脑卒中后癫痫患者血清脑源性神经营养因子、S100B和神经元特异性烯醇化酶表达及相关性

张艳丽　杨晓华　臧兆萍　王海鹏　李志茹　李美娜　齐宝奎

(齐齐哈尔医学院附属第一医院神经内科，黑龙江　齐齐哈尔　161041)

脑卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，脑卒中后癫痫是指脑卒中发病后继发出现的癫痫，目前研究显示脑梗死后癫痫发病率随年龄增加有明显增长趋势〔1，2〕。病变形成和进展过程中，血清中相关蛋白可以出现明显变化，脑源性神经营养因子(BDNF)、S100B蛋白(S100B)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)是与神经细胞生长、损伤和修复相关的蛋白，其表达量可以在一定条件下提示神经系统病变的损伤程度〔3～5〕。本实验应用酶联免疫吸附实验检测脑卒中后老年癫痫患者血清中BDNF、S100B和NSE表达特征，分析其临床意义。

1　资料与方法

1.1临床资料2016年1～12月齐齐哈尔医学院附属第一医院诊断为脑卒中并继发癫痫的老年患者68例为观察组。纳入标准：①经磁共振成像确诊为脑卒中；②脑卒中后出现2次及以上的癫痫发作。排除标准：①有神经系统手术史、脑梗死病史及癫痫病史；②严重内脏器官疾病。其中男39例，女29例，年龄60～88(平均69.7)岁。其中脑梗死28例，脑出血30例，蛛网膜下腔出血10例。同期脑卒中无继发癫痫的老年患者30例为对照组，其中男15例，女15例，年龄70～84(平均68.6)岁。同期体检证实无明显器质性疾病及神经系统病史的成年人血清标本30例为正常对照组，其中男15例，女15例，年龄50～62(平均55.3)岁。3组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2BDNF、S100B和NSE蛋白的检测观察组于确诊后清晨抽取空腹静脉血，对照组于脑卒中复查时(发病后4～8 w)抽取空腹静脉血，正常对照组常规抽取清晨空腹静脉血，均为3 ml，3 000 r/min离心15 min将血清分清并置于-20℃冰箱中冻存待检。样本均于3 w内集中进行检测，BDNF、S100B和NSE的检测均应用酶联免疫吸附实验，均由同一技师操作，做好质控工作，减少人为误差。

1.3统计学方法应用SAS6.12统计软件进行t、χ2检验，方差分析及线性相关分析。

2　结　果

2.13组BDNF、S100B和NSE表达比较BDNF在正常对照组、对照组和观察组中表达有下降趋势，S100B和NSE在正常对照组、对照组和观察组中表达有升高趋势(P<0.05)。见表1。

2.2BDNF、S100B和NSE表达在观察组不同临床特征中的比较观察组BDNF、S100B和NSE表达量均与病变类型有关，S100B表达与脑卒中类型有关。见表2。

表1　3组BDNF、S100B和NSE表达比较

表2　BDNF、S100B和NSE表达在观察组不同临床特征中的比较

2.3观察组BDNF、S100B和NSE相关性BDNF和NSE表达呈负相关(r=-0.46，P=0.042 1)，BDNF和S100B、S100B和NSE表达均无明显相关性(P>0.05)。

3　讨　论

癫痫是大脑神经元突发性异常放电，引起短暂性大脑功能障碍的慢性疾病，继发性癫痫多发生于多种脑部血管病损和代谢异常〔6〕。脑卒中是一种严重的血液循环障碍疾病，患者病变常继发癫痫，引起并加重患者的脑损害。神经系统损伤与血清中相关蛋白表达失调有关系，其继发的癫痫也与细胞因子有关〔7〕。BDNF是与神经细胞再生相关的一种蛋白，由119个氨基酸构成，分子量为13 kD，以非共价键形式组成。正常情况下中枢神经系统和周围神经系统神经细胞及胶质细胞均可以有BDNF形成，其常以旁分泌形式分泌，也有自分泌生成的，并与神经细胞的顺行轴突运输有关〔8〕。BDNF在机体中可以通过调控细胞膜上钙离子通道蛋白发挥作用，主要作用是保护神经细胞，其机制与BDNF抗自由基损伤及抗氧化有关。还有观点认为BDNF可以减少神经细胞凋亡的形成〔9〕。S100B在机体中是分子量较小的蛋白，常与钙离子有关，正常情况下在神经细胞中表达量较低〔10〕。在缺血性脑病、脑血管疾病等病变时，S100B生成增加，其可以促进局部细胞增殖，对神经细胞起保护功能，但是其过度表达可以损伤神经细胞，不利于病变修复〔11〕。也有研究认为S100B在体内有促进神经细胞损伤后的级联反应作用，可以有效调控神经细胞的活性〔12〕。NSE在体内以酶的形式存在，也被认为在2-磷酸甘油转化为磷酸烯醇式丙酮酸时具有限速作用，当神经细胞损伤和脱髓鞘病变发生后，神经元中NSE可以进入血清中，其量的大小与神经细胞的损伤情况有关，但是在神经元修复期，NSE表达下调的也较慢，可以在一定时间内作为评价神经系统损伤的因子〔13〕。近年也有学者将NSE作为一个敏感的反映神经元损伤的指标，但是其表达并不特异。有研究认为NSE可以在神经内分泌肿瘤中高表达〔14〕。

本研究结果提示BDNF、S100B和NSE 3种蛋白异常表达对脑卒中形成有一定促进作用，也对脑卒中后癫痫形成具有明显作用，癫痫与神经细胞异常放电有关，在此过程中常伴随着神经元修复性改变和神经细胞结构的异常，3种蛋白可能在一定程度上对这些改变有提示作用。BDNF、S100B和NSE 3种蛋白表达量检测可能对观察病变的恢复及进展有一定意义。蛛网膜下腔出患者形成的癫痫病变可能更重，临床中应当关注，并在治疗中密切随诊观察。S100B在病变鉴别中可能也区别于其他两个因子而有一定价值。本文提示BDNF和NSE二者在病变形成中具有一定的负向协同效应，临床中可以将二者联系起来观察病变的发展，研究认为BDNF和NSE在神经系统损伤中是相互拮抗的因素，其动态平衡对于观察病变的进展可能有一定价值〔15，16〕。

1邹蓉，戴永萍，赵合庆.抗癫痫药物对卒中后癫痫患者血清同型半胱氨酸、叶酸、B族维生素水平的影响〔J〕.临床神经病学杂志，2017；30(2)：93-7.

2张瑜，邹飒枫，马莉，等.卒中后癫痫危险因素的病例对照研究〔J〕.中风与神经疾病，2015；32(8)：734-5.

3Wang L，Jiang J，Du L，etal.The prognostic value of serum pregnancy-associated plasma protein A，S100 and high sensitivity C-reactive protein in acute ischemic stroke patients without heparin administration〔J〕.Clin Biochem，2014；47(16-17)：187-91.

4Bharosay A，Bharosay V，Varma M，etal.Correlation of brain biomarker neuron specific enolase (NSE) with degree of disability and neurological worsening in cerebrovascular stroke〔J〕.Indian J Clin Biochem，2012；27(2)：186-90.

5Castren E，Rantamaki T.The role of BDNF and its receptors in depression and antidepressant drug action：reactivation of developmental plasticity〔J〕.Devel Neurobiol，2010；70(32)：289-97.

6周立春，陈天风，伍文清.脑卒中与脑卒中后癫痫-附1000例临床分析〔J〕.卒中与神经疾病，2000；7(3)：174-5.

7李俊兰.36例脑卒中后癫痫的临床分析〔J〕.重庆医学，2011；40(34)：3495-7.

8Kanemoto K，Kawasaki J，Tarao Y，etal.Association of partial epilepsy with brain-derived neurotrophic factor (BDNF) gene polymorphisms〔J〕.Epilepsy Res，2003；53(3)：255-8.

9Mcnamara J，Scharfman H.Temporal lobe epilepsy and the BDNF receptor，trkb〔J〕.Epilepsia，2010；51(5)：46-7.

10Lu C，Li J，Wei S，etal.Elevated plasma S100B concentration is associated with mesial temporal lobe epilepsy in Han Chinese：a case-control study〔J〕.Neurosci Lett，2010；484(2)：139-40.

11Portela L，Tort A，Walz R，etal.Interictal serum S100B levels in chronic neurocysticercosis and idiopathic epilepsy〔J〕.Acta Neurol Scand，2003；108(6)：424-7.

12Falcone T，Janigro D，Lovell R，etal.S100B blood levels and childhood trauma in adolescent inpatients〔J〕.J Psych Res，2015；62(2)：14-22.

13赵丽梅，赵玉萍，高翠红，等.热性惊厥患儿血气指标变化与BDNF、NSE、S100B表达水平的相关性分析〔J〕.热带医学杂志，2015；15(7)：920-1.

14Sankar R，Shin D，Wasterlain C.Serum neuron-specific enolase is a marker for neuronal damage following status epilepticus in the rat〔J〕.Epilepsy Res，1997；28(2)：129-36.

15邓向红，刘迪辉，罗向阳，等.BDNF在癫痫儿童的表达及意义〔J〕.临床医学工程，2010；17(2)：15-6.

16Martinowich K，Manji H，Lu B.New insights into BDNF function in depression and anxiety〔J〕.Nature Neurosci，2007；10(9)：1089-93.