大白菜中农药多残留GC-MS方法的确认过程

施雨彤

北京市西城区食品药品监督管理局食品药品安全监控中心

1. 前言

食品农药残留指农药施用后残存于食品表面及渗透到内部的微量农药。除农药本身外，也包括其有毒代谢物和杂质。农药残留是施药后的必然现象，但如果超过最大残留量标准，就会对人畜产生不良影响或通过食物链对生态系统中的生物造成毒害。当前，一些非法分子非法使用禁用农药、超量使用农药或未到安全间隔期提前上市销售，使得农药成为当前影响蔬菜和水果类食品安全的主要污染物，它通过食物链传递富集后进入人体，构成了对人体健康的伤害，是当前食品安全迫切需要解决的问题。水果蔬菜农残例行监测是食品安全风险监测的一部分，本文实验采用大白菜作为样本基质，按照农业部的行业标准《蔬菜、水果中51种农药多残留的测定 气相色谱-质谱法》（NY/T 1380-2007）操作，验证了方法的可行性。

2. 实验条件

2.1 主要试剂及标准品

2.1.1 试剂

乙腈（色谱纯）、冰乙酸、无水乙酸钠、无水硫酸镁、键合硅固相萃取吸附剂PSA、键合硅固相萃取吸附剂C18、

3-乙氧基 1，2-丙二醇溶液、D-山梨醇。除非另有说明，分析中仅使用分析纯试剂和GB/T 6682中规定的一级水。

2.1.2 标准品（100µg/mL）：速灭磷等8种农药.

2.1.3 标准品（1000µg/mL）：敌敌畏等33种农药。

2.1.4 内标(三苯基磷酸酯TPP）储备液（1000µg/mL）。

2.2 试剂溶液及标准溶液配制

2.2.1 试剂溶液

2.2.1.1 冰乙酸-乙腈溶液：1mL冰醋酸加乙腈定容至1000mL。

2.2.1.2 乙氧基-丙二醇溶液：3-乙氧基1,2-丙二醇2g用乙腈溶解稀释至5mL。

2.2.1.3 山梨醇溶液：1g山梨醇加30mL水振荡溶解，用乙腈稀释至50mL。

2.2.1.4 分析保护剂混合溶液：乙氧基-丙二醇溶液5mL和山梨醇溶液5mL混合。

2.2.2 标准溶液配制

2.2.2.1 内标物工作液：移取10µL内标储备液于10mL容量瓶中，用乙腈定容。

2.2.2.2 农药标准工作液：根据需要系列稀释至5µg/mL～20µg/mL、1µg/mL～4µg/mL等各种浓度的农药标准工作液，避光4℃保存，可使用1个月。

2.2.2.3 农药混合标准溶液：将100µL内标工作液、100µL分析保护剂混合溶液和100µL相应浓度的混合标准工作液，分别加到1mL容量瓶中，用乙腈准确定容至刻度。

2.3 主要仪器

气相色谱-质谱仪（Agilent 7890B/5977A），匀浆机、高速冷冻离心机、氮吹仪。

2.4 检测条件

2.4.1 气相色谱端仪器参数

色谱柱：Agilent HP-5MS 30m×0.250mm×0.25µm；柱温箱升温程序：初温60℃，保持1min，以40℃/min的速率上升到170℃，再以10℃/min的速率升温到310℃，保持3min；进样口温度：280 ℃；载气：氦气，流速 1.0 mL/min；进样方式：不分流；进样量：2µL。

2.4.2 质谱端仪器参数

电离方式：电子轰击电离源EI；离子源温度：280℃；扫描方式：SIM。扫描分组见下图：

2.5 样品处理

2.5.1 提取：准确称取试样15g于50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入15mL冰乙酸-乙腈溶液，6g无水硫酸镁，1.5g无水乙酸钠，剧烈振荡1min后，5000r/min离心1min。

2.5.2 净化：称取0.1gSPA、0.1gC18、0.3g无水硫酸镁置于5mL具塞离心管中，吸取上述上清液2mL至此离心管中，涡旋混合1min，5000r/min离心1min，移取上清液1mL于1mL容量瓶中。

2.5.3 添中内标物和分析保护剂溶液：将上述容量瓶放在氮吹仪上，缓缓通入氮气，室温下浓缩至低于0.8mL，分别准确添加0.8µL内标工作液和0.8µL分析保护剂混合溶液，用乙腈定容至1.0mL，在涡旋振荡混匀，待测。

2.6 结果计算和表述

试样中农药的残留量以质量分数ω计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）计算。

ρs——标准溶液质量浓度（mg/L）；Vx——待测液进样体积（µL）；

Vs——标准溶液进样体积（µL）；Aix——样品溶液中内标物的峰面积；

Ax—— 样品溶液中内标物的峰面积；As——标准溶液中农药的峰面积；

Ais——标准溶液中内标物的峰面积； m ——试样质量（g）。

V0——试样溶液最终定容体积（mL）；F——分取体积/提取液体积。

3. 实验数据

3.1 保留时间的确定

3.1.1 十种离子相同的农药保留时间的确定

3.1.2 四十一农药保留时间明细表（以定量离子计）

?

3.2 四十一种农残SIM分段扫描的总离子流积分色谱图

?

3.3 加标回收及精密度实验

采用大白菜作为加标基质，在10、20、40、100ppb四个点进行四水平加标，每个点做6个平行，每个点的6个平行数据计算RSD值，选用其中3个平行数据用于计算加标回收率。

?

3.4 检出限

采用空白样品基质，分别添加0.2ppb、1.0ppb、2.0ppb、5.0ppb、10.0ppb共五个浓度的41种农残混标溶液，再分别按照本方法平行进样10次，用仪器自带信嗓比功能，计算信嗓比。要求信噪比≥3符合要求。最终结果，实际检出限均低于或等于标准规定的检出限。

?

3.5 结论

实验数据回收率范围均在60～120%内，RSD≤15%，符合《实验室质量控制规范 食品理化检测》（GB/T-2008）的要求。在上述41种农药残留量的检测上，采用气相-质谱GC-MS联用仪器，通过定性离子、定量离子及出峰时间进行综合定性，通过定量离子内标法定量，避免了单独采用气相色谱仪出峰时间重叠的问题，准确度、精密度均能达到满意效果。

以上方法还存在一些不足，谨供同行专业人士们参考，作为抛砖引玉之用。随着国家对食品安全的不断重视以及果蔬例行监测的普及，对于农药残留检测的准确度和检测效率方面的要求也在不断提高。由于目前我国缺少完善的农残检测和认定体系，对于农药残留的监管存在职能不清的问题，特别是农药残留监管和检测人员整体专业技能偏低，工作经验较少，学习交流机会有限。在这种形势下，更加迫切地需要尽快健全农残检测体系，加强专业队伍的建设，通过把好从田间到餐桌的每一道安全关，保障蔬菜水果类食品的质量安全。

[1]丁昌东,潘志远.我国农残标准浅析[J].农业质量标准.2008(5):23-25.

[2]GB/T 8855-2008/ISO874：1980,新鲜水果和蔬菜 取样办法[S].

[3]NY/T 1380-2007,蔬菜、水果中51种农药多残留的测定 气相色谱-质谱法[S].

[4]GB/T 27404-2008,实验室质量控制规范 食品理化检测[S]