各组犬给药前后心电图均未见异常。

2.2 血液、血生化和尿常规检查

雷贝拉唑钠给药各组和生理盐水对照组比较，低、中剂量组犬给药前后的血液学指标、血生化指标和尿常规检查均无明显差异。高剂量组雌雄犬的血液学指标红细胞[(5.86±1.27)×1012L-1]、白细胞[(7.3±2.7)×109L-1]和血小板[(290±37)×109L-1]计数较其他组减少，但差异无统计学意义。

2.3 脏器质量和脏器系数

肝、肾、肺等器官的脏器质量和系数，仅见雷贝拉唑钠高剂量组与对照组比较有显著差异。其中雌犬肾质量、雌雄犬肺质量和雄犬肾上腺质量增加，但脏器系数无显著差异。雷贝拉唑高剂量组雌犬肝脏质量与对照组雌犬比重94%，脏器系数大49%，雷贝拉唑高剂量组雄犬肝脏与对照组雄犬比重99.56%，脏器系数大97%。见表1、2。

2.4 组织病理学观察

镜下观察心、肝、脾、肺、肾、脑、食管、胃、小肠、大肠、垂体、脊髓、骨髓、淋巴结、膀胱、睾丸、附睾、子宫、卵巢、胸腺、肾上腺、视神经、甲状腺、甲状旁腺、唾液腺、胆囊、胰腺、气管、主动脉、前列腺、乳腺、坐骨神经、眼及给药局部等器官和组织。对照组与雷贝拉唑钠各剂量组组织病理学比较，仅有雷贝拉唑钠高剂量组雌雄犬可见甲状腺滤泡上皮呈扁平状，略有增生；可见不同程度的胃内腺体改变，腺体排列稀疏，壁细胞数量减少；其中有1雄犬小肠黏膜内出现小出血灶。其他器官和组织未见异常。见图1。

3 讨 论

本研究使用的注射用雷贝拉唑钠的剂量主要参考重复给药毒性实验技术指导原则[10]，结合实验室前期的雷贝拉唑钠急性毒性试验，依据5倍剂量的比值设定为1、5、25 mg·kg-1·d-1。

连续4周给予Beagle犬注射用雷贝拉唑钠后，低剂量组未发现任何毒性症状，重要实验室检查指标，如血、尿常规，心电图，血清生物化学，出凝血时间，脏器标本质量和系数以及组织病理学观察，与生理盐水对照组比较差异均无统计学意义，提示其为临床可用参考安全剂量。中剂量组出现短暂的肌张力下降，活动减少，并于给药2周后出现轻度的眼结膜充血，停药很快恢复，实验室检查、脏器标本巨检和组织病理学观察未发现异常。高剂量组在给药早期就出现流涎，行走无力、喜卧，恶心呕吐，大便稀软不成形，雄犬体质量逐渐降低，可能与药物引起犬食欲降低有关；血常规检查可见红细胞、白细胞和血小板减少，虽与其他组无显著性差异，亦提示用药中应注意检测血液学改变；脏器标本巨检可见肾、肺、肾上腺和肝质量以及肝脏器系数明显升高，虽未见组织病理学改变，亦提示脏器损害可能；甲状腺滤泡上皮呈扁平状，略有增生，胶质减少，胃内腺体排列疏松，壁细胞减少，提示注射高剂量雷贝拉唑钠损害的靶器官为甲状腺和胃腺体；因仅有1雄犬出现肠黏膜小出血灶，无法判断是否为药物毒性。

表1雌犬静脉注射雷贝拉唑钠25mg·kg-1·d-1对脏器质量及脏器系数的影响

脏 器脏器质量/g脏器系数对照组(n=3)高剂量组(n=3)对照组(n=3)高剂量组(n=3)心63.2±5.369.3±5.50.88±0.030.747±0.03脑76.9±3.974.8±8.71.08±0.070.802±0.08肝218±12.5423±53a3.06±0.284.56±0.37a肾34.1±1.340.7±3.3a0.48±0.040.439±0.019脾18.3±221.7±20.25±0.0120.234±0.012肺63.7±3.976.2±3a0.9±0.080.82±0.009肾上腺1±0.20.5±0.10.014±0.00.005 4±0.0胸腺5.7±0.36.7±10.079±0.0050.072±0.008卵巢1.37±0.262.07±0.50.05±0.030.022±0.005子宫1.70±0.261.78±0.050.023±0.001 60.019±0.002

与对照组比较，aP<0.05

表2雄犬静脉注射雷贝拉唑钠25mg·kg-1·d-1对脏器质量及脏器系数的影响

脏 器脏器质量/g脏器系数对照组(n=3)高剂量组(n=3)对照组(n=3)高剂量组(n=3)心63.8±3.666.7±3.40.736±0.050.73±0.01脑79.5±9.572.7±7.60.95±0.070.89±0.04肝230±13.6459±14.4a2.64±0.125.21±0.11a肾35.1±2.136.2±2.30.4±0.0140.41±0.03脾24±123.9±3.20.28±0.040.27±0.02肺73.1±3.688.9±9.5a0.84±0.051.0±0.09肾上腺0.96±0.111.4±0.05a0.010 1±0.0020.015±0.005胸腺8.8±6.77.4±1.150.10±0.030.08±0.01睾丸12.1±5.615.5±1.70.139±0.050.18±0.012附睾2.4±0.053.4±0.550.032±0.0060.038±0.005

与对照组比较，aP<0.05

图1对照组与雷贝拉唑钠高中低剂量组胃和甲状腺组织病理学的改变

综上所述，本实验依据4组Beagle犬4周连续用药，证实静脉注射25 mg·kg-1·d-1雷贝拉唑钠的临床毒性靶器官为甲状腺和胃腺体，无任何毒性症状和脏器损害的安全剂量为1 mg·kg-1·d-1。