兽肉中氟甲喹残留物检测技术探讨
—— 高效液相色谱质谱法
2018-05-25叶彩平聂荣荣梅州市食品药品监督检验所
□ 沈 洁 叶彩平 聂荣荣 梅州市食品药品监督检验所
氟甲喹是属于喹诺酮类的一种抗菌药物。氟甲喹抗菌谱广，抗菌作用强，特别是对大肠杆菌、支原体、嗜水气单胞菌引起的畜、禽及水生动物疾病有较好疗效。但尽管氟甲喹具有较高的安全性，如果用药不合理，则会在动物体内中大量存积。产品再供人类使用后，会对肝、肾造成损害，危害人类的生命健康。
目前，氟甲喹检测方式各有不同，甚至连样品净化方式都各有不同。有的检测方式增加了检验的时间及难度。笔者通过实验，使用液相色谱质谱联用仪进行检测，大大简化了样品前处理，提高了检测结果的准确性。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
1.1.1 仪器
岛津超高效液相色谱串联四极杆质谱仪（LCMS-8040）、电喷雾离子源、Labsolutions色谱工作站。
1.1.2 标准品
氟甲喹（由中国标准物质中心提供）。
1.1.3 标准溶液的配制
用甲醇将标准品溶解定容，配制成适合使用的标准溶液。
1.2 实验方法
1.2.1 色谱条件：
色谱柱：C18柱，2.0μm，100 mm×2.1 mm。
流动相：乙腈、0.1%甲酸水溶液（45+55，体积比）
梯度洗脱：流速0.3 mL/min；进样量10 μL；柱温3 ℃。梯度洗脱程序见表1。
表1 梯度洗脱程序表
1.2.2 质谱条件
离子源：电喷雾电离源（ESI）。扫描方式：多反应检测（MRM）扫描。锥孔电压：28 V。驻留时间：3.5 msec。
1.2.3 实验步骤
（1）样品前处理。称取2.5 g试样于50 mL塑料离心管中，加入10 m L0.1 mol/LEDTA-Mcllvaine缓冲溶液，用均质器10 000 r/min均质5 min后，再以10 000r/min离心5 min。收集上清液于25 mL比色管中，重复提取两次。HLB固相萃取柱（200 mg，6 mL）依次用3 mL甲醇、6 mL水预淋洗后，将提取到的样品液离心后移取所有样品液上柱，弃去滤液。用3 mL 5%甲醇水溶液淋洗，弃去；再用5 mL甲醇洗脱，收集洗脱液于10 mL刻度试管中。整个固相萃取净化过程控制流速不超过2 mL/min。洗脱液在氮吹仪上吹干。残留物用1 mL 0.1%甲酸水溶解，过0.2 μm微孔滤膜，供测定。
图1 氟甲喹（262.10/202.05）定性离子对图谱
（2）优化。对氟甲喹标准品进行优化，确定母离子、子离子，挑选强度最大的两对母离子与子离子作为定性离子对及定量离子对。负离子模式下优化结果见表2。
上机：将配置好的标准系列容易按浓度由低到高的顺序进样测定。
表2 氟甲喹定性定量离子对
图谱如图1、图2、图3所示。
图2 氟甲喹（262.10/244.1）定量离子对图谱
图3 氟甲喹（TIC+）总离子流图谱
2 结果与讨论
2.1 精密度试验
用标准品进样1.00 μL，重复进样8次，得出各组分相对标准偏差（RSD），见表3。
2.2 添加标准样品回收率实验
取兽肉样品先测出各种兽残值，然后加入标准样品测定其回收率，实验表明回收率均在85%以上，具体见表4。
表3 方法的精密度
表4 回收率测定结果表
3 结论
本文对兽肉样品检验仪器及方法进行改进，采用超高效液相色谱质谱联用仪进行同时检测，加快检测速度，但不影响其峰型及回收率，从而达到快速测定、提高工作效率的目的。
