党参黄酮体外抗氧化能力研究

□ 官德莲 西北民族大学生命科学与工程学院

黄酮是一类具有相同结构或性质的物质总称，其具有很好的抗氧化性，可作为营养强化剂添加到食品中，因此其作为一种天然药物引起了人们的广泛重视。党参是桔梗科党参属植物，药用党参在陕西、青海、甘肃、山西和四川等省区均有种植[1]。研究表明党参含有萜类、碳水化合物和苷类、甾体类、黄酮类、木生物碱类、挥发油类、有机酸类等成分[2]，具有较高的药用价值。目前，关于党参的研究主要集中于党参的成分与药理作用，对党参黄酮的研究较少。本研究采用Fenton反应体外评价党参黄酮抗氧化能力，从而为党参黄酮的食品辅料开发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 原料、药品

党参，从淘宝网采购。药品，均为分析纯。芦丁，购于成都曼斯特生物制品有限公司。

1.2 设备

101型电热鼓风干燥箱，北京科伟永兴仪器有限公司生产；DG120型中药材粉碎机，浙江省瑞安市寿海药材器械厂生产；722E型可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司生产；AB204-S型电子分析天平，北京赛多利斯科学仪器有限公司生产；KQ2200DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司生产。

1.3 党参黄酮液的制备

1.3.1 标准曲线的绘制

称取干燥至恒质量的芦丁10.00 mg，加70%乙醇，超声溶解。70%乙醇稀释并定容至50 mL，混匀，得到0.2 mg/mL芦丁标准品溶液。吸取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL和6.0 mL放入7只容量瓶中，再分别加入5% NaNO2溶液1 mL、10%Al（NO3）3溶液 1 mL、5%NaOH溶液10 mL，每加入一个药品均混匀并放置5 min，最后加入70%的乙醇定容至50 mL放置10 min，在510 nm处测定吸光度。获得结果之后，以510 nm处的吸光度（Y）为纵坐标，以样品浓度（x）为横坐标，计算得标准方程Y=10.997 2x-0.003 1，R=0.997。

1.3.2 党参黄酮的提取

党参用清水清洗，60 ℃烘箱干燥至恒质量，采用中药粉碎机粉碎，获得党参粉。称取10.00 g党参粉，按料液比1∶20，加入80%乙醇溶液，超声提取30 min，获得党参黄铜溶液。

1.4 羟基自由基清除能力试验

采 用Fenton反 应， 于a、b 2只10 mL棕色容量瓶中分别加入5 mmol/L邻二氮菲溶液1.5 mL，然后依次加入pH值为7.4的磷酸盐缓冲液1.0 mL。a瓶加入7.5 mmol/L硫酸亚铁1.0 mL及0.1%过氧化氢溶液1.0 mL，b瓶 加 入7.5 mmol/L硫酸亚铁1.0 mL。每加入一种溶液便立刻摇匀，最后以水补充总体积为10 mL，于37 ℃恒温水浴锅中加热1 h，在536 nm处测定吸光值，a为A536（损伤），b为A536（未损伤）。取5个容量瓶，分别加入0.2 mL不同浓度的党参黄酮溶液（0.2、0.4、0.6、0.8 μg/mL和1.0 μg/mL）， 同a瓶 操 作 ，在536 nm处测定吸光值A536（样品）。

羟基自由基清除能力计算公式如下：清除能力=[A536（样品）-A536（损伤）]/[A536（未损伤）-A536（损伤）]×100%。

2 结果与分析

如图1所示，党参黄酮溶液对OH自由基拥有良好的清除能力，而且随着浓度的提高，清除率不断提高。当党参黄酮浓度达到0.8 μg/mL时，清除率达到最大，为45%。不同浓度的党参黄酮提取液之间有显著差异，随着浓度的不断升高，从低浓度0.2 μg/mL升至高浓度0.8 μg/mL，清除OH自由基的能力也在上升。

图1 党参黄酮对OH自由基的清除能力

3 结论

试验结果表明，党参黄酮浓度达到0.8 μg/mL时，对OH自由基的清除率达到最大，为45%。党参总黄酮具有一定的抗氧化能力，但关于党参黄酮类化合物抗氧化能力的研究较少。抗氧化能研究可分为和体内和体外2种，体内研究成本过高，研究人员一般不直接采用这种方法。体外研究较为普遍，研究者可根据其不同用途采用不同方法进行抗氧化能力。