哺乳仔猪断尾消毒不严引起链球菌性脊柱脓肿

刘梦志 ， 姚龙泉 ， 罗桂燕 ， 王 莹 ， 刘宝山

(1. 沈阳农业大学畜牧兽医学院 ，辽宁 沈阳 110866 ； 2.沈阳信科农业技术有限公司 ，辽宁 沈阳 110161)

猪链球菌病是由链球菌引起的一种猪多系统感染的疾病，在猪场常见多发。该病一年四季均可发生，潮湿多雨季节多发。环境卫生条件差、消毒措施不力、营养不良、猪舍湿度过高等因素是该病高发的主要诱因。临床上除出现急性败血症、脑膜炎、肺炎、心内膜炎等症状外，还引起现在猪场中常见的关节炎[1-2]。这种链球菌性关节炎多发生于保育猪和育肥猪，作者在临床诊疗中确诊1例因断尾后消毒措施不严引起哺乳仔猪后肢瘫痪、脊柱脓肿的链球菌感染，具有链球菌感染的特殊性。报告如下。

1 猪场管理保健

仔猪出生正常，1日龄1头份伪狂犬疫苗滴鼻，3日龄补铁剪牙。7日龄断尾，断尾后仅用2%高锰酸钾溶液涂擦消毒。

2 发病情况

15～20日龄仔猪出现后肢跛行、瘫痪，前肢正常，常拖动后肢爬行，体温前期正常，后期发热，体温40 ℃左右，病程1～2周，发病猪80%死亡。无其他可见临床症状。

3 剖检变化

剖检大多数器官组织正常，仅见肺脏有轻微出血点，胸腔内个别脊椎关节的外侧出现明显的肿大、突起和增生、质地较软，用注射器可吸出浅黄绿色液体，切开后可见有豆腐渣样脓液(见中插彩版图1)，剖检两例均相似，只是脓肿的大小程度稍有不同。

4 实验室诊断

4.1 微生物学诊断 无菌采取脓液样品，接种链球菌鉴别培养基—BETA-SSA琼脂，37 ℃ 培养18 h，可见特征性的小菌落，染色镜检多为革兰阳性双球菌，偶尔有短链出现(见中插彩版图2)。

4.2 PCR诊断 根据猪链球菌SC19株延伸因子EF-Tu的基因序列CP020863.1，设计了一对特异性的检测引物(StuF：5′-TTCTATCGATGCTGCTCCAG AAGAGCGCGAAC-3′，StuR：5′-AGAAGGA TGTGCTCACGAGTTTGTGGCATTGG-3′)，以煮沸的无菌采取的脓液样品为模板进行PCR扩增。扩增体系为TaqPCR Mixer 5 μL，引物(10 nmol/μL)各1 μL，ddH2O 2 μL，模板1 μL，扩增条件为94 ℃预变性3 min后，94 ℃变性30 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸45 s，35个循环后72 ℃延伸2 min。扩增产物采用2%琼脂糖凝胶电泳进行分析，结果扩增出221 bp的特定大小的条带(图3)。将PCR产物送上海生工生物工程技术服务有限公司测序，测序结果进行BLAST比对，比对结果显示扩增片段与猪链球菌SC19株的EF-Tu序列一致，相似度为97%，为链球菌特异性的EF-Tu序列。

图3 PCV2 ORF3基因的PCR扩增