维生素D缺乏的过敏性紫癜患儿外周血T细胞亚群、NK细胞计数变化

雷丽

(遵义市第一人民医院，贵州遵义563000)

过敏性紫癜是一种免疫复合物介导的全身中小血管炎综合征，又被称为亨舒综合征(HSP)[1]。临床表现为血小板不减少性紫癜，常伴有腹痛、关节疼痛、便血、血尿、蛋白尿等症状，可发生于任何年龄，多见于2～8岁儿童，男性发病率高于女性，发病有一定季节性，以春秋两季居多[2]。HSP是儿科常见病，近年来发病率逐渐升高，且易累积肾脏，危害患儿健康，给日常生活造成严重影响。HSP的发病原因目前尚不清楚，免疫功能失调和感染可能是其发病机制中的重要环节[3]。维生素D是一类具有生物活性的脂溶性类固醇衍生物，是体内激素的重要前体物质，其基本功能是调节钙磷代谢[4]。随着对维生素D研究的深入，逐渐发现维生素D与心血管疾病、自身免疫疾病及肿瘤的发生有关[5]。HSP作为一种免疫性血管炎，HSP患儿血清维生素D水平是否与细胞免疫功能有关，目前缺乏研究。本研究观察了HSP患儿血清维生素D水平变化，以及维生素D缺乏的HSP患儿外周血T细胞亚群、NK细胞计数变化。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016年1月～2017年1月收治的急性期过敏性紫癜患儿79例为HSP组，其中男47例、女32例，年龄(7.1±3.4)岁。纳入标准：①参照《诸福棠实用儿科学》[6]中HSP的诊断标准确诊；②初次发病，入院前未治疗；③患儿家长自愿参加本研究。排除标准：①严重心肝肾功能障碍；②近期使用肾上腺皮质激素或免疫抑制剂；③免疫系统疾病，近期严重感染；④其他特殊病史。另选健康儿童40例为对照组，均排除过敏性紫癜、免疫系统疾病和近期免疫抑制药物使用史，其中男22例，女18例，年龄(7.4±2.8)岁。两组儿童性别组成和年龄相比，P均>0.05。本研究已经获得医院伦理委员会审查通过，入组儿童家长均知情同意并签署知情同意书。

1.2 血清25(OH)D3检测 采集两组儿童空腹静脉血4 mL共两管，其中一管静置20 min，3 000 r/m离心15 min，采集上清液分装至EP管中，标记后置于-80 ℃冰箱保存待测。采用化学发光法检测两组患者血清25(OH)D3。试剂盒购自罗氏诊断试剂公司，操作按照说明书进行。血清25(OH)D3≥30 nmol/L为正常，否则为缺乏。

1.3 外周血T细胞亚群、NK细胞计数 取HSP患儿另一管空腹静脉血，用双标流式细胞法检测T细胞亚群分布，采用荧光激活细胞分离仪(FACS)进行分析，计数CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)。HSP患儿均参照《诸福棠实用儿科学》[6]中HSP的治疗方法治疗，进入缓解期后再次抽取空腹静脉血4 mL，再次检测上述指标。25(OH)D3≥30nmol/L为正常，25(OH)D3<30nmol/L为缺乏。

2 结果

HSP组、对照组儿童血清25(OH)D3水平分别为(17.63±9.21)、(31.55±12.09)ng/mL，两组血清25(OH)D3水平相比，P<0.05。HSP组患儿血清维生素D正常36例、缺乏43例。

血清维生素D正常、缺乏的HSP患儿各亚群T细胞数目见表1。维生素D缺乏组患儿急性期外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞数目均低于维生素D正常组患儿(P均<0.05)，维生素D缺乏组患儿缓解期外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、NK细胞数目亦均低于维生素D正常组患儿(P均<0.05)。维生素D缺乏组HSP患儿急性期、缓解期外周血CD8+T细胞数目与维生素D正常组患儿相比，P均>0.05。

表1 血清维生素D正常、缺乏的HSP患儿各亚群T细胞数目(个

注：与维生素D正常组相比，#P<0.05。

3 讨论

HSP是一种免疫性血管炎，根据血管炎累及的部分分为单纯性紫癜、腹型紫癜、肾型紫癜、混合型紫癜，临床上以腹型和肾型病情较重，需要抗炎治疗[8]。目前HSP尚无特异性诊断指标，根据典型临床表现诊断本病并不困难，但因该病临床症状复杂多样，临床中仍有较高误诊率[9]，因此寻找一种特异性指标来指导HSP的诊断和治疗具有重要意义。维生素D是重要的维生素，也是体内激素的前体，食物来源的维生素D2、D3和人体通过皮肤合成的维生素D3都是没有活性的，但是经过肝脏羟化后，生成具有较低活性的25(OH)D3，最后运至肾脏在此羟化生成具有很强生物活性的1,25(OH)D3，通过与受体结合发挥调节作用[10,11]。近年来研究发现维生素D受体广泛表达与体内各种组织和免疫细胞中，维生素D具有调节免疫功能的作用，并且已有大量研究表明维生素D与过敏性疾病具有密切关系[12,13]。

本研究结果显示，HSP患儿血清维生素D水平低于正常儿童，与郭佳梅等[14]的研究结果一致，提示维生素D可能参与了HSP的发病机制，维生素D可能具有防止HSP的作用。T细胞是维生素D发挥免疫调节作用的重要靶细胞，同时也是HSP发病过程中的效应细胞，通过分泌各种细胞因子调节体液免疫和机体免疫状态[15]。CD3是成熟T细胞特有的表面标志，根据成熟T细胞表面CD分子表达差异将CD3+T细胞分为CD4+T细胞和CD8+T细胞两个亚群，二者的比例是反应机体免疫状态的重要指标。HSP患儿CD3+T细胞和CD4+T细胞比例降低，患儿T细胞的分化成熟收到抑制，机体处于免疫抑制状态，这种现象可能与机体的免疫调节代偿保护有关，降低免疫功能以减轻炎症反应，保护机体[16]。本研究结果显示，维生素D缺乏的急性期HSP患儿细胞免疫抑制作用更加明显，CD3+T细胞、CD4+T细胞和NK细胞数量均显著低于维生素D正常的急性期HSP患儿；HSP患儿经治疗后到缓解期，维生素D缺乏的HSP患儿CD3+T细胞、CD4+T细胞和NK细胞数量仍然维生素正常组，提示维生素D水平可能与治疗效果有关，补充维生素D可能具有改善HSP患儿预后。

综上所述，HSP患儿血清维生素D水平显著低于正常儿童，血清维生素D水平与HSP治疗前后细胞免疫功能密切相关。补充维生素D可能有助于治疗HSP，但其用药方法和效果尚有待进一步研究确认。

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