云南松松塔水提物对正常及心衰家兔心脏的影响

邹梦迪，刘晓波，赵建荣，马 欧，和 英，郭美仙*

(1.大理大学，云南大理 671000；2.保山中医药高等专科学校，云南保山 678000)

云南松(Pinusyunnanensis)为松科(Pinaceae)植物，主要分布于云南、贵州、四川、西藏和广西[1]，松塔是其球果。许多研究发现云南松松塔种含有木质素和黄酮等物质[2-5]。有研究表明云南松松塔有抗艾滋病[6]、抗癌[7]和抗氧化作用[8]。本课题组的前期研究证明云南松松塔水提物对离体气管平滑肌有兴奋作用[9]。因此，本试验观察了云南松松塔水提物对家兔在体正常心脏及衰竭心脏的收缩张力和收缩频率的影响，初步探究云南松松塔水提物对动物在体心脏的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 样品采自大理苍山东坡，经本院生药学教研室张德全副教授鉴定为云南松松塔(Pinusyunnanensiscones)。样品提取流程如下：晾干粉碎，浸泡(850 mL/L乙醇，6 d)，浓缩，分散(纯水)，萃取(正丁醇)，浓缩(水部分)，干燥，称重[9]。预试验表明，样品最佳试验剂量为50 mg/kg，因此，试验样品浓度分别为100.0 mg/mL、50.0 mg/mL、25.0 mg/mL。样品现用现配，临用前用0.45 μm微孔滤膜过滤除菌。

1.1.2 药品及试剂 去乙酰毛花苷注射液，上海旭东海普药业有限公司产，批号为AF150202；氨基甲酸乙酯，国药集团化学试剂有限公司产，批号为Lot T20061101)；戊巴比妥钠，MAY&BAKERLTD，批号为R13219；生理盐水(NS)，自制。

1.1.3 动物 健康家兔72只，普通级，体重2.5 kg～3.0 kg，雌雄各半，购自昆明楚商科技有限公司，生产许可证号SYXK(滇)2011-0003。

1.1.4 仪器 420F生物机能采集与分析系统，成都泰盟科技有限公司；DH-150小动物人工呼吸机，浙江大学医学仪器厂；JH-2肌张力传感器，航天医学工程研究所。

1.2 方法

1.2.1 云南松松塔水提物对家兔在体正常心脏的影响 家兔32只，随机分为正常组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组8只，雌雄各半。取家兔称重，耳缘静脉注射250 g/L氨基甲酸乙酯4 mL/kg麻醉，仰卧位固定，行气管插管术，连接呼吸机，沿中线行开胸术，暴露心脏，用蛙心夹夹住心尖与张力换能器相连，稳定30 min，观察并记录正常5 min心脏收缩曲线。正常组家兔耳缘静脉注射生理盐水，低剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物25.0 mg/mL，中剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物50.0 mg/mL，高剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物100.0 mg/mL，给药体积均为1.0 mL/kg。观察并记录给药后5 min心脏收缩曲线[10-11](试验时平行操作，4组同时进行，每组每次只做1只家兔)。

1.2.2 云南松松塔水提物对家兔在体衰竭心脏的影响 家兔40只，随机分为模型组、阳性组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组8只，雌雄各半。麻醉和手术方法同2.1，观察并记录正常5 min心脏收缩曲线。各组家兔耳缘静脉注射30 g/L戊巴比妥钠1 mL/kg(持续给药5 min左右)，造成家兔在体心衰模型，观察并记录造模后5 min家兔心脏收缩曲线。模型组家兔耳缘静脉注射生理盐水，阳性组家兔耳缘静脉注射去乙酰毛花苷0.2 mg/mL，低剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物25.0 mg/mL，中剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物50.0 mg/mL，高剂量组家兔耳缘静脉注射云南松松塔水提物100.0 mg/mL，给药体积均为1.0 mL/kg。观察并记录给药后5 min心脏收缩曲线[10-11](试验时，平行操作，5组同时进行，每组每次只做1只家兔)。

2 结果

2.1 云南松松塔水提物对家兔在体正常心脏的影响

给药前，低、中、高剂量(25.0、50.0、100 mg/kg)组家兔心脏收缩张力和收缩频率与正常组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明给药前，所有家兔的心脏功能均正常，且无差异性。给药后，低、中、高、剂量组家兔心脏收缩张力和频率与给药前比较均无统计学差异(P>0.05)；给药后，低、中、高、剂量组家兔心脏收缩张力和频率与正常组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明云南松松塔水提物对家兔在体正常心脏的收缩张力和频率无影响(表1)。

2.2 云南松松塔水提物对家兔在体衰竭心脏的影响

造模前，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩张力与模型组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明造模前，所有家兔的心脏功能均正常，且无差异性。造模后，模型组，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩张力与造模前比较均明显减小，均有统计学差异(P<0.01)；造模后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩张力与模型组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明造模成功，且所有家兔的心脏功能无差异性。给药后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩张力与给药前比较均明显增大，均有统计学差异(P<0.05，P<0.01)；给药后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩张力与模型组比较均明显增大，均有统计学差异(P<0.05，P<0.01)，表明云南松松塔水提物对家兔在体衰竭心脏的收缩张力有增强作用(表2)。

表1 云南松松塔水提物对家兔在体正常心脏的影响

表2 云南松松塔水提物对家兔在体衰竭心脏收缩张力的影响

注：与模型组比较●P<0.05,●●P<0.01；与造模前比较☆P<0.01,☆☆P<0.01；与给药前比较★P<0.05,★★P<0.01。

Note:Compared with model group●P<0.05,●●P<0.01; Compared to before modeling☆P<0.01,☆☆P<0.01; Compared to before administration★P<0.05,★★P<0.01.

造模前，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩频率与模型组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明造模前，所有家兔的心脏功能均正常，且无差异性。造模后，模型组，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩频率与造模前比较均明显变慢，均有统计学差异(P<0.01)；造模后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩频率与模型组比较均无统计学差异(P>0.05)，表明造模成功，且所有家兔的心脏功能无差异性。给药后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩频率与给药前比较均明显加快，均有统计学差异(P<0.05，P<0.01)；给药后，阳性组和低、中、高剂量组家兔心脏收缩频率与模型组比较均明显加快，均有统计学差异(P<0.01)，表明云南松松塔水提物可以加快家兔在体衰竭心脏的收缩频率(表3)。

表3 云南松松塔水提物对家兔在体衰竭心脏收缩频率的影响

注：与模型组比较●P<0.05,●●P<0.01；与造模前比较☆P<0.01,☆☆P<0.01；与给药前比较★P<0.05,★★P<0.01。

Note:Compared with model group●P<0.05,●●P<0.01; Compared to before modeling☆P<0.01,☆☆P<0.01; Compared to before administration★P<0.05,★★P<0.01.

3 讨论

心衰是指由于心脏结构和(或)功能异常，导致心室充盈和(或)射血功能障碍，引起心脏循环障碍并伴有心功能进行性恶化临床综合征，是各种心脏疾病发展的终末阶段，其发病率和死亡率较高[12]。心衰的治疗手段有非药物和药物两种。非药物手段有基因治疗、微创介入和干细胞治疗等，但还存在争议，而且由于费用等问题临床应用受限。所以，治疗心衰的主要手段还是药物。强心苷类药物是临床广泛应用的有效治疗心衰的正性肌力药，但是长期的临床观察及研究发现，强心苷类药物只能改善心衰患者的临床症状而不能降低死亡率[13]。

本试验的目的是从心肌收缩张力和收缩频率两个方面，评价云南松松塔水提物对家兔在体心脏的影响。从试验结果可以看出，云南松松塔对正常家兔的心脏功能几乎无影响。通过静脉注射戊巴比妥钠制备家兔心衰模型，云南松松塔水提物南松松塔水提物3个剂量组( 25.0、50.0、100 mg/kg)均能增强心衰家兔在体心脏的心肌收缩张力和收缩频率。本试验已确定了云南松松塔水提物对家兔的在体衰竭心脏有兴奋作用，从而也表明云南松松塔中有兴奋心肌的活性成分。但是由于本次试验所用样品为粗提物，因此，对心脏有兴奋作用的化合物目前还不清楚，而且样品的水溶解度不是很好，所以，接下来要将样品细分纯化，确定有效成分；要解决样品的溶解度问题；因为样品增强心肌收缩力的同时也加快收缩频率，这样可能导致衰竭心脏的耗氧量增加，心脏负担加重。因此，将进一步研究样品对家兔衰竭心脏冠状动脉和耗氧量的影响。

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