神经干细胞移植治疗帕金森病的效果观察

康 霞

驻马店市中心医院神经内二科，河南 驻马店 463000

帕金森病属于神经系统病变，通常多见于中老年患者，目前我国帕金森发病率较高，尤其是老年患者发病率接近1%[1-5]。根据WHO的统计显示，目前全球范围内拥有帕金森病患者数量约400万，其中接近43%的患者来自于我国，每年新发患者数量接近10万[6-9]。由于其发病症状为静止性肢体震颤、肌肉强直等，给患者的日常生活带来了极大的影响。目前，治疗帕金森病尚无特效方案[10-12]。神经干细胞移植术是近年来新兴起来的一种治疗方法[13-18]。为进一步探讨神经干细胞移植术在治疗帕金森病中的应用价值，我们对2014-05—2015-05驻马店市中心医院收治的帕金森病进行治疗，取得较满意效果。

1 资料及方法

1．1一般资料选择2014-05—2015-05驻马店市中心医院收治的帕金森病患者27例，男16例，女11例；年龄46～78(64.8±5.6)岁；病程3～16(6.7±1.2)a。纳入标准：(1)临床确诊为帕金森病，具有不同程度的静止状态下不自主四肢震颤、肌肉强直以及运动神经迟缓症状[19-20]；(2)在接受神经干细胞移植术治疗前，均服用超过2 a时间的抗帕金森病药物，并出现了不同程度的药效减弱或不良反应；(3)不存在神经系统病史，如老年痴呆、急性脑梗死并发神经损伤、精神病等；(4)患者知情同意接受本研究。排除标准：(1)存在干细胞移植禁忌证[21-22]；(2)合并肝脏等其他重要器官疾病者。

1．2方法

1．2．1 神经干细胞分离、提纯和培养方法：27例患者采用神经干细胞移植手术治疗，神经干细胞选择自体骨髓间充质内的神经干细胞。第一步是对患者自体骨髓间充质神经干细胞进行分离和提纯，分离位置选择在髂骨前缘上棘位置，抽取的骨髓组织液量为40 mL，使用密度梯度离心技术，将其中具有单个核的骨髓细胞提纯出来[23-24]。然后将这类单核细胞接种在75 mL培养瓶当中，培养基选择DMEM/F12。接种后的培养瓶置于二氧化碳恒温培育箱中，箱内饱和湿度为37 ℃，二氧化碳的体积分数设定为5%。连续培养4 d后将培养瓶取出，并加入4 mL的无菌生理盐水进行悬浮处理，从悬浊液中提取1×107个细胞进行鉴别，如其抗原表达率、分化特征等神经细胞特征，则认定为神经干细胞培养成功，并将其移植入患者体内[25-27]。

1．2．2 神经干细胞移植手术方法：移植治疗所使用的手术床应更换为硬板床，患者取侧卧位，为防止患者不自主震颤对手术的影响，应借助束缚带将患者固定为双手“抱膝贴腹”状态，即双手放置在两侧膝盖部位，呈紧抱状以使双腿能够贴近腹部，使躯体呈侧弓形卧位。保证髂骨部位的充分暴露，选择髂骨后缘上棘、髂骨后缘中线的交汇点作为穿刺参考点，在骨髓穿刺前应常规对周围皮肤进行消毒处理，并使用浓度为2%的利多卡因进行局部麻醉[28-29]。

穿刺时应以左手拇指和食指将穿刺点周围的皮肤进行临时固定，切记触碰时需佩戴手套，以免污染消毒部位皮肤。右手将穿刺针方向调整为与患者背部垂直，缓慢入针约6 cm后停止，如此时穿刺针内有无色透明状脑脊液回流，则说明穿刺成功。脑脊液逆流约3 mL后，将神经干细胞注射器插入穿刺针内，采用缓慢推注的方式移植神经干细胞。神经干细胞移植量需根据患者自身体质量而定，应为1×107个/kg，悬浊液的浓度应控制在9×108个/mL，推注速度控制在每分钟0.5 mL[19]。推注完毕后，穿刺点位置皮肤再次进行消毒，并利用医用纱布和胶贴进行封闭。手术结束后患者必须采用去枕仰卧位绝对静养约6 h，观察其是否存在不良反应，整个治疗过程中共分4次进行，每次移植手术之间间隔约10 d。术后需指导患者开展面部、颈部、躯干、四肢运动神经恢复锻炼，促进移植神经干细胞的快速分化，并在患者出院后开展为期12个月的随访调查，记录治疗前后帕金森病评分和病症改善率。

1．3疗效评价标准帕金森症状评分采用UPDRS量表[30-32](统一帕金森病评分量表)进行调查，该量表共包含4大类内容，分别是日常行为和心理评分、生活功能评分、运动功能评分及并发症评分，分数越高，说明患者帕金森病症越严重，神经损伤程度越高。

症状改善情况以治疗前后症状UPDRS评分作为标准[33-34]，症状评分下降率>50%为显著改善；评分下降率25%～49%为有效改善；评分下降率<24%时为无效[21，35]。

2 结果

2．1治疗前后UPDRS评分评分比较治疗后12个月后，患者UPDRS量表中的行为和心理评分、日常生活质量评分、运动功能评分、并发症评分均明显低于治疗前(P<0.05)，且治疗后12个月UPDRS量表总评分也低于治疗前(P<0.05)，见表1。

表1 患者治疗前后UPDRS评分比较 (n=27，±s，分)

2．2随访结果27例患者平均随访12个月，治疗总有效率为81.48%(22/27例)，其中显著改善患者10例(37.04%)，有效改善12例(44.44%)，无效5例(18.52%)。

3 讨论

帕金森病是全球性神经系统障碍性疾病，其一般发生于中老年人群，患者临床以四肢静止性震颤、肌肉强直、运动神经迟缓等为主[36-39]。根据现代医疗研究现实，当人体内神经细胞转变为黑质细胞后，其所释放的多巴胺量降低，并且多巴胺在通过黑质神经细胞构成的神经网传递时，对于新生成的神经网络具有抑制作用，降低了人体自我恢复的效果，同时人体内乙酰胆碱含量异常上升[40-43]。

常规治疗方法包括电击和药物治疗，虽然可起到缓解病症的效果，但并发症较多[44-47]。而且电击治疗当中对于电量的使用有着严格的标准，电流过大易损伤神经细胞；电流过小无法达到预期效果[48-51]。干细胞治疗的核心理念在于利用未分化的干细胞对损伤的组织进行修复，从而提升神经系统对多巴胺的合成量，重建神经循环通路，而且移植后的干细胞还可与自身神经细胞相协调，增加神经系统中营养因子的合成，从侧面修复神经系统[52-54]。由于帕金森病本身是由于神经元细胞损伤所引发的，其治疗的靶向性较为明确，因此符合干细胞移植治疗的基本条件[55-57]。神经干细胞移植手术则是选择患者自身的骨髓干细胞进行分化培育，并将其重新移植到脊髓神经内，从而为神经系统再造提供新分化的神经细胞源[58-60]。该方法的优势在于患者治疗痛苦较低，且采用自体干细胞不会出现排斥性，治疗周期短，治疗后短期内效果显著[61-64]。

本研究显示，治疗后12个月患者UPDRS量表中的行为和心理评分、日常生活质量评分、运动功能评分、并发症评分均明显低于治疗前(P<0.05)，且治疗后12个月UPDRS量表总评分也低于治疗前(P<0.05)。27例患者平均随访12个月，患者治疗总有效率为81.48%。由此可见，神经干细胞移植手术治疗帕金森病疗效确切，可提升明显改善患者UPDRS评分，提升患者生活质量。

综上所述，神经干细胞移植手术在一定程度上可改善帕金森病患者的临床症状，为帕金森病治疗开辟了一种新思路[65-68]。本研究的局限之处在于临床观察时间比较短，没有对患者的远期疗效进行研究；同时纳入的病例数量较少，今后可进一步扩大病例样本数量进行扩大范围的研究，以验证神经干细胞移植手术治疗的可行性。

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