血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白12与非酒精性脂肪性肝病相关性研究

沈德峰，张　磊，倪小英，傅聿明，庞东岳，苏长春，刘　婧

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD） 是最常见的慢性肝脏疾病之一［1］，NAFLD涵盖了不同阶段的肝脏疾病，从单纯性脂肪变性、脂肪性肝炎到纤维化和肝硬化［2］。NAFLD被广泛认为是代谢综合征的肝脏表现［3］。胰岛素抵抗、炎症、肝脏脂肪代谢紊乱是NAFLD重要的发病机制，而2型糖尿病和肥胖是其重要的危险因素［4］。

研究表明，众多脂肪因子与胰岛素抵抗相关性疾病关系密切，并参与了NAFLD的发生和发展［5］。脂肪因子补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白12（serum complement C1q/tumor necrosis factor related protein 12，CTRP12）属于CTRPs家族，具有胰岛素增敏和抗炎作用，并在肥胖和糖尿病小鼠血清和脂肪组织中水平下降［6］。此外，也有研究发现血清CTRP12在糖尿病患者中较对照组浓度下降［7］。该研究旨在测定NAFLD患者血清CTRP12水平，并探讨其与NAFLD患者临床代谢参数及胰岛素抵抗的关系。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2016年10月—2016年11月在兴化市人民医院体检中心通过彩色超声筛选出临床资料完整的NAFLD患者86例，其中男56例，女30例；年龄34～69岁；均符合2002年中华医学会肝脏病学分会《非酒精性脂肪性肝病诊断标准》。另选同期该医院健康体检者86例为对照组，男54例，女32例；年龄33～71岁。NAFLD入选者乙醇摄入男性每周<140 g，女性每周<70 g，并排除自身免疫性肝病、病毒性肝炎、药物及毒物引起的肝病。所有入选者均排除糖尿病、严重肝肾疾病、心力衰竭、恶性肿瘤、库欣综合征、急性感染等，无吸烟史。该研究通过医院伦理委员会批准，所有观察对象均签署知情同意书。

1.2研究方法

1.2.1体质参数的测定所有受试者均穿单衣单裤，脱鞋袜，测量腰围（WC）、臀围（HC），并计算腰臀比（WHR），WHR=WC/HC。测量身高体质量，并计算体质量指数 BMI。 BMI=体质量/身高2（kg/m2）；由体检中心护士测量3次血压取平均值，受试者测血压前静坐至少15 min。

1.2.2生化指标测定空腹至少10 h后，所有研究对象采集晨起静脉血15 ml，3000 r/min离心10 min后分离血清，部分存于-80℃冰箱待测定CTRP12（ELISA，Aviscera，Santa，USA）。 其余血清用于总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、空腹血糖（FBG）、血尿酸（UA）、空腹胰岛素 （FIns）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的测定。FIns采用化学发光法测定 （AIA-2000ST，TOSOH company，Japan）。

1.2.3稳态模型评估法测定胰岛素抵抗指数（HOMAIR）HOMA-IR=FIns（mIU/L）×FBG（mmol/L）/22.5。

1.3统计学处理采用SPSS 17统计软件，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。计数资料比较采用χ2检验，两组连续变量比较采用独立样本t检验。CTRP12与其他变量分别进行Spearman相关、多元线性逐步回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1临床代谢指标及血清CTRP12水平比较两组一般临床资料及血清CTRP12水平比较见表1。两组间年龄、性别、血压、TC、LDL-C无统计学差异，WC、BMI、WHR、HDL-C、UA、HOMA-IR、TC、FBG、CTRP12 差异有统计学意义（P＜0.01 或 P＜0.05）。

2.2IMT与临床指标的相关分析在NAFLD组中 Spearman相关分析显示，CTRP12与 WC （r=0.312，P＜0.01）、WHR（r=0.361，P＜0.01）、BMI （r=0.357，P＜0.01）、FBG （r=0.342，P＜0.01）、HOMA-IR（r=0.265，P＜0.01）、TG（r=0.242，P＜0.01）呈正相关，与其他指标相关性无统计学意义（表2）。

2.3多元线性逐步回归分析为明确CTRP12的独立相关因素，进一步以CTRP12作为因变量，以年龄、性别、血压、UA、FBG、血脂谱、HOMA-IR、BMI、WC、WHR等作为自变量，结果发现 FBG、BMI、WC是NAFLD患者血清CTRP12的独立影响因子（表 3）。

3　讨论

越来越多的证据表明，脂肪组织分泌的脂肪因子参与了能量代谢、炎症调节等病理生理过程。脂肪因子分泌调节的紊乱和肥胖相关性疾病关系极为密切，瘦素、脂联素、抵抗素等脂肪因子在糖尿病、代谢综合征、NAFLD等代谢性疾病中的作用已得到广泛认可［5］。CTRPs家族成员 CTRP1 和CTRP13已被证实参与了NAFLD的病理过程，血清CTRP1有可能成为 NAFLD 新的预测手段［8，9］。

表 1　两组一般资料的比较

表 1　两组一般资料的比较（续）

表 2　CTRP12与其他指标的相关性分析

表 3　CTRP12的独立影响因素

NAFLD病因复杂，研究较多的有“二次打击”学说、肥胖基因的多态性、炎症机制、胃肠微生物群体变化等［4］。在“二次打击”学说中，胰岛素抵抗所致的肝脏脂质代谢紊乱是NAFLD发病的始动因素。胰岛素抵抗时胰岛素对脂肪代谢的调节作用减弱，导致脂肪的脂解作用增强，释放游离脂肪酸（FFA）增多，致使循环中FFA增加，增多的FFA一方面通过血糖、血脂循环干扰肌肉组织对胰岛素的敏感性，另一方面通过其在肝脏的β氧化途径刺激糖异生，诱导肝糖输出，并降低肝对胰岛素的灭活能力，加重胰岛素抵抗，形成恶性循环［10］。该研究中NAFLD组肥胖指标、糖脂参数、HOMA-IR明显高于对照组，与NAFLD的临床表现相吻合。

CTRP12作为CTRP家族中的一员，和其他成员类似，拥有Clq/肿瘤坏死因子样球形结构域，其氨基酸序列与脂联素同源性为20%［6］。研究表明，CTRP12能够抑制肝糖异生，促进脂肪细胞糖摄取，改善胰岛素抵抗。Enomoto等［6］发现 CTRP12能在胰岛素浓度不变的前提下增加肥胖小鼠的糖耐量，改善其胰岛素敏感性。该研究还发现肥胖小鼠经CTRP12干预后，其体重下降，脂肪细胞体积较对照组明显减小。进一步研究表明，CTRP12主要是通过激活PI3K-Akt信号通路，抑制肝糖异生，促进脂肪细胞对葡萄糖摄取。该研究首次发现，NAFLD组血清CTRP12浓度明显高于对照组，且与血糖、TG、HOMA-IR、肥胖指标有显著相关性。多元线性回归分析提示血糖、WC、BMI是CTRP的独立影响因素。由此可见，CTRP12可能通过改善糖脂代谢及胰岛素敏感性，参与NAFLD的病理生理过程。类似于瘦素和脂联素抵抗，笔者推测CTRP12浓度升高可能是胰岛素抵抗发生时的代偿作用。

作为一项观察性实验，笔者未能观察CTRP12在NAFLD不同病理阶段的变化，并不能明确血清CTRP12和NAFLD发生的因果关系，研究结果需在前瞻性队列研究及基础实验中证实。

综上所述，脂肪因子CTRP12血清浓度在NAFLD患者中显著升高，可能在NAFLD发病进程中发挥作用。但具体机制亟待更加深入的研究。