猪瘟高致病性猪蓝耳病和口蹄疫母源抗体的测定及3种疫苗首免日龄的确定

李建玲 ， 赵 庆 ， 蔡扩军 ， 王 涛 ， 任 皓 ， 蒲敬伟 ， 苏 艳

(1.新疆农业大学动物医学学院 ， 新疆 乌鲁木齐 830052 ； 2.新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心 ， 新疆 乌鲁木齐 830063 ； 3.乌鲁木齐市畜牧水产草原技术推广中心 , 新疆 乌鲁木齐 830063 ;4.新疆生产建设兵团第十二师畜牧兽医工作站 ， 新疆 乌鲁木齐 830009)

猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)和猪口蹄疫(FMD)3种疫病是威胁我国养猪业的主要疫病，疫苗接种是控制这3种疫病流行的主要措施。通过吮吸母猪的初乳，仔猪可获得对CSF、HP-PRRS、FMD病毒的被动免疫保护，使仔猪在获得疫苗免疫之前，免受这3种病毒的感染，然而母源抗体的存在会干扰仔猪首次免疫，母源抗体会中和疫苗病毒，影响免疫应答和抗体上升，导致空窗期的出现，不利于疫病预防[1]。因此，仔猪后期获得坚强抗体保护力的关键在于确定3种疫苗的首免日龄，消除母源抗体干扰。一些养殖户盲目照搬现有的免疫方案，根本不考虑自己猪场的实际情况，也不经过严格试验来确定首免时间，猪群免疫抗体水平不能得到保证。为了减少免疫失败，有效防控这3种猪病的发生，对初生哺乳仔猪进行了母源抗体消长的测定，确定3种疫苗的最佳首免日龄，以制定符合生产实际的免疫程序提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验动物 在米东区三道坝镇某养猪场选取4头母猪刚刚生产的30头仔猪进行试验，4头母猪在配种前1周分别免疫过CSF活疫苗(脾淋源)、HP-PRRS活疫苗(JXAI-R株)和猪O型FMD灭活疫苗(O/MYA98/XJ/2010株+O/GX/09-7株)。

1.2 检测试剂 韩国金诺猪瘟病毒抗体(CSFV-Ab)C-ELISA检测试剂盒，北京金诺百特科技有限公司总代理，批号：107HS479。

韩国金诺猪繁殖和呼吸综合征病毒抗体(PRRSV-Ab)间接ELISA检测试剂盒，由北京金诺百特科技有限公司总代理，批号：107HS483。

口蹄疫 0 型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，由中国农业科学院兰州兽医研究所生产，批号：2014092301。

1.3 方法 在第0、1、7、14、21、28、35、42日龄，分别采集猪血液，离心、制备血清，将所有血清保存在-20 ℃冰箱中，集中检测CSF、HP-PRRS和O型FMD的母源抗体。

1.3.1 CSF抗体检测 用ELISA法(参照试剂盒说明书进行操作)检测CSF母源抗体水平。试验成立条件为：[阴性对照血清]OD450平均值>0.5；[阳性对照血清]OD450平均值<0.2。结果判定：样品百分率PC≥40%，判为阳性；样品百分率PC<40%，判为阴性。样品阻断率(%PC)=([阴性对照血清]OD450平均值-样品OD450值)×100%/([阴性对照血清]OD450平均值-[阳性对照血清]OD450平均值)。

1.3.2 HP-PRRS抗体检测 用ELISA法(参照试剂盒说明书进行操作)检测HP-PRRS母源抗体水平。试验成立条件为：[阳性对照血清]OD450平均值≥0.5；[阴性对照血清]OD450平均值≤0.3。结果判定：S/P值≥0.4，判为阳性；S/P值<0.3，判为阴性；0.3≤S/P值<0.4，判为可疑。S/P值=(样品OD450值-[阴性对照血清]OD450平均值)/([阳性对照血清]OD450平均值-[阴性对照血清]OD450平均值)。

1.3.3 O型FMD抗体检测 用液相阻断ELISA法(参照试剂盒说明书进行操作)检测O型FMD母源抗体水平。试验成立条件为：病毒抗原对照平均OD492值在1.0～2.0范围内；阳性对照血清抗体效价在1∶1 024 ±1 滴度；阴性对照血清抗体效价<1∶8。临界值=病毒抗原对照平均OD492值×50%。样品抗体效价≥1∶64为O型FMD抗体合格。

2 结果与分析

在第0、1、7、14、21、28、35、42日龄，分别对30头仔猪采集血清，进行CSF、HP-PRRS和O型FMD母源抗体检测，结果见表1、图1～图3。

表1 3种猪病母源抗体检测结果统计

图1 仔猪CSF母源抗体群体保护率趋势

图2 仔猪HP-PRRS母源抗体群体保护率趋势

图3 仔猪O型FMD母源抗体群体保护率趋势

2.1 按照农业部重大动物疫病免疫方案的要求：CSF和HP-PRRS抗体ELISA检测试验抗体阳性判定为合格；O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试验抗体效价在1∶64以上(含1∶64 )为合格；抗体合格，即认为免疫达到了保护要求，整体免疫抗体群体保护率≥70%为合格。从表1可以看出：试验仔猪在28日龄时，CSF、HP-PRRS和FMD抗体阳性率分别是70%、73.3%和73.3%，随后35日龄已经下降到63.3%、70%和66.7%，CSF和FMD母源抗体的保护率已低于临界值70%，不能达到有效保护，而HP-PRRS母源抗体仍有保护，到42日龄突然骤减到46.7%。

2.2 通过图1～图3可知，仔猪在吃到初乳之前并没有CSF、HP-PRRS和O型FMD抗体。其母源抗体全部来自母猪乳汁，试验仔猪在1～7日龄时，母源抗体保护率迅速达到峰值；之后，随着仔猪的生长，母源抗体水平逐渐呈现缓慢下降趋势；35日龄以后，母源抗体水平下降速度加快。

2.3 从仔猪母源抗体群体保护率趋势图可以看出：CSF的母源抗体的持续期为28～32 d、HP-PRRS为30～35 d、猪FMD为29～34 d。

3 讨论

3.1 本研究结果说明：仔猪的母源抗体主要通过母乳获得，母猪并不能通过胎盘传递母源抗体；如果泌乳期母猪血清中有抗体水平，分析其与仔猪抗体的相关性更有意义；仔猪的母源抗体水平与仔猪的生长呈负相关；仔猪的母源抗体持续时间与母猪自身的抗体水平和仔猪是否吃初乳有关，因此要使仔猪获得较高的母源抗体，应提高母猪的自身抗体并让仔猪及时吃到初乳。

3.2 在确保不发病的情况下，根据3种疫病母源抗体的持续期，确定3种疫苗联合免疫时的最佳首免日龄为28～35日龄。

3.3 在本试验中，仔猪的母源抗体水平1～7日龄达到最高峰，7日龄之后，母源抗体逐渐衰减，并与日龄呈负相关。这与王波等认为的产后 1 日龄达到最高有一定差异，与姚俊庸等报道的7日龄仔猪母源抗体最高一致[2-3]。

3.4 保证母猪在泌乳前维持有高效的母源抗体是本研究成立的关键因素，因此生产实践中应在母猪配种前对母猪的抗体进行血清学监测，对没有产生抗体或产生抗体较弱的母猪应及时采取补免。其次，产生抗体较好的母猪在分娩后，要保证所有仔猪都能获得母源抗体，先天性体格较大的仔猪更有优势吃到初乳。对未吃到初乳的仔猪可以单独饲喂以保证获得母源抗体。

3.5 本文着重分析了母源抗体水平对首免日龄的影响，疫苗首免时间除了考虑母源抗体水平外，还应考虑发病的时间，受试验条件限制，未做深入的研究分析。

参考文献：

[1] 孟晓琴，曹世祯，卓春花，等．母源抗体对猪瘟疫苗免疫效果的影响[J].中国兽医杂志，2013，49(1)：40-41.

[2] 王波，陈静，王敏，等．仔猪猪瘟母源抗体消长规律[J].中国兽医学报，2010，30(4)：453-455.

[3] 吴云飞，高寒松，邝从明，等．猪瘟、蓝耳病及猪O型口蹄疫母源抗体消长规律[J].畜牧兽医杂志，2016，35(1)：29-32.