稻瘟病病原孢子观测

朱兴刚 马军挺

水稻是我国的主要粮食作物之一，种植面积占到了耕地总面积的26%，产量占粮食总产量的43%。稻瘟病（ Pyricularia oryzae Cavara ） 是影响水稻生产的主要病害，稻瘟病菌在一个生长季节里，只要条件合适，就能完成菌量积累过程而造成病害的流行。稻瘟病有以下特点：侵染频繁，潜育期短，能够藉气流和雨水飞溅传播；病原物繁殖率高但寿命不长，对环境敏感，不利条件下会迅速死亡； 病害传播距离和效能高。稻瘟病菌孢子的产生、释放、传播和侵染过程受多种因素的影响，在大田条件下进行空中孢子浮游量的监测，及时掌握稻瘟病菌的时空动态，了解初侵染菌量或再侵染的菌量，有助于制定最佳的防治时机，有效地进行病害的控制和管理。掌握和运用合适的孢子检测方法，对于基层植保工作者以及植物保护科研人员都有其重要价值。

1 影响稻瘟病孢子生活史的主要因素

1. 1 光 光不是孢子形成所必须的，但光线照射能显著促进孢子形成。诱发分生孢子形成所需要的最少照射时间因温度而不同。温度越高照射时间应越短，在25 ℃温度下需6 h。但光照减少会影响光合作用，削弱了抗性，增加感染。

1. 2 温度 孢子萌发温度10 - 35 ℃，最适温度为25 - 28 ℃。潜育期主要受温度控制，高温下病斑扩展很快。

1. 3 湿度 高湿有利于分生孢子形成、飞散和萌发，高湿度持续达一昼夜以上，有利于病害的发生与流行。

1. 4 风 在每秒3. 5 m的弱风条件下，分生孢子原样着生在分生孢子梗上干燥、收缩，但不脱落。超过这个限度的风速，特别是在每秒钟5 m 以上的风速下，风力引起了孢子的机械脱落。

1. 5 雨 雨水飞溅对气传孢子的释放和传播都有重要影响。稻叶表病菌孢子附着率在孢子与叶表接触5 h内与降雨强度和降雨持续时间关系密切，5 h 后影响变小，实际感染日期与下雨时期有关，根据常年观察资料，稻瘟病发生和发展的初期常常有连续的降雨过程，且雨后迅速放晴，气温回升。

1. 6昼夜周期 晴天测定田间分生孢子脱落，8∶00 - 14∶00 脱落最少，0∶00 - 2∶00 脱落最多。孢子的脱落需要饱和的湿度，以及光照以后有6 - 8 h 的黑暗期，这样的明暗周期，从明亮到黑暗的变化，可以观察到敏感反应的脱落；相反地，由黑暗到明亮的变化则不发生脱落（铃木1966） 。也有反对需要明暗周期的不同看法（岩野1978）。

1. 7 水滴 让水滴接触分生孢子柄与孢子的连接点时，马上可以观察到脱落（小野，铃木1959） 。因此可以推断，自然的露水、分泌液、雨滴等对于孢子的脱落起很大作用。即使湿度为100 % ，如果没有水滴，也不能萌发和形成附着器。一旦让孢子吸水20 min ，再让它变成干燥状态，孢子便失去萌发力。

1. 8 露珠 在最适温度24 ℃左右，如果结露时间不到7 h ，也不能侵入。铃木（1969） 提出了消露时间（x） 与形成附着器的孢子率y 之间存在y = 3. 4x - 19. 8 （6 ≤x ≤12） 。

2. 显微镜检测方法和密度换算办法

常見的检测面积为18 mm ×18 mm ，利用推进器掌握长度和宽度，存在一定的误差。在预报初期孢子量较少的情况下，可以全玻片检查；孢子密度变大后可以改为观测几行，或者随机观测固定的n 视野数内的孢子数量。用接目测微尺计测法，可以在一定的观测倍数下，测定出所用显微镜在固定倍数下的单视野直径和面积S。根据某点观测的视野数n 和观测的孢子数x 就可以换算出该点的孢子密度：ρ= x/ nS。如果是全玻片检查，就可以直接用孢子数和玻片面积来计算密度；如果是成行检查，用一定倍数下的视野直径D 和玻片长度W、观测行数m 可以计算孢子密度：ρ=x/ mWD，或ρ=36.36364x/ mW.

3. 玻片法捕捉的摆放方式和摆放高度玻片法捕捉时，多采用水平的摆放方式，也有采用竖直放置方式的。摆放高度对于捕捉效果有明显的影响。

同样在1 m 的高度，竖直放置方式与水平放置相比，捕捉效率仅为水平放置的19 % - 36 %左右。所以用水平放置方式捕捉效果比竖直放置方式较好。因此在较多点位和较长时间的孢子量的监测中，特别是基层的农业植保部门，简易的玻片捕捉法更加方便和实用。在田间树立木桩作为支架，将涂有凡士林的玻片放置在不同的作物冠层高度及不同的方向上，定期更换玻片，并在显微镜下（10 ×10 或16 ×10 视野左右） 镜检每视野的孢子数或者整张玻片的孢子量。通过田间病原孢子的捕捉，可以模拟田间的实际情况，了解田间初始菌量的数量，研究不同生育期和不同距离、方向上病原孢子的发生和传播情况，有利于及时对田间病情的发展作出预测，制定最佳防治时机，减轻病害损失。玻片的面积25.4*76.2=1935.48mm2，根据几年的观测当孢子密度大于2.1个/cm2，玻片孢子数大于40个，24小时观测值时，即应该进行防治。

（作者单位：156333黑龙江省北大荒农业股份有限公司青龙山分公司、黑龙江省建三江青龙山农场阳光保险公司）