母亲血清抗-HBs阳性对其新生儿接种乙肝疫苗接种效果的影响研究

陈奋，林道炯

防控乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是我国一项具有挑战性的工作。目前，国内预防HBV感染的主要措施为接种乙肝疫苗，并已将接种乙肝疫苗纳入新生儿免疫保护计划[1，2]。自我国开展接种乙肝疫苗以来，人群抗-HBs阳性率呈现明显升高的趋势[3]。由于IgG型抗-HBs抗体可通过胎盘进入胎儿，所以孕妇产出的婴儿体内来自母亲的抗-HBs抗体阳性率也在不断升高，母亲抗-HBs抗体能够起到保护、预防新生儿和幼儿感染HBV的作用，但其可能对新生儿接种乙肝疫苗的免疫应答造成一定的影响[4，5]。本文分析了血清抗-HBs阳性的孕妇所产新生儿接种乙肝疫苗后主动应答情况，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2012年6月～2013年6月我院产科住院待产的60名单胎妊娠妇女，年龄为20～35岁，平均年龄(26.7±1.4)岁。其新生儿出生体质量为2.8～4.5（3.1±0.5）kg。所有孕妇血清 HBsAg、HBeAg、抗HBc和抗HBe均为阴性，其中血清抗-HBs阳性31名，抗-HBs阴性孕妇29名。纳入标准：（1）新生儿出生体质量≥2.75 kg；（2）出生后1分钟内Apgar评分≥8分。排除存在严重畸形或有疾患的新生儿。本研究获得医院医学伦理委员会批准，孕妇及其丈夫签署知情同意书。

1.2 乙肝疫苗接种 在新生儿出生24 h内，注射第一次乙肝疫苗，之后于出生后1个月注射第二次疫苗，出生后6个月注射第三次疫苗。分别由专业人员在新生儿右上臂三角肌内注射重组(酵母)乙肝疫苗（深圳康泰生物制品股份有限公司）5 μg。对于应答后血清抗-HBs水平降低者或未接种成功者，则再次加强注射乙肝疫苗20 μg或重新按上述方案再次接种。

1.3 检测方法 采集幼儿12个月和36个月龄时血液3 mL，离心，-20℃保存血清。采用ELISA法检测血清HBV标记物（试剂盒购自上海酶联生物公司）；使用AXSYM全自动免疫分析仪和微粒子酶联免疫法检测血清抗-HBs(美国Abbott公司，以mlU/m1表示)。当母体外周血和/或脐血抗-HBs≥1000 mlU/ml时，用20%小牛血清稀释后，重新检测。血清抗-HBs≥10 m IU/ml为阳性，即表明人体具有保护能力；血清HBsAg阳性则表明HBV感染；HBsAg阴性而抗-HBc阳性则表明过去感染HBV；血清抗-HBs水平以几何平均浓度（GMC）表示。

1.4 评价标准 血清抗-HBs定量检测判定[6]：无应答：抗-HBs<10 m IU/ml，且HBsAg阴性；低水平应答：抗-HBs浓度在 10 mIU/ml～99.9 mIU/ml；正常应答：抗 HBs浓度在100 mIU/ml～999.9 mIU/ml之间；高水平应答：抗-HBs大于1000 mIU/ml。

1.5 统计学处理 应用SPSS 22．00统计学软件分析，计量资料以±s表示，采用t检验，对不符合正态分布的计量资料以M（IQR）表示，采用秩和检验，计数资料的比较采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清抗-HBs阳性与阴性母亲所生新生儿一般资料比较 两组新生儿一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05，表 1）。

2.2 两组幼儿接种效果比较 在1岁时，检测接种乙肝疫苗的效果，结果两组应答水平无统计学差异（P>0.05，表2）；在1岁和3岁时，两组幼儿血清抗-HBs阳性率和抗-HBs水平比较，差异也无统计学意义（P>0.05），而在3岁末，两组幼儿血清抗-HBs水平均明显低于1岁时（P<0.05，表3）。

2.3 加强接种情况 在3岁末，60名幼儿血清HBsAg和抗-HBc均为阴性。对7名血清抗-HBs阴性儿童加强接种后，结果6个月后，6名幼儿血清抗-HBs转阳。

表1 血清抗-HBs阳性与阴性母亲所生新生儿一般资料（%，±s）比较

表1 血清抗-HBs阳性与阴性母亲所生新生儿一般资料（%，±s）比较

例数 孕周 自然分娩 剖宫产 男性 出生体质量（kg） 1 min内Apgar评分抗-HBs阳性 31 38.2±1.0 10（32.3） 21（67.7） 17（54.8） 3.2±0.4 8.5±1.1抗-HBs阴性 29 37.9±1.1 9（31.0） 20（69.0） 15（51.7） 3.1±0.5 8.4±1.2

表2 两组幼儿接种乙肝疫苗后应答效果（%）比较

表3 两组幼儿接种效果[%，M（IQR）]比较

3 讨论

HBV感染可能会通过母婴传播，通常发生于围生期和婴幼儿期，接种乙肝疫苗是目前国内控制HBV感染率的有效方法[7]。由于乙肝疫苗接种的普遍推广，国内幼儿人群血清HBsAg阳性率已大幅下降。国外一项在意大利针对HBV高流行区域的研究[8]结果显示，为新生儿接种乙肝疫苗后，HBV感染率明显降低，证明接种乙肝疫苗对防止乙型肝炎具有重要的实践意义。虽然母亲抗体能够保护新生儿避免受到病毒的感染，但国外相关研究[9，10]表明，一些如破伤风或甲型肝炎病毒等，来自于母亲的病原抗体能够抑制新生儿在接种疫苗后产生的免疫应答，且由于疫苗及病原种类不同，母亲抗体对其免疫应答的抑制程度也有所不同，但都与母亲抗体的浓度呈正相关。0时、1个月和6个月接种乙肝疫苗是经过大量研究证明的最佳接种方案。国内胡娅莉等[11]的研究结果表明，按照0、1、6方案为新生儿接种三针乙肝疫苗后一个月，母亲有高滴度抗-HBs抗体的幼儿血清抗-HBs水平明显低于低滴度或阴性组母亲的幼儿，证明了母亲抗-HBs对幼儿短期免疫应答有不利影响。而本文在此研究基础上进一步研究母亲抗-HBs对主动免疫的远期影响。

国外研究结果[12-15]表明,新生儿在接种3次重组Hep B（酿酒酵母）疫苗后，仅有20%可出现低免疫应答或无应答的情况，在完成3次疫苗接种后血清抗-HBs滴度越高的新生儿抗-HBs阳性率也会越高，在母亲血清HBsAg阴性的儿童，该特征则更加明显。本研究结果显示，在新生儿接种3针疫苗经过3年的随访则发现所有母亲血清HBsAg均为阴性，完成接种后婴幼儿血清抗-HBs滴度均>100 m IU/ml。虽然在接种3针乙肝疫苗后3年，有7名（11.7%）幼儿血清抗-HBs滴度转为阴性（<10m IU/ml），但是均未检测到血清HBsAg或抗-HBc阳性，与国外研究[16]结果基本一致，说明在随访期间内所有新生儿均未受到HBV的感染。这一现象可能与所有新生儿不存在纹身、大手术、母亲感染HBV等危险暴露因素有关。国外[17]研究结果显示，乙肝疫苗具有免疫记忆，能够在5～15年间对接种乙肝疫苗的儿童产生持续免疫反应。本研究中新生儿未受到HBV感染的原因更有可能与完成乙肝疫苗接种后，疫苗产生的持续性免疫记忆而获得免疫保护有关，表明注射乙肝疫苗能够有效控制幼儿的HBV感染率[18，19]。由于本研究中 7 名血清抗-HBs<10 mIU/ml的幼儿血清HBsAg和抗-HBc均为阴性，且不存在暴露HBV的危险因素[20]，但还是给予了加强接种乙肝疫苗。如果研究中检测出儿童母亲HBsAg为阳性，则易发生宫内感染，导致出生后接种的乙肝疫苗无法发挥保护作用。如果幼儿母亲或者其他家庭成员有携带HBV或慢性乙型肝炎病史，并且该儿童血清抗-HBs平均水平也<10 m IU/ml的话，因存在有感染HBV的危险，需要及时对新生儿进行加强免疫接种[21,22]。

国外Junqueira et al[23]在对巴西地区的新生儿的研究结果表明母亲血清抗-HBs抗体不会对新生儿接种乙肝疫苗应答产生影响。本研究结果证明，在完成全程免疫后1年和3年间，母亲血清抗-HBs阳性组和阴性组幼儿血清抗-HBs水平和阳性率差异无统计学意义。完成接种1年后幼儿血清抗-HBs水平分别为1162.1 mIU/ml和1104.2 mIU/ml，差异无统计学意义（P>0.05），3年后他们的血清抗-HBs水平分别降低至74.3 m IU/ml和73.6 mIU/ml，差异无统计学意义（P>0.05），提示母亲血清抗-HBs阳性与否并不会影响幼儿接种乙肝疫苗的应答效果，不会对婴幼儿体内抗-HBs的产生发生影响。但研究中1年后婴幼儿血清抗-HBs水平明显高于三年后血清抗-HBs水平，提示在接种乙肝疫苗后产生的抗-HBs滴度会随着年龄的增加而下降，需要及时监测，及时给予加强注射。

综上所述，按照目前国家推荐的3针方案注射乙肝疫苗，能够有效阻止新生儿受到HBV的感染。母亲血清抗-HBs阳性并不会对新生儿接种乙肝疫苗的应答产生不利影响。但本研究还存在一些不足，如研究样本数量较小，可能会影响研究结果的客观性。由于一些客观因素，未对新生儿采血，检测血清抗-HBs水平和阳性率，以便对照分析。也未进行乙肝疫苗剂量的分层研究对照，还不能确定多大剂量的乙肝疫苗是合适的。针对国产乙肝疫苗，也需要进行多厂家多批次的对照试验，以找到合适的剂量和免疫疗程。检测方法也需要规范和统一，以排除主观因素的对研究结果的影响。因此，还需进一步扩大研究范围，以便为乙型肝炎的防治提供更多更准确的参考依据。