400 g/L二噻农·肟菌酯悬浮剂的高效液相色谱分析

2018-05-12冯宇杰俞霖洁王晨茜吴航俊

浙江化工 2018年4期

冯宇杰，俞霖洁，王晨茜，吴航俊

（浙江省化工研究院有限公司，浙江杭州 310023）

0 前言

二噻农，又称二氰蒽醌，是德国Merck公司于20世纪60年代开发的杀菌剂品种，可防治多种真菌性病害，特别是对炭疽病效果显著。肟菌酯，又名肟草酯，是甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，对真菌纲病害如白粉病、锈病、颍枯病、稻瘟病等均有良好的活性[1]。目前，有关二噻农的检测方法主要有高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法[2-3]，有关肟菌酯的检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法和超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法[4-6]，关于二噻农和肟菌酯复配制剂的分析方法未见报道。

本文采用Inertsil ODS-3色谱柱和二极管阵列检测器，建立了二噻农和肟菌酯同柱分离测定的高效液相色谱方法。该方法操作简便、快速准确，可作为企业产品质量控制和质检机构质量检测的参考方法。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Dionex U3000高效液相色谱仪：具二极管阵列检测器、自动进样器和Chromeleon 7.0色谱处理工作站；色谱柱：Inertsil ODS-35 μm， 4.6×250 mm不锈钢柱；乙腈：色谱纯，临海市浙东特种试剂有限公司；水：二次蒸馏水；二噻农标样：99.0%，德国 Dr.Ehrenstorfer；肟菌酯标样：99.0%，国家农药质检中心（定值）；400 g/L二噻农·肟菌酯悬浮剂：由某企业提供。

1.2 溶液配制

标准溶液：分别称取二噻农、肟菌酯标样约0.018 g（准确至0.0002 g），置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀。

样品溶液：称取约0.1 g（准确至0.0002 g）400 g/L二噻农·肟菌酯悬浮剂样品，置于50 mL容量瓶中，先用约3 mL水将样品分散，再用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜过滤后待用。

1.3 色谱条件

流动相：φ（乙腈+水）=70+30；进样量：5 μL；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；检测波长：254 nm。

1.4 测定步骤

1.4.1 测定

在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标准溶液。计算各针相对响应值，待相邻两针的相对响应值小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.4.2 计算

将测得的2针试样溶液以及试样溶液前后2针标样溶液中二噻农（或肟菌酯）的峰面积分别进行平均。试样中二噻农（或肟菌酯）的质量分数X/%按下式计算：

式中：A1——2针标样溶液中二噻农（或肟菌酯）峰面积的平均值；

A2——2针试样溶液中二噻农（或肟菌酯）峰面积的平均值；

m1——标样的质量，g；

m2——试样的质量，g；

p——标样中二噻农（或肟菌酯）的质量分数，%。

2 结果和讨论

2.1 色谱条件的选择

通过Dionex U3000液相色谱仪配置的二极管阵列检测器的光谱数据采集功能，获得的二噻农与肟菌酯紫外吸收谱图见图1。从图1可知，二噻农在200 nm和236 nm处均有较大吸收，肟菌酯在190 nm、253 nm处有较大吸收。经过实验比对，选择254 nm作为最佳检测波长，在此波长下峰形良好，二噻农和肟菌酯紫外吸收比例合适，无杂质干扰。

图1 二噻农（a）和肟菌酯（b）的紫外吸收光谱图

根据二噻农与肟菌酯的性质，选择乙腈溶解样品，以不同比例的乙腈和水，对其进行有效分离。当φ （乙腈+水）=70+30，流速为1.0 mL/min时，两组分能得到很好的分离，峰形尖锐，对称，基线平稳，保留时间适中，分别为二噻农约6.3 min，肟菌酯约11.5 min，见图2。

图2 肟菌酯（a）和二噻农（b）的标样溶液液相色谱图

2.2 方法线性关系

分别称取二噻农和肟菌酯标准品0.15 g（准确至0.0002 g），置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀。用移液管分别准确移取2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、10.0 mL 上述溶液于5个50 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀。按照1.3色谱操作条件，分别进样进行测定。以二噻农（肟菌酯）质量浓度为横坐标，二噻农（肟菌酯）峰面积为纵坐标，绘制线性相关曲线（见图3）。计算得二噻农线性回归方程为y=215.62x-0.6477（R2=1.0000），肟菌酯线性回归方程为y=146.2x-0.029（R2=1.0000）。

图3 二噻农（a）和肟菌酯（b）的线性关系图

2.3 方法准确度

取400 g/L二噻农·肟菌酯悬浮剂样品，准确测定其中二噻农与肟菌酯质量分数。再称取5份样品，分别准确加入一定量的标样，根据称取样品量和加入标样量计算出二噻农和肟菌酯的理论含量。按照1.3色谱操作条件，进样分析，获得二噻农和的肟菌酯实测含量。测得二噻农回收率在98.9%～100.3%之间，平均回收率为99.5%，肟菌酯回收率在99.1%～100.6%之间，平均回收率为99.8%，结果见表1。