苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配防治稻曲病

胡茂林�┗葡�冬 罗来鑫 李健强

摘要

为筛选防治稻曲病的杀菌剂，本文测定了苯醚甲环唑、烯肟菌胺单剂以及不同比例的混配制剂对稻曲病菌的毒力和联合毒力，并选择具有增效作用的混配药剂进行了田间防效试验。结果表明：苯醚甲环唑和烯肟菌胺按9∶1混配对稻曲病菌的抑制作用最强，EC50为0.11 μg/mL，共毒系数最大，达182.91，显示二者按该比例混配具有增效作用。选择该配比加工的复配制剂5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺微乳剂进行田间药效试验，结果表明，喷雾量为有效剂量（下同）180 g/hm2时，其病穗防效达79.89%，病粒率防效达81.94%，高于5%烯肟菌胺水剂75 g/hm2和对照药剂2.5%井冈霉素·100亿枯草芽孢杆菌水剂112.5 g·4.5×1013/hm2处理，与25%苯醚甲环唑乳油和对照药剂300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑乳油均无显著差异。分析认为，5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME可望作为稻曲病防治药剂进行示范和验证试验。

关键词

稻曲病； 苯醚甲环唑； 烯肟菌胺； 复配

中图分类号：

S 432.4

文献标识码： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2017322

Control effect of difenoconazole， SYP1620 and their mixture on

rice false smut disease

HU Maolin1，3， HUANG Xiaodong2， LUO Laixin3， LI Jianqiang3

（1. College of Agriculture， South China Agricultural University， Guangzhou 510642， China；

2. Institute of Vegetables and Flowers， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China；3. College of Plant Protection， China Agricultural University， Beijing 100193， China）

Abstract

In order to select effective fungicides for the control of Ustilaginoidea virens， toxicities of difenoconazole， SYP1620 and their mixtures were tested in vitro.The mixture with synergistic effect was used in the field experiment.The results showed that the mixture of difenoconazole and SYP1620 at the proportion of 9∶1 had the best inhibition against U.virens with the EC50 value of 0.11 μg/mL and cotoxicity coefficient of 182.91.The control efficacy of difenoconazole·SYP1620 5% ME（9∶1） 180 g/hm2 was 79.89% calculated from diseased panicle rate and 81.94% calculated from diseased kernels， which was better than that of SYP1620 5% AS 75 g/hm2 and jingangmycin·100 billion Bacillus subtilis 2.5% AS 112.5 g·4.5×1013 spore/hm2，but no significant difference with difenoconazole 25% EC and difenoconazole·propiconazole 300 g/L EC.Therefore， the mixed formulation of difenoconazole and SYP1620 5% ME could be applied to control rice false smut disease.

Key words

Ustilaginoidea virens； difenoconazole； SYP1620； complex formulation

稻曲病是水稻生產过程中的一种重要病害，在世界各水稻产区均有发生[13]。自20世纪80年代以来，随着我国水稻品种不断更替、杂交稻种植面积扩大以及栽培方式的变化，稻曲病的发生呈现逐年加重趋势，现已发展成为我国水稻上最重要的病害之一[45]。目前，国内外主要依赖化学杀菌剂对稻曲病进行防治。同一稻作区连续多年使用单一化学药剂防治，容易导致稻曲病菌抗药性的产生，使防治效果降低。如何开发新型药剂，是当前预防控制稻曲病急需解决的难题。农药复配剂是研制、开发农药新品种的重要组成部分[67]。苯醚甲环唑是一种安全高效的三唑类内吸性广谱杀菌剂，具有保护、治疗和内吸活性，是甾醇脱甲基化抑制剂，通过抑制细胞壁甾醇的生物合成，阻止真菌的生长；其毒性低，同时具有高效、广谱、低残留、持效期长等特点，因此可在田间应用，充分发挥其保护作用而达到预防病害发生的目的[89]。目前在水稻上该药剂主要同丙环唑、井冈霉素和咪鲜胺复配防治稻曲病[1011]。烯肟菌胺是以天然抗生素strobilurin为先导化合物开发的杀菌剂新品种，属于甲氧基丙烯酸酯类。它通过阻止细胞色素b和c之间的电子传递抑制线粒体的呼吸作用而最终达到杀菌目的；其杀菌谱广、杀菌活性高、具有保护及治疗作用[12]。目前在水稻上该药剂主要以20%烯肟·戊唑醇SC的混配形式登记用于防治稻曲病，但还未见有苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配研究的相关报道。

本研究拟通过对苯醚甲环唑和烯肟菌胺两种不同作用机制的药剂进行科学复配，开展室内联合毒力测定并进行田间药效试验，筛选出对稻曲病具有明显防效的新型配方制剂，以期提高病害防治的安全性和有效性，以及延缓稻曲病菌抗药性的产生。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试药剂

95%苯醚甲环唑原药（TC），由江苏七洲绿色化工股份有限公司提供；98%烯肟菌胺原药（TC），由沈阳化工研究院提供；300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑乳油（EC），商品名爱苗，购于湖北信风作物保护有限公司；2.5%井冈霉素·100亿枯草芽孢杆菌水剂（AS），商品名纹曲宁，购于江苏苏科农化有限责任公司；25%苯醚甲环唑乳油（EC），购于江苏兴邦大化集团化工有限公司；99%水杨肟酸购于Sigma公司；二甲基亚砜，分析纯，购于北京广达恒益科技有限公司。5%烯肟菌胺水剂（AS）和5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺微乳剂（ME）为本研究室配制。

1.1.2 供试菌株及培养基

稻曲病菌菌株UV2由江苏省农业科学院植物保护研究所陈志谊研究员赠予；PSA培养基（马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂16 g，去离子水1 000 mL）。

1.2 试验方法

1.2.1 苯醚甲环唑与烯肟菌胺混配药剂对稻曲病菌的室内联合毒力测定

混配药剂的配制：将苯醚甲环唑与烯肟菌胺原药分别溶于二甲基亚砜（分析纯）中，配成1.0×104μg/mL母液备用。将苯醚甲环唑和烯肟菌胺母液按照10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9和0∶10共11个比例混合，配成混合母液；用二甲基亚砜将各混合母液稀释成不同浓度的混配药剂。在预试验的基础上，将各混配药剂浓度设置为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4和0.8 μg/mL。

混配药剂对稻曲病菌的室内联合毒力测定：取菌龄为15 d，直径为5 mm的菌饼，分别接种于含有系列浓度混配药剂的PSA培养基平板上。同时，在所有处理当中均添加10 μg/mL的水杨肟酸，以含等量浓度为1 μL/mL二甲基亚砜和10 μg/mL的水杨肟酸处理为对照，各处理重复3次。28℃黑暗条件培养15 d后，十字交叉法测量菌落直径，求出各处理对菌丝生长的抑制百分率、毒力回归方程Y=aX+b、有效抑制中浓度EC50（μg/mL）及相关系数r。采用孙云沛方法计算混配药剂的共毒系数（CTC），评价混配药剂的联合作用类型。

抑制率=（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-菌饼直径）×100%；

单剂毒力指数=标准药剂EC50/供试单剂EC50×100；

混剂实测毒力指数ATI=标准药剂EC50/供试混剂EC50×100；

混剂理论毒力指数TTI = A的毒力指数×A在混剂中的百分含量（%）+ B的毒力指数×B在混剂中的百分含量（%）；

共毒系数CTC = ATI/TTI×100。

CTC≤80，为拮抗作用，80

1.2.2 苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配剂的田间药效试验

按照1.2.1试验获得的苯醚甲环唑和烯肟菌胺最佳配比配制5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME。

试验共设12个处理：5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME 有效剂量（下同）75、120、180 g/hm2；25%苯醚甲环唑EC 90、105、120 g/hm2；5%烯肟菌胺AS 37.5、56.25、75 g/hm2；300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑EC 67.5 g/hm2；2.5%井冈霉素·100亿枯草芽孢杆菌AS 112.5 g·4.5×1013/hm2和不施药的空白对照。每个处理4次重复，共计48个小区，随机区组排列，每个小区20 m2，总计960 m2。试验点选在湖南省常德市汉寿县，水稻栽培品种为‘丰源优299。

施药方法：采取均匀喷雾处理。称取每处理4次重复所需的药剂，按照每公顷兑水750 L用药量配制药液，利用喷雾器在水稻破口前5～9 d和抽穗始盛期，分别施药1次，施药时间均选择在下午16：00左右，若施药后12 h内遇雨天，第二天选择补施。

供试稻田田间管理：供试稻田田间管理在虫害管理方面按照正常的管理进行。试验期间不再使用其他化学药剂防治真菌病害。田间栽培管理按照当地高产栽培方式进行。

调查方法：于第二次施药后14 d调查1次。每小区随机5点取样，每点随机调查5穴，共查100穴/处理，记录各处理病穗率、病粒率，并计算防效。

病穗（粒）率=[病穗（粒）数/调查总穗（粒）数]×100%；

防治效果=（空白对照区病穗（粒）率-药剂处理区病穗（粒）率）/空白对照区病穗（粒）率×100%。

2 结果与分析

2.1 苯醚甲环唑与烯肟菌胺混配药剂对稻曲病菌的联合毒力

苯醚甲环唑和烯肟菌胺11个不同配比的混配药剂对稻曲病菌的毒力测定结果见表1。结果表明，苯醚甲环唑和烯肟菌胺按9∶1比例配比对稻曲病菌的抑制作用最大（图1），EC50为0.11 μg/mL，共毒系数为182.91，表现为增效作用；其次为8∶2比例配比，EC50为0.16 μg/mL，共毒系数为126.59，亦表现为增效作用；按7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7和2∶8比例配比時，混配药剂对稻曲病菌的EC50在0.17～0.40 μg/mL之间，均表现为加和作用；按1∶9比例配比时，对稻曲病菌的抑制作用最小，EC50为0.48 μg/mL，共毒系数为48.10，表现为拮抗作用。

2.2 苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配的田间防治效果

综合评价室内联合毒力测定结果，选择9∶1作为苯醚甲环唑和烯肟菌胺的最佳复配比例，制备5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME用于田间药效试验。结果（表2）显示，25%苯醚甲环唑EC 120 g/hm2的病穗防效最好；其次为300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑EC 67.5 g/hm2；5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME 3个施用剂量当中，180 g/hm2用药量处理的病穗防效最好，达到79.89%，病粒率防效超过81%，与对照药剂300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑EC 67.5 g/hm2相当，且其防效高于单剂5%烯肟菌胺AS所有的剂量处理和对照药剂2.5%井冈霉素·100亿枯草芽孢杆菌AS，与单剂25%苯醚甲环唑EC的3个剂量处理和对照药剂300 g/L苯醚甲环唑·丙环唑EC 67.5 g/hm2处理均无显著差异；混配制剂成本比单独使用苯醚甲环或烯肟菌胺大大降低，说明苯醚甲环唑和烯肟菌胺按照9∶1混配的5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME对稻曲病具有明显的防治效果。

3 结论与讨论

苯醚甲环唑与烯肟菌胺具有不同的作用机制[1317]，两者复配有利于扩大病害防治谱，延缓抗药性的发生发展。本试验对两种供试药剂室内联合毒力测定结果表明，苯醚甲环唑和烯肟菌胺按9∶1和8∶2两种比例配比时表现为增效作用。综合考虑田间实际用药量的需要及室内联合毒力测定结果，选择9∶1作为苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配制剂的最佳复配比例，并按此比例进行复配制剂的制备。

对复配制剂5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME的田间防病效果进行了检验。综合考虑田间防效、有效成分用量成本及抗药性产生的风险等情况，推荐5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME的最佳施用浓度为180 g/hm2，每公顷兑水750 L配制药液，利用喷雾器在水稻破口前5～9 d和抽穗始盛期分别喷雾1次，施药时间选择在下午16∶00左右进行，若施药后12 h内遇雨天，第二天补施一次。

目前，苯醚甲环唑主要与丙环唑、井冈霉素和咪鲜胺进行复配登记防治稻曲病，烯肟菌胺主要与戊唑醇进行复配防治稻曲病[1820]，而未见有苯醚甲环唑与烯肟菌胺进行复配的报道。通过不同作用机制药剂的混配及新型药剂的应用，有利于扩大防治谱、延缓抗药性的产生。因此，5%苯醚甲环唑·烯肟菌胺ME作为稻曲病防治及延缓和治理稻曲病菌抗药性发生发展的混配制剂具有较好的推广应用潜力。然而，为进一步明确苯醚甲环唑与烯肟菌胺复配对稻曲病的防治效果，仍需开展连年多点田间试验。

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（責任编辑：杨明丽）