维吾尔药地锦草药材水分、灰分、浸出物、重金属和砷盐含量测定△

阿提坎木·瓦合甫 吐提姑·艾力 其曼姑丽·阿布都热合曼 古力巴尔·卡生木 米仁沙·牙库甫

(1.喀什地区维吾尔医医院，新疆 喀什 844000； 2. 新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830011)

地锦草为大戟科植物地锦Euphorbia humifusa Willd．或斑地锦Euphorbiamaculata L．的干燥全草[1]，我国大戟科大戟属Euphorbia地锦类植物尚有6个种和1个变种在民间作地锦草药用，除东南沿海省份之外，遍及全国各地[2]，主要分布在原野荒地、路旁、田间，资源十分丰富。夏、秋季节采全草，除去杂质、清水洗净，切段，晒干。地锦草用药历史悠久，为中医、维医、蒙医常用药材。 《中国药典》2015版收载品种，其名最早出自《嘉祜本草》，之后的历代医书中均有记载，按医书记载描述的形态、习性及产地记述，与如今市售地锦草药材相比，其特征基本相符。地锦草味辛、性平，归肝、大肠经，入药部分为地锦草全草，具有止血凉血、解毒清热之功效。主要用于治疗各种皮肤病(皮肤瘙痒)、各种炎症疾病(肠炎、阴道炎等)、痢疾、咳血、便血、外伤出血、崩漏、乳汁不通、湿热黄疸、跌打损伤等疾病[3-5]。

鉴于地锦草较好的药用价值及良好的应用前景，近年来国内外学者对地锦草的关注度日渐提高，并在化学成分方面做了大量工作。早在1937年日本学者藤井胜也等，报道了地锦草的部分化学成分，发现地锦中含有槲皮素、没食子酸、没食子酸甲酯和肌醇[6]，之后国内外医药学者又不断地对地锦植物进行了深入分析研究，证实此类中草药中化学成分主要有黄酮及其苷类[7-8]。

地锦草丰富多样的化学成分决定了其广泛的药理活性，现代药理研究表明，地锦草具有抗菌、抗炎[9-11]、抗氧化[12]、抗过敏、免疫调节、护肝、止血[13,14]等多种药理效应。基于深度文献分析，我们发现目前国内学者大部分都集中在地锦草水煎液及总黄酮提取物部位的研究，并发现有效活性成分主要为黄酮类成分。本研究旨在建立对维药地锦草药材定性的质量标准，拟对地锦草药材水灰分、浸出物含量等质量评价参数进行测定，为全面控制与评价地锦草药材的质量提供实验依据同时为后续我院院内制剂吾西巴抗妇炎糖浆质量控制提供一个科学依据。

1 仪器与药材

1.1 仪器与试药 电子天平(JJ224BC，江苏常熟滨镇馀市有限公司)，数显恒温水浴锅(HH—202，金坛市医疗仪器厂)，马沸炉(黄冈永安医疗器械有限公司)，脉动真空干燥灭菌机(XGl—山东新华医疗器械股份有限公司)，电热恒温干燥箱(202型—北京市永光明医疗器械有限公司)，扁形称量瓶，坩埚，氯化钠，硝酸，盐酸，硫酸，硝酸银，硝酸铅，硫代乙酰胺，醋酸铅，溴化汞，无水乙醇，等均为分析纯。

1.2 药材 地锦草样品来源见表1。供试10批地锦草药材由新疆医科大学药学院帕丽达·阿不力孜教授鉴定为地锦草为大戟科植物地锦Euphoria humidify Wield。

表1 地锦草药材来源

2 方法与结果

2.1 水分测定 按照2015年版《中国药典》一部附录ⅨH水分测定法第一法，取10批地锦草药材粉末(过2号筛)约2 g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过10 mm，精密称定，打开瓶盖在105℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，冷却，称重，至连续再次称重的差异不超过5 mg，根据减失的重量计算含水量(%)。实验结果表明，地锦草水分含量在3.14%～4.72%之间，平均值为3.93%，结果见表2。

表2 地锦草药材中水分的含量

2.2 灰分的测定

2.2.1 总灰分的测定 照灰分测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨK)测定。取地锦草药材粉末，通过2号筛，混合均匀后，取供试品3.5g，置炽灼至恒重的坩埚中，缓缓升温炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升温至560℃，使完全炭化至恒重。根据残渣重量，计算出供试品中总灰分含量(%)。结果见表3。

2.2.2 酸不溶性灰分的测定 照灰分测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨK)测定，取“2.2.1”项下所得灰分，在坩埚中加入稀盐酸10mL，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10min，表面皿用热水5 mL冲洗，洗液并坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚中的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中干燥，560℃炽灼至恒重。计算地锦草酸不溶性灰分的含量(%)。地锦草总灰分含量为8.81%～13.068%，平均值为10.89%；酸不溶性灰分含量为1.56%～2.34%，结果见表3。

表3 地锦草药材总灰分和酸不溶性灰分的含量

2.3 浸出物的测定

2.3.1 浸出物测定方法的比较 照浸出物测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨA)测定。

冷浸法：取批号为20160725供试品约2 g，称定重量，置250mL的锥形瓶中，精密加人溶剂50 mL，塞紧，冷浸，前6 h内时振摇，再静置18 h，用干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液20m1，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中，冷却30 min，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%)。

热浸法：取批号为20160725供试品约2 g，称定重量，置250mL的锥形瓶中，精密加入溶剂50 mL，塞紧，称定重量，静置1h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用溶剂补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中，冷却30 min，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%)。

实验结果表明，冷浸法和热浸法对同一样品分别用2种不同溶剂来进行浸出物的测定，热浸法的测定结果高于冷浸法，故选择水为溶剂热浸法测定浸出物的含量，结果见表4。

表4 地锦草浸出物冷浸法和热浸法测定结果(%)

2.3.2 水溶性浸出物的测定 照浸出物测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨA)项下的水溶性浸出物的测定法热浸法测定，结果见表5。

表5 水溶性浸出物测定结果(n=3)

2.3.3 醇溶性浸出物的测定 乙醇浓度的选择取批号为20160725地锦草药材2 g，对不同浓度的乙醇进行了比较。

实验结果表明用75%乙醇测定的浸出物结果高于其它浓度乙醇，故选择55%乙醇测定浸出物，结果见表6。

表6 乙醇浓度的比较测定

照浸出物测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨA)项下的醇溶性浸出物的测定法热浸法测定。实验结果表明，地锦草水溶性浸出物测定结果在26.83%～40.25%之间，平均值为33.54%；55%乙醇浸出物测定结果在22.61%～33.91%之间，平均值为28.26%，结果见表7。

表7 醇溶性浸出物测定结果(n=3)

2.4 重金属(Pb2+) 测定照重金属测定法(《中国药典》2015版一部附录ⅨE)测定；取地锦草药材粉末过2号筛49，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸1 mL，使恰湿润，用低温热至硫酸出尽后，加硝酸0.5 mL蒸干，放冷，在560℃炽灼使至完全灰化，放冷加盐酸2 mL，至水浴上蒸干后加水15mL，滴加氨试液至酚酞指示液显粉红色，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2 mL，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释成25mL，作为甲管；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2mL与水15mL，微热溶解后，移至纳氏比色管中加不同量的标准铅溶液，再用水稀释成25 mL，作为乙管；再在甲，乙两管中分别加硫代乙酰胺试液个2mL，摇匀，放置2 min，同置白纸上，自上向下透视，甲管中出现的颜色不得乙管深，结果见表8。

2.5 砷盐测定 砷盐测定按照《中国药典》2015版一部附录ⅧJ砷盐检查法项下第l法(古蔡氏法)进行测定，称取三氧化二砷0.132 g，置1000mL容量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5 mL溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10mL，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10mL，置1000m1容量瓶中，加稀硫酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，即得标准砷溶液(每毫升相当1μg的As)。精密量取标准砷溶液2 mL，置标准磨口锥形瓶中，加盐酸5 mL与水21mL，再加碘化钾试液5 mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10 min后，加锌粒2 g，立即将装有醋酸铅棉花和溴化汞试纸的导气管密塞于标准磨口锥形瓶上，并将瓶置于25～40℃水浴中，反应45 min，取出溴化汞试纸，取出溴化汞试纸，即得，结果见表8。

实验结果表明，地锦草重金属与砷盐检查结果均符合《中国药典》(2015年版)规定重金属与砷盐杂质限量检查的要求。

表8 重金属与有害物质测定结果

3 讨论

地锦草作为维吾尔医的常用药材收载于《中华人民共和国药品标准维吾尔药分册》)(1993年版)。本文首次采用《中国药典》[15]法对地锦草药材水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量、重金属与砷盐指标进行测定，为地锦草药材的质量评价提供了实验依据，可填补原地方标准的空白。根据测定结果并参照《中国药典》的相关规定，建议地锦草药材提升标准中，地锦草药材水分暂定不超过5.0%为宜，总灰分暂定不超过14.0%为宜，酸不溶性灰分暂定不超过3.0%为宜，热浸法水溶性浸出物暂定不超过41.0%为宜，热浸法55%乙醇浸出物暂定不低于34.0%为宜，重金属(Pb)暂定不超过0．001%为宜，砷盐暂定不超过0．000l%为宜。

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