血清肿瘤坏死因子α、C反应蛋白在不同肥胖亚型中的变化及意义

张培培，唐潇潇，常向云，王晓丽

（1石河子大学医学院，新疆 石河子832002；2新疆自治区人民医院，新疆 乌鲁木齐市 830000；3石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子832002)

目前，肥胖已成为全球共同关注的严重威胁人类健康的公众问题。当下威胁人类健康的主要慢性疾病（如心血管疾病、糖尿病、肿瘤等）均与肥胖密切相关[1]。根据是否肥胖及代谢情况，人群可分为4种类型：正常体重代谢正常 (metabolically healthy and normal weight)、正常体重代谢性肥胖（metabolically obese butnormalweight）、 代 谢 正 常 性 肥 胖（metabolicallyhealthyobese）和代谢异常性肥胖（metabolically abnormal obese）[2]。不同肥胖类型与代谢性疾病关系密切程度不同，该研究领域逐渐受到关注，成为新的研究热点。肥胖作为一种慢性低度炎症状态已得到公认，不同类型的肥胖代谢亚型预后不同，这可能与其慢性低炎症状态有关。本研究通过探讨不同肥胖代谢亚型的临床特点，观察和比较血清TNF-α(Tumor necrosis factor alpha)、CRP(C-reactive protein)在不同肥胖代谢亚型中的变化水平和意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象

本研究采用病例对照的研究方法，收集2016年09月-2016年11月于石河子大学第一附属医院的201位年满18周岁的就诊者，按照2003年国际生命科学学会中国办事处与中华医学会心血管学会、中华医学会内分泌学会组成的中国肥胖问题工作组编写的《中国成人超重和肥胖症预防控制指南》，依照指南：体质指数（Body mass index BMI）≥28 kg／m2为肥胖，24 kg／m2≤ BMI＜28 kg／m2为超重。根据NCEP ATP-Ⅲ的代谢异常诊断标准：糖代谢异常：空腹血糖（Fasting blood sugar FBG）≥6.1 mmol／L，或糖负荷后2 h血糖（Postprandial blood sugar PBG）≥7.8 mmol／L和（或）已确诊为糖尿病并治疗；血压异常：血压≥130/85mmHg及（或）已确认为高血压并治疗者；空腹甘油三酯（Triglycerides TG）≥1.7 mmol/L；空腹高密度脂蛋白（High-density lipoprotein HDL-C）：男性＜1.09 mmol／L、女性＜1.30mmol／L。以上四项满足两项及以上便可诊断为代谢异常，将201位就诊者分为：A（正常体重代谢正常）组、B（正常体重代谢异常）组、C（代谢正常性肥胖组）组、D（代谢异常性肥胖）组。

1.2 研究方法

1.2.1 临床相关信息的收集

通过记录体检者的一般情况、既往病史、家族史、身体检查，包括：收缩压（Systolic pressure SBP）、舒张压（Diastolic pressure DBP）、身高、体重、腰围、臀围等信息。体检者禁食禁水≥8h，取其肘静脉血4毫升，离心后于EP管内留取血清，检测血清中空腹血糖（FBG）、餐后 2h血糖（PBG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TotalcholesterolTC）、低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein LDL -C）、高密度脂蛋白（HDL-C）（Glycated hemoglobin HbA1C） 等的浓度（罗氏Modular DPP-H7600生化分析仪）。使用高压液相法（日本 ADAMSTMA1c HA-8180检测仪）测HbA1c。

1.2.2 实验室指标检测

采用双抗夹心酶联免疫吸附测定法（Enzymelinked immuno sorbent assay，ELISA）（美国 Bio-Rad 检测仪、杭州联科生物试剂），分别在相对应的高亲和力的酶标板上提前包被好特异性抗人TNF-α和CRP单克隆抗体。在微孔板中加标准品、待测样本及生物素化抗体，孵育后，样本中的TNF-α和CRP会与相对应的预包被的固相抗体以及加入的检测抗体相结合。

在洗净未结合物质的微孔板中加入streptavidin-HRP。洗涤以后，加入显色底物TMB，避光显色。反应后颜色的深浅与样本中TNF-α和CRP的浓度高低成正比。加入终止液终止反应，在450 nm的波长下(参考波长 570～630 nm)检测吸光度值，测定血清TNF-α及CRP水平。

1.3 统计学方法

将收集到的数据采用SPSS17.0软件进行统计分析；正态分布的计量资料以（ ± ）表示，非正态分布时用"Quartile"和"Median"；多组间比较时使用单因素方差分析，组间多重比较采用LSD-t检验；采用 Graph Pad prism5对 4组间血清 TNF-α、CRP水平进行比较；采用Pearson或Spearman对多变量间的相关性进行分析；危险因素采用多元线性回归进行分析；p<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组临床特征及生化指标比较

入组的201名就诊者年龄在37～88岁之间，平均年龄为（63.6±11.2）岁，各组就诊者的性别和年龄差异无统计学意义（p>0.05）。各组WHR比较，B组、C组、D组高于 A组，D组高于 B组、C组（p<0.001）。B组、D组的 SBP高于 A组、C组（p<0.05）。D组的 DBP高于 A组、B组、C组（p<0.05）。B组、D组的 HbA1C、FBG、PBG高于 A组、C组（p<0.05）。B组、D组的 HDL-C、TG高于 A组、C组（p<0.05）。而TC和LDL-C在4组研究对象中差异无统计学意义（ >0.05）（表 1）。

表1 各组临床特征及生化指标的比较Tab.1 Comparison of clinical characteristics and biochemical indexes in each group

2.2 各组血清TNF-α、CRP水平的比较

B组、C组、D组的 TNF-α、CRP均高于 A组（p<0.001），D组的 TNF-α、CRP高于 B组和 C组（p<0.05）。C组的 CRP高于 B组（p<0.05）（图 1）。

图1 不同组间血清TNF-α、CRP水平的比较Fig.1 Comparison of levels of TNF-α and CRP in each group

2.3 TNF-α、CRP与各临床指标的相关性分析

TNF-α 与 BMI、WHR、SBP、DBP、HbA1c、FBG、PBG、TG均呈正相关，与HDL-C呈负相关（ p<0.05）。CRP与BMI、WHR、SBP、DBP、HbA1c、FBG、PBG、TG 均呈正相关，与HDL-C呈负相关（p<0.05）（表2）。

表2 TNF-α、CRP与各临床指标间的相关性分析结果Tab.2 The analysis results of correlation between TNF-α、CRP and clinical indicators

2.4 血清TNF-α、CRP的影响因素分析

分别以 TNF-α、CRP为因变量，以 BMI、SBP、DBP、HbA1C、FBG、PBG、WHR、TG、ALT、HDL-C 为自变量进行回归分析，BMI、FBG、HDL-C为 TNF-α 的影响因素（p<0.001）。BMI、PBG、HDL-C 为 CRP 的影响因素（p<0.001）（表 3）。

表3 TNF-α、CRP的影响素多元线性回归分析Tab.4 Multiple linear regression analysis of influential factors of TNF-α、CRP

3 讨论

本研究结果显示，C组中的血清 TNF-α、CRP水平较A组明显升高，提示C组的人群体内有炎症状态存在。但是该人群并未发生高血压、高血脂或T2DM，这可能和其体内抗炎-促炎因子的平衡状态与D组的不同有关。代谢正常性肥胖的概念是Andres于20世纪80年代提出的[3]，指该人群虽然体型肥胖，但是胰岛素敏感性、血压、脂质代谢以及各免疫激素都处于正常水平的良好代谢状态[4]。2010年，瑞典学者的一项队列研究发现[5]：在观察的30年间代谢正常性肥胖组人群发生心血管病及死亡的风险高于正常体重代谢正常人群。美国的一项队列研究显示发现，代谢正常性肥胖人群发生糖尿病以及心血管病的风险明显低于代谢异常性肥胖人群[6]；我国张弛等[7]对代谢正常性肥胖组人群进行随访发现，约50%的人在1-3年后发生了高血压、血脂异常、血糖升高等代谢性疾病。以上研究均提示C组人群代谢正常但体内存在的炎症状态使其并不完全正常，本研究结果与该结论一致。

正常体重代谢异常的观点由Ruderman提出[8]，该群体BMI处于正常范围但内脏脂肪明显增多，出现高胰岛素血症、糖耐量异常、胰岛素抵抗、甘油三脂升高等代谢异常[9]。2012年国内一项流行病调查显示：正常体重代谢异常人群占正常体重人群的14.8%～23.2%[10]。脂肪细胞的体积增大，局部缺氧，内质网应激和巨噬细胞等炎症细胞浸润和TNF-α、CRP炎症因子分泌是脂肪组织发生炎症反应的主要因素[11]。且多项研究结果表明，B组类人群含有及较多的内脏脂肪，TNF-α、IL-6等促炎因子由脂肪细胞分泌增加，而抗炎因子如脂联素等生成减少，体内促炎-抗炎平衡紊乱，进而导致胰岛素抵抗[12，13]。BMI和 WHR是胰岛素抵抗的独立危险因素。对B组类人群来说，尽管BMI处于正常范围，但是WHR较正常体重代谢正常组明显增高。这类人群患2型糖尿病、冠心病的风险却大大增高[14]。本研究发现 B组血清TNF-α、CRP水平高于 A组，B者虽然BMI正常，但是WHR较A组明显增高。结合以上研究及本研究结果我们推测脂肪分布异常，特别是内脏脂肪的增多是B人群TNF-α、CRP升高，机体出现慢性炎症状态进而发生胰岛素抵抗等代谢异常的主要原因之一。

本研究最主要的结果是，肥胖和代谢因素均可导致血清 TNF-α、CRP 水平升高，BMI、HbA1c、SBP、DBP、WHR、FBG、PBG、TG 水平与血清 TNF-α、CRP含量呈正相关，HDL-C水平与血清 TNF-α、CRP含量呈负相关；B 和 D 组 HbA1c、SBP、DBP、TG、FBG、PBG等指标与正常对照组相比均升高。且进一步研究发现，BMI和FBG水平越高，HDL-C水平越低，血清 TNF-α 水平越高；BMI和 PBG水平越高，HDL-C水平越低，血清CRP水平越高。慢性炎症反应可能是胰岛素抵抗起源的重要因素[15]，肥胖等刺激可促进脂肪细胞分泌IL-6和TNF-α等细胞因子，作用于肝脏导致CRP合成和分泌增加，同时通过抑制胰岛素受体酪氨酸激酶活性而加重胰岛素抵抗，促进巨噬细胞转移抑制因子（MIF）的产生，MIF又可诱导TNF-α的产生，两者共同作用可调节胰岛素作用，调节紊乱时可导致胰岛素抵抗。

综上所述，本研究发现不同肥胖代谢类型，血清TNF-α、CRP水平升高程度不同，提示不同体重代谢亚型的患者体内炎症状态存在差异。此外，本研究证实 BMI、HDL-C、FBG为 TNF-α 的影响因素；BMI、PBG、HDL-C为CRP的影响因素；肥胖和代谢异常均可引起血清TNF-α、CRP升高。虽然本研究不能证实血清TNF-α、CRP水平升高与肥胖和代谢异常的因果关系，但本研究结果提示血清TNF-α、CRP与不同亚型肥胖及代谢异常的发生密切相关。

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