慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T 淋巴细胞亚群变化情况及其针对性治疗措施分析

（东莞市第三人民医院检验科，东莞 523326）

近年来我国免疫学理论研究深度不断增加，医学界也因此发现慢性肝炎并非由病毒直接损伤肝组织所致，而是由于机体免疫系统过度反应导致[1]。在此基础上结合大量的临床资料发现，慢性肝炎患者大都出现免疫不同程度受损，其中以T细胞表达变化最为显著，因此国内外研究人员逐渐将研究的热点放在慢性肝炎患者免疫失调机制上并取得可喜成果，为此我院也对慢性肝炎患病机制及治疗进行了积极探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1月-2016年10月到我院进行治疗的43例慢性乙肝患者为研究组，另选取43例健康人作为对照组。纳入标准：①依据临床诊断标准已确诊为慢性肝炎的患者；②身体各项指标均达到本研究标准的患者；③无其他类型肝炎疾病的患者；④知情并同意配合此项研究的所有患者。排除标准：①未完整参与研究的患者；②合并严重免疫缺陷或心脑疾病的患者；③合并精神类疾病以至于不能正常进行沟通且不能配合治疗的患者。④对本研究治疗所用药物过敏的患者。研究组中，年龄31岁-85岁，平均年龄（42.4±2.16）岁。对照组中，年龄32岁-84岁，平均年龄（41.6±2.33）岁。两组患者的一般资料间差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。本研究已经通过我院医院伦理委员会的批准。

1.2 方法 自患者入院时分别采集患者静脉血5 mL，应用流式细胞仪（美国BD公司，FACSCaLibur流式细胞分析仪）及其配套试剂检测患者外周T淋巴细胞亚群表达情况，并应用荧光定量PCR法检测患者体内HBV DNA表达情况。所有患者均进行肝组织活体检测，并对患者肝组织进行免疫组织化学染色。

1.3 观察指标 根据患者肝组织单个核细胞染色情况进行CD4、CD8表达水平评定: 若细胞未显色即为阴性，用”-”表示；若患者细胞400倍视野下显棕色或深棕色数量≤20个即为阳性，用”+”表示；若患者细胞400倍视野下显深棕色数量＞20个即为强阳性，用”++”表示。采用相关仪器进行外周T细胞亚群的检测，所有操作均由一组专业医师进行，以确保检测结果的准确性。最后对患者HBV DNA表达情况进行认真记录分析。

1.4 统计学方法 数据应用SPSS 18.0进行分析，计量资料采用均数±标准差（Mean±SD）表示，采用t检验。计数资料采用率（%）表示，采用卡方检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 外周血CD27+CD28+T细胞亚群对比 研究组患者T细胞亚群显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 外周血T淋巴细胞亚群对比 研究组患者T细胞亚群表达显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

3 讨论

肝细胞生理病变在延迟超敏反应中主要以CD3+、CD4+作为主要免疫T细胞发挥免疫作用，在机体内其可借助淋巴因子的释放引起部分炎症反应而引起体内目标靶细胞的损伤[2]。CD3+以及CD8+则主要作为T细胞毒性反应的效应细胞存在，其作用机制主要为借助细胞浆颗粒释放穿孔素而导致靶细胞受损，慢性乙型肝炎主要是T细胞介导的免疫损害毒疾病。相关研究人员[3]还发现机体感染病毒初期，患者体内各种病毒感染初期，CD3+特异性分化类型均为早期初始型危害相对较小，而后随着感染程度的不断加深患者体内T细胞开始相不同方向分化。对比分析两组患者肝组织免疫表达情况，结果发现研究组患者体内CD4以及CD8表达程度显著高于对照组患者（P＜0.05）。这主要是因为慢性肝炎患者在疾病发展后期，大量的T细胞会大量破坏已经病变了的肝细胞，导致肝组织严重受损造成外周T细胞亚群大量减少。国内外研究人员[4]发现免疫性缺陷疾病CD8+细胞多为致病机制不明确的的中期亚群，CD27以及CD28分子在成熟T细胞表面分布最为广泛，而CD28分子则主要分布在B细胞表面抗原，主要作用为与细胞表面活性分子B7结合，以便激活患者体内T细胞发生免疫应答。除此之外，CD27分子在体内会和CD70特异性结合，以第二转导信号的方式间接促进T细胞增值分化。研究表明当机体CD8+T淋巴细胞被特异性激活后，便会释放特异性因子启动CD27和CD28进行分化，最后分化为具有效应细胞相关功能的CD8+CD27-和CD8+CD28-，这种细胞会释放IFN-γ、TNF-α细胞因子，导致肝组织出现不同程度的损坏。本研究比较了健康人与慢性肝炎患者外周血CD27+CD28+T细胞亚群表达情况，结果显示研究组患者T细胞亚群显著低于对照组（P＜0.05）。

慢性肝炎病毒感染患者发病时间长，发病初期到疾病后期患者体内病毒含量不会出现较大波动，但机体免疫因子会被长期消耗，最终导致免疫应答系统出现严重损伤，在人体微环境的表现上则为T淋巴细胞含量的减少。目前医学上普遍认为人体免疫系统对维持机体内环境的稳定具有重大意义，其不但可以抵御外来物质的入侵还可以对已入侵物质进行清除并对人体内环境进行实时监控[5]。慢性肝炎病毒作用机制独特，其通过对免疫因子的长时间消耗和对免疫系统的持续刺激，导致机体防御系统处于低敏感状态，以至于患者体内病毒不能被完全清除形成恶性循环。保护机体免受病原微生物侵害，慢性肝炎患者处于免疫耐受状态，免疫功能低下，导致体内病毒无法彻底清除。慢性肝炎患者发病初期体内CD3+细胞百分率并无显著异常，但在疾病发展后期患者体内CD3+含量明显降低，这说明患者体内免疫系统已经受到严重损害。本研究特地对比了慢性肝炎患者体内CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+T细胞亚群表达情况，结果显示研究组患者T细胞亚群表达情况显著低于对照组（P＜0.05），这与相关研究人员的结果一致。T淋巴细胞为人体免疫系统最为特殊的免疫细胞，其表面具有数量巨大、种类繁多的各种蛋白质，每类蛋白质都具有其特定的生理功能，有的分化为效应细胞，有的则直接分化为记忆细胞。

综上所述，慢性乙型病毒性肝炎患者相对于健康人外周血T淋巴细胞亚群会出现明显变化，运用干扰素以及核苷酸药物治疗具有显著优势，在临床上应该进一步推广。

表1 两组患者会体内外周血CD27+、CD28+ T细胞亚群对比分析（Mean±SD，分）

表2 两组患者外周血各类T淋巴细胞亚群对比分析（Mean±SD, %）

参考文献

1 江若霞, 赵丽敏, 姚宏建, 等. 乙型病毒性肝炎患者T淋巴细胞亚群及免疫因子变化研究[J]. 中华医院感染学杂志, 2016,26(13): 2884-2886.

2 余敏, 王立坤. 干扰素联合核苷类药物对乙肝患者外周血T淋巴细胞亚群表达改变的相关性研究[J]. 中国临床药理学杂志, 2016, 32(5): 415-417.

3 李志坚, 石正琪, 招文颖. 卡介菌多糖核酸联合咪唑斯汀对慢性荨麻疹的疗效及对患者外周血T淋巴细胞亚群的影响[J]. 皮肤性病诊疗学杂志, 2014, 21(4): 319-321.

4 陈轶, 陈益耀, 韩向阳, 等. 乙型肝炎病毒感染患者外周血T细胞亚群的表达特征与相关性研究[J]. 中华医院感染学杂志, 2016, 26(5): 979-981.

5 曾志励, 吴健林, 吴继周. 乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2012, 38(3): 555-558.