紫白膏对大鼠创面组织修复及bFGF表达的影响

许圳鹏 赵诚 倪虹

紫白膏是我院院内制剂，在治疗肛肠疾病术后出血、疼痛等相关并发症上有较显著的疗效。本实验将利用动物实验来观察紫白膏是否能通过提高bFGF因子的表达并促进创面愈合的作用。为进一步开发紫白膏的临床价值、拓展其临床应用并更好的应用于肛肠疾病患者提供可靠的依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性SD大鼠40只，8～10周龄，体质量270～310 g，购自福建医科大学实验动物中心。动物生产许可证号码为SCXK（闽）2012-0001，动物自由饮食，饲养于标准动物房内。适应性喂养2周后进行试验。金黄色葡萄球菌（10亿个菌）,（上海鲁微科技有限公司，批号：ATCC6538）。紫白膏来源于福建中医药大学附属人民医院制剂科提供。

1.2 实验方法

1.2.1 创面模型的制作 大鼠背部硫化钠脱毛，常规消毒后在脊柱两侧对称部位做皮肤全层切口，深达筋膜，制成直径约2.5 cm、中心相隔约3 cm创面，纱布压迫止血。创面内点状注入0.6 ml金黄色葡萄球菌（10亿个菌），连续2天，至伤口出现红肿为止，并局部取材做病理组织学检验证实感染形成。

1.2.2 分组处理 造模成功后将40只SD大鼠随机分为2组（紫白膏组20只。凡士林组20只）。紫白膏处理组分别给予紫白膏外用；对照组给予凡士林；所有创面均清洁包扎防污染，分笼饲养，每日换药至伤后14 d或创面完全愈合为止

1.3 观察与监测

观察和比较2组大鼠创面色泽、质地，统计愈合时间、创面愈合率。第3、7、14天取大鼠创面组织做Western-blot检测，观察bFGF因子表达情况。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件进行数据分析，计量资料用表示，进行正态检验，符合正态分布后采用t检验，计数资料用非参数秩和或χ2检验，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠创面bFGF蛋白表达结果

分别提取第3、7、14天肉芽组织总蛋白进行Western blotting分析，研究结果显示，2组均能提高bFGF表达水平，第14天紫白膏组与凡士林组比较，高于凡士林组，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示中药紫白膏能有效提高bFGF含量，有效促进创面新生血管生成（见图1、表1）。

图1 大鼠创面bFGF蛋白表达结果

2.2 大鼠创面愈合时间及愈合率比较

结果如表1所示，紫白膏组与凡士林组比较，愈合时间短于凡士林组，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示中药紫白膏能有效促进创面修复，缩短愈合时间。见表1。

3 讨论

肛肠疾病是发生在肛门与直肠上各种疾病，常见有混合痔、肛裂，肛瘘、肛周脓肿、直肠溃疡、直肠脱垂、直肠黏膜内脱垂等。有相关流行病学报道，肛肠疾病发病率为67%[1]。目前肛肠疾病上网治疗方法有手术疗法，非手术疗法。其中，手术疗法是治疗肛门直肠疾病的主要临床手段。但术后局部组织由于受到不同程度的手术刺激和损伤，肛管局部的静脉、淋巴回流障碍，所以常常出现肛门疼痛、出血、肛缘水肿、创面愈合慢等并发症，对伤口愈合时间也产生了一定的影响[2]。

创面愈合是一个复杂的生理过程，包括了细胞的迁移增殖分化、炎症反应、细胞生长因子分泌，基质沉积和血管形成等，其中多种细胞因子如bFGF、血管内皮生长因子VFGF等对创面愈合起到重要调控作用[3]。近年来，人们通过体内外模型，比较系统地研究了多种生长因子与创伤修复的关系，发现在创伤修复的不同阶段均有生长因子的参与。新生血管化细胞增殖与合成在创面愈合过程中有着重要的作用，是组织修复赖以生存的物质基础，也是创面修复的重要组成部分[4-5]。

生长因子是一类多肽类物质，能通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能。生长因子表达水平的高低直接影响到细胞的增殖、迁移、细胞外基质的合成和释放等。与创面修复有关的生长因子主要包括转化生长因子（transforming growth factor-β，FGF-β）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factors，FGF）、表皮生 长 因 子（epidermalgrowth factor，EGF） 等[6]。Hu M 等[7]在bFGF对肺癌预后价值的Meta分析中提出：bFGF能刺激血管新生，从而影响肿瘤细胞的增殖、迁移和生存。Zhang X等[8]在OSM增强血管和改善心肌梗死后心功能的研究中也提出了上述类似观点，bFGF能促进创面微血管形成，改善供血、供氧，从而对创面组织的修复和生长有明显的促进作用。

本课题研究中，两组均能提高bFGF表达水平，第14天紫白膏组与凡士林组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示中药紫白膏能有效提高bFGF含量，有效促进创面新生血管生成。同时在创面愈合时间对比上，紫白膏组优于凡士林，差异有统计学意义（P＜0.05）。说明紫白膏能有效提高bFGF生物学含量及活性，促进创面修复，缩短愈合时间。

综上所述，通过紫白膏外用能上调bFGF含量，促进创面新生血管生成，促进创面的愈合。从而为紫白膏治疗肛肠术后方面提供了理论依据。

表1 大鼠创面愈合时间及愈合率比较

表1 大鼠创面愈合时间及愈合率比较

注：与凡士林组比较，*P＜0．05

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[1] 黄晨容，何永恒． 肛肠病普查7102例结果分析[J]． 中国基层医药，2012，19（6）：831

[2] 赵军超，陈明，周金凤，等． 生肌痔疮膏治疗混合痔术后40例临床观察[J]． 江苏中医药，2011，43（5）：55

[3] 李京佳，林相国，许涛，等．VFGF家族及其在肿瘤生长中作用的研究[J]．现代生物医学进展，2012，12（4）：701，777-779．

[4] Yoo SY，Kwon SM． Angiogenesis and its therapeutic opportunities[J]．Mediators Inflamm，2013，2013：127170．

[5] Lancerotto L，Orgill DP． Mechanoregulation of Angiogenesis in Wound Healing[J]． Adv Wound Care（New Rochelle），2014，3（10）：626-634．

[6] 姜珠倩，吴宝玉，苏永华． 中医药促进创面生长因子分泌的研究进展[J]． 中华中医药杂志，2015，30（2）：485-487

[7] Hu M，Hu Y，He J，et al． Prognostic Value of Basic Fibroblast Growth Factor（bFGF） in Lung Cancer：A Systematic Review with Meta-Analysis[J]． PLoS ONE，2016，11（1）：e0147374．

[8] Zhang X，Zhu D，Wei L，et al． OSM Enhances Angiogenesis and Improves Cardiac Function after Myocardial Infarction[J]． Biomed Res Int，2015，2015：317905．