2014～2017年我国临床实验室HbA2和HbF检测室内质控变异系数分析

张志新，王　薇，何法霖，钟　堃，袁　帅，刘佳丽，杜雨轩，王治国

(北京医院 国家老年医学中心 卫生部临床检验中心/北京市临床检验工程技术研究中心，北京　100730)

珠蛋白生成障碍性贫血也称地中海贫血，是由于遗传基因缺陷导致血红蛋白中至少一种珠蛋白合成缺乏或不足，而引起的贫血或病理状态。本病高发于地中海沿岸和东南亚各国，在我国多分布于广东、广西、海南、四川等省区[1]。目前，基因检测是诊断珠蛋白生成障碍性贫血的最可靠方法，但由于诊断的实验技术要求高、操作繁琐、价格昂贵且不易进行有效的质量控制，不适合于大规模的人群筛查。而血红蛋白电泳测试具有较高的应用价值，能够为临床诊断提供有力依据[2]，血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF)的检测分析，在珠蛋白生成障碍性贫血的筛查和诊断中发挥了重要作用。本文对我国HbA2和HbF检测项目的室内质控(IQC)变异系数(CV)进行了分析，了解我国实验室HbA2和HbF检测精密度现状。

1　材料和方法

1.1数据来源收集2014～2017年参加卫生部临床检验中心HbA2和HbF室间质量评价实验室4月份的室内质控结果。实验室通过www.clinet.com.cn网站的室内质控信息界面上报，内容主要包括：两个检验项目质控物生产厂家、质控物批号、质控规则、质控结果个数、当月在控变异系数、累积在控变异系数、实验室使用的方法、仪器、试剂等相关数据。

1.2方法选取由Westgard提出的检测系统的允许不精密度(CV)应小于CLIA’88(美国临床实验室修正法案)临床实验室能力验证计划评价标准的三分之一或四分之一[3]，即<1/3TEa(%)，1/4TEa(%)。根据卫生部临床检验中心室间质量评价标准[4]，HbA2和HbF允许总误差(TEa)为20%，故室内允许CV为：6.67%(1/3TEa)，5%(1/4TEa)。按照不同的允许不精密度评价标准计算2个项目的通过率(通过率=当月在控CV或累积在控CV满足标准的实验室数/回报实验室总数)。对2017年室内质控数据，按照实验室使用的仪器不同进行分组，分别计算2017年HbA2和HbF不同仪器组在两种标准下的变异系数通过率。

2　结果

2.1CV通过率的计算2014～2017年回报实验室数逐年增多，从4年的室内质控结果可以看出，HbA2项目84%以上的实验室精密度都能达1/3TEa的标准，达到1/4TEa标准的实验室比例略有降低，当月在控CV为77.78%～84.47%，累积在控CV为70.83%～81.33%；HbF项目结果除2015年外当月和累积在控CV80%以上的实验室能达到1/3TEa标准，达到1/4TEa标准的实验室比例分布在68.42%～85.07%，2017年CV通过率明显高于2014和2015年，2015年CV通过率较低。以1/3TEa和1/4TEa为标准两个项目当月和累积CV通过率见表1。

表1

两个项目当月和累积CV<1/3TEa和1/4TEa的实验室所占比例(%)

2.2按仪器分组计算2017年实验室CV通过率2017年HbA2和HbF分别有176和67家实验室回报结果，根据实验室使用的仪器不同进行分组，HbA2项目分为4个组(共161家)，HbF分为3个组(共59家)，分别计算2017年HbA2和HbF不同仪器组在两种标准下的CV通过率，见表2。

表2

2017年HbA2和HbF不同仪器组在两种标准下的CV通过率(%)

两个项目使用最多的仪器均是sebia capillarys 2。在sebia capillarys 2分组中，两个项目的当月和累积在控CV两种标准下通过率均达85%以上。其次，两个项目使用较多的仪器是全自动血红蛋白分析仪伯乐VariantⅡ，均有23家实验室，HbA2此分组中CV通过率达85%以上，HbF此分组中CV通过率达90%以上，此分组中HbF项目CV通过率较HbA2项目高。两个项目sebia capillarys 2仪器组和全自动血红蛋白分析仪伯乐VariantⅡ仪器组在两种标准下的精密度较好。其它仪器使用实验室数相对较少。

3讨论本研究数据显示2014～2017年开展HbA2和HbF室内质控的实验室逐年增多，HbA2的室内质控开展情况明显好于HbF。HbF参与实验室数量不多，可能会影响结果的准确性。研究表明，两个检测项目的变异系数满足允许不精密度要求的实验室所占比例不同，两个项目中80%以上的实验室能达到1/3TEa标准(除HbF2015年结果外)，但是达到1/4TEa标准的实验室比例有所降低，说明实验室的精密度水平有待提高。室内质量控制数据的变异系数大小代表着实验室检测系统的不精密度水平，只有测量系统的精密度好才能获得准确可靠的结果[5]，影响实验室变异系数的因素很多，1/3TEa和1/4TEa标准只位于质量规范层级模型的第4级，实验室应从“人员、机器、试剂、方法、环节”等多方面查找原因并持续改进，以提高检测项目精密度水平，提升检测质量，从而达到1/4TEa标准乃至更高的质量规范。

2017年室内质控数据显示，实验室使用的仪器主要有：sebia capillarys 2，全自动血红蛋白分析仪伯乐VariantⅡ，美国海伦娜电泳仪spife3000，sebia minicap 4种，还有几种仪器(Interlab G26，sebia hydrasys，伯乐D-10血红蛋白分析仪，美国helena-V8全自动毛细管电泳仪等)因使用实验室数较少(<5家)，故未进行分组计算其CV通过率。两个项目使用最多的仪器是sebia capillarys 2，其CV通过率较高，在两种评价标准下表现出较好的精密度。法国sebia公司capillarys 2全自动毛细管电泳仪对Hb区带分辨及定量准确度高，可为Hb病(包括珠蛋白生成障碍性贫血及异常Hb病)的初筛提供快速的诊断依据[6]，此仪器的方法学原理是毛细管电泳法，应用毛细管电泳开展珠蛋白生成障碍性贫血的筛查，对预防和降低重型珠蛋白生成障碍性贫血患儿出生具有重要意义[7]。精密度是仪器性能的一项重要指标，良好的精密度水平是获得准确可靠结果的基础。实验室开展珠蛋白生成障碍性贫血血红蛋白检测时应综合考虑各种因素，选择适宜的检测系统，并对检测仪器精密度、准确度等进行验证，保证检测质量。

综上，目前我国实验室HbA2和HbF检测的不精密度水平需进一步提高，实验室应继续加强室内质量控制，通过对当月和累积质控数据CV进行监测，将其与允许不精密度水平比较，评价检测系统是否满足规定的质量要求，为进一步提高检测质量提供方向。

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